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1301；人急性T淋巴細(xì)胞保存
點擊次數(shù)：485 發(fā)布時間：2015/11/30
細(xì)胞名：1301；人急性T淋巴細(xì)胞保存
細(xì)胞別名：1301細(xì)胞；人急性T淋巴細(xì)胞 人急性T淋巴細(xì)胞；1301細(xì)胞
生物安全水平：1
培養(yǎng)基&血清：見培養(yǎng)條件
生物體：人類（人）
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項：
1、如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細(xì)胞即時離心，加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決
2、貼壁細(xì)胞生長緩慢；適當(dāng)提高血清濃度（不能超過20%），或可根據(jù)該細(xì)胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)
3、生長不均：貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細(xì)胞進行消化，重懸打散細(xì)胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程1301；人急性T淋巴細(xì)胞保存（請嚴(yán)格遵照無菌操作）
1、吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次，加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細(xì)胞（注意把握消化時間，通�？刂圃�1-2min）
2、鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到細(xì)胞漂�。┤サ粢让�，加6-8ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散
3、取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
4、注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存
特別注意：（如使用公共實驗室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng)）
1、收到細(xì)胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清，（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間*長不宜超過72小時）
2、貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)
3、如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室
相關(guān)細(xì)胞資料：
細(xì)胞特性：懸浮
細(xì)胞類型：內(nèi)皮
培養(yǎng)條件：GIBCO（1640+10%胎牛血清）
培養(yǎng)環(huán)境：空氣，95%；二氧化碳（CO2），5%
溫度：37.0℃
保存：凍存血清：95%完全培養(yǎng)基；5%二甲基亞砜（DMSO）
儲存溫度：液氮
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