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技術(shù)文章
脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)試劑盒-齊一生物
For Research Use only
僅供研究用
貨號(hào):QYS-232001
紫外分光光度法:50 管/48 樣
注意:正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義:
DHAR 存在于細(xì)胞質(zhì)、線粒體和葉綠體中。DHAR 催化 GSH 還原 DHA 生成 AsA 和 GSSG,調(diào)控細(xì)胞 AsA/DHA 比值,是抗壞血酸-谷胱甘肽氧化還原循環(huán)的關(guān)鍵酶。提高植物體內(nèi)的DHAR 活性,可提高植物食品中 AsA 含量,進(jìn)而提高植物食品的營養(yǎng)品質(zhì)。
測(cè)定原理:
DHAR 催化 GSH 還原 DHA 生成 AsA,通過測(cè)定 DHA 減少速率,計(jì)算 DHAR 活性。
實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備:
研缽、冰、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)、1mL 石英比色皿、可調(diào)式移液器和蒸餾水。
試劑組成和配制:
粗酶液提。
1. 按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿。8000g,4℃離心 10min,取上清置冰上待測(cè)。
2. 細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104 個(gè)):試劑一體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議
500 萬細(xì)胞加入 1mL 試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率 300w,超聲 3 秒,間隔 7 秒,總時(shí)間 3min);8000g 4℃離心 20min,取上清液置冰上混勻待測(cè)。
3.血清等液體:直接測(cè)定。
DHAR 測(cè)定操作:
DHAR 活性計(jì)算公式:
(1). 按蛋白濃度計(jì)算
(2). 按樣本質(zhì)量計(jì)算
(3). 按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算
(4)按液體體積計(jì)算
注意事項(xiàng):
臨用前配制的試劑未使用完的 4℃保存,3 天內(nèi)使用完。
齊一生物科技(上海)有限公司主要經(jīng)營進(jìn)口原裝Elisa試劑盒,自產(chǎn)品牌QIYBO試劑盒,并提供免疫分析相關(guān)試劑和檢測(cè)試劑盒。種類齊全,價(jià)格實(shí)惠,凡購買我公司產(chǎn)品的新老客戶,即可享免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)服務(wù),可檢測(cè)多種屬樣本。全程提供技術(shù)支持。如需其他Elisa試劑盒說明書及報(bào)價(jià),可來電咨詢我公司!
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