DAPI染色液（5μg/ml）使用說明書

    DAPI染色液簡介：

    DAPI細胞染色液（DAPIStainingSolution）是適用于常見細胞和組織細胞核染色的染色液。DAPI，即2-（4-Amidinophenyl）-6-indolecarbamidinedihydrochloride，也稱DAPIdihydrochloride，分子式為C16H15N5·2HCl，分子量為350.25。可以穿透細胞膜的藍色熒光染料，和雙鏈DNA結合后可以產(chǎn)生比DAPI自身強20多倍的熒光，靈敏度高于EB。

    古朵生物專家強調(diào)：DAPI染色常用于細胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。DAPI也常用于普通的細胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色。DAPI的激發(fā)波長為340nm，發(fā)射波長為488nm，DAPI和雙鏈DNA結合后，激發(fā)波長為364nm，發(fā)射波長為454nm。本DAPI染色液可以直接用于固定細胞或組織的細胞核染色，亦可以按照具體實驗要求，稀釋到相應濃度后進行染色。一般推薦工作濃度為0.5ug～10ug/ml。

    DAPI染色液組成：

    DAPIStainingSolution（5μg/ml）10ml/50ml-20℃避光

    主要成分：主要由DAPI、溶劑、防腐劑等組成。

    自備材料：

    熒光顯微鏡

    蒸餾水

    微量移液

    PBS或生理鹽水

    DAPI染色液操作步驟（僅供參考）：

    對于細胞或組織樣品，固定后沖洗去除固定劑。隨后如果需要進行免疫熒光染色，則行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續(xù)步驟進行DAPI染色，如果不需要進行其它染色，則直接進行后續(xù)的DAPI染色。對于貼壁細胞或組織切片，加入少量DAPI染色液，覆蓋住樣品即可。對于懸浮細胞，至少加入待染色樣品3倍體積以上的DAPI染色液，混勻。

    室溫放置5～8min。

    3.輕輕吸取DAPI細胞染色液。

    4、用無菌的PBS或生理鹽水清洗2～3次，每次3～5min。5.直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。

    染色結果：細胞發(fā)生凋亡時，會看到凋亡細胞的細胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染。

    注意事項：

    DAPI染色液的濃度適用于各種常規(guī)染色的需要。

    熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡快檢測。

    為減緩熒光淬滅，可以使用抗熒光淬滅封片液。

    4、避免反復凍融，否則容易失效。

    5、DAPI對人體有一定刺激性，請注意適當防護。

    6、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

    有效期：6個月有效。

原創(chuàng)作者：上海古朵生物科技有限公司