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培養(yǎng)基滅菌的方法
點(diǎn)擊次數(shù)：279 發(fā)布時(shí)間：2016/4/5
培養(yǎng)基滅菌的方法
什么是培養(yǎng)基滅菌？培養(yǎng)基滅菌的方法有哪些？今天上海古朵與您共享培養(yǎng)基滅菌的方法。
一、熱滅菌的主要原理
1.微生物的熱阻
2.對數(shù)殘存定律
3.理論滅菌時(shí)間的計(jì)算
4.滅菌溫度的選擇
二、滅菌方法
1、高壓蒸汽滅菌：高壓蒸汽滅菌適合于耐高溫培養(yǎng)基、接種器械和蒸餾水的滅菌。培養(yǎng)基在愛制備過程中混入各種雜菌，分裝后應(yīng)立即滅菌，至少應(yīng)在24h內(nèi)完成滅菌工作。滅菌時(shí)一般是在0.105MPa壓力下，溫度121℃時(shí)，滅菌15~30min即可。消毒時(shí)間不宜過長，也不能超過規(guī)定的壓力范圍，否則有機(jī)物質(zhì)特別是維生素類物質(zhì)就會在高溫下分解，失去營養(yǎng)作用，也會使培養(yǎng)基變質(zhì)、變色，甚至難以凝固。 將蒸餾水或自來水裝在三角瓶中，裝水量一般不超過瓶的2/3，用牛皮紙或硫酸紙包扎封口，然后放入高壓鍋中滅菌后即為無菌水。 滅菌后的培養(yǎng)基可放到培養(yǎng)室中預(yù)培養(yǎng)3d，若無污染現(xiàn)象，則證明滅菌是徹底的，可以使用。暫時(shí)不用的培養(yǎng)基置于10℃下保存。含IAA或GA3的培養(yǎng)基應(yīng)在1周內(nèi)用完，其他培養(yǎng)基*多也不要超過1個(gè)月。
2、過濾滅菌：一些植物生長調(diào)節(jié)劑及有機(jī)物，如IAA、GA3、ZT、CM等，遇熱容易分解，不能與培養(yǎng)基一起進(jìn)行高溫滅菌，而要使用細(xì)菌過濾器濾去其中的雜菌。細(xì)菌過濾器與濾膜（孔徑0.45微米）使用之前要行高壓滅菌。過濾后的溶液要立即加入培養(yǎng)基中，若為液體培養(yǎng)基，可在培養(yǎng)基冷卻至30℃時(shí)加入；若為固體培養(yǎng)基，必須在培養(yǎng)基凝固之前（50-60℃）加入，振蕩使溶液與其他成分混合均勻。
上海古朵培養(yǎng)基，僅供實(shí)驗(yàn)室科研使用，質(zhì)量100%保證！如有需要咨詢或訂購的朋友，可以直接聯(lián)系我公司業(yè)務(wù)員，或者本公司網(wǎng)站商鋪的“在線訂單/詢價(jià)留言"中留下您所咨詢的產(chǎn)品及聯(lián)系方式，我們會及時(shí)與您聯(lián)系。
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4.滅菌溫度的選擇
二、滅菌方法
1、高壓蒸汽滅菌：高壓蒸汽滅菌適合于耐高溫培養(yǎng)基、接種器械和蒸餾水的滅菌。培養(yǎng)基在愛制備過程中混入各種雜菌，分裝后應(yīng)立即滅菌，至少應(yīng)在24h內(nèi)完成滅菌工作。滅菌時(shí)一般是在0.105MPa壓力下，溫度121℃時(shí)，滅菌15~30min即可。消毒時(shí)間不宜過長，也不能超過規(guī)定的壓力范圍，否則有機(jī)物質(zhì)特別是維生素類物質(zhì)就會在高溫下分解，失去營養(yǎng)作用，也會使培養(yǎng)基變質(zhì)、變色，甚至難以凝固。 將蒸餾水或自來水裝在三角瓶中，裝水量一般不超過瓶的2/3，用牛皮紙或硫酸紙包扎封口，然后放入高壓鍋中滅菌后即為無菌水。 滅菌后的培養(yǎng)基可放到培養(yǎng)室中預(yù)培養(yǎng)3d，若無污染現(xiàn)象，則證明滅菌是徹底的，可以使用。暫時(shí)不用的培養(yǎng)基置于10℃下保存。含IAA或GA3的培養(yǎng)基應(yīng)在1周內(nèi)用完，其他培養(yǎng)基*多也不要超過1個(gè)月。
2、過濾滅菌：一些植物生長調(diào)節(jié)劑及有機(jī)物，如IAA、GA3、ZT、CM等，遇熱容易分解，不能與培養(yǎng)基一起進(jìn)行高溫滅菌，而要使用細(xì)菌過濾器濾去其中的雜菌。細(xì)菌過濾器與濾膜（孔徑0.45微米）使用之前要行高壓滅菌。過濾后的溶液要立即加入培養(yǎng)基中，若為液體培養(yǎng)基，可在培養(yǎng)基冷卻至30℃時(shí)加入；若為固體培養(yǎng)基，必須在培養(yǎng)基凝固之前（50-60℃）加入，振蕩使溶液與其他成分混合均勻。
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