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動物組織樣本的前處理
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上傳時間:2016/3/4 16:00:36
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上 傳 者:江萊生物-廠家現(xiàn)貨價格
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一般采用pH 7.4, 0.01mol/L Tris-HCl, 1mmol/L EDTA-2Na, 0.01mol/L蔗糖,0.8%氯化鈉溶液或直接用0.86%的生理鹽水作為勻漿介質(zhì)。
二、組織勻漿的制備
1、取組織塊(0.1g~0.2g)*少可到2~5mg在冰冷的生理鹽水中漂洗,除去血液,濾紙拭干,準(zhǔn)確稱重,放入5ml的勻漿管中。
2、按重量(g):體積(ml)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(pH7.4, 0.01mol/L Tris-HCl,1mmol/L EDTA-2Na ,0.01mol/L蔗糖,0.8%的氯化鈉溶液)或者0.86%的生理鹽水于勻漿管中,冰水浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎組織塊。
3、勻漿的方式有多種:手工勻漿,機器勻漿,超聲粉碎。
① 手工勻漿:左手持勻漿管將下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手將搗桿垂直插入套管中,上下轉(zhuǎn)動研磨數(shù)十次(6~8分鐘),充分研碎,制成10%的勻漿液。
② 機器勻漿:用組織搗碎機10000~15000 轉(zhuǎn)/分 上下研磨制成10%組織勻漿,也可用內(nèi)切式組織勻漿機制備(勻漿時間10秒/次,間隙30秒,連續(xù)3~5次,在冰水中進行),皮膚、肌肉組織等可延長勻漿時間。
③ 超聲粉碎:用超聲粉碎機進行粉碎,可用Soniprep150型超聲波發(fā)生器以振幅14微米超聲處理30秒使細胞破碎,也可用國產(chǎn)超聲波發(fā)生儀,用400安培,5秒/次,間隙10秒反復(fù)3~5次。
鏡檢觀察:取少量組織勻漿作涂片(直接涂片、染色均可以),顯微鏡下觀察細胞是否破碎,若沒有則可延長勻漿時間。
4、將制備好的10%勻漿液用普通離心機或低溫低速離心機2500轉(zhuǎn)/分左右,離心10~15分鐘,取上清液進行測定.
三、樣本保存:
動物組織樣本暫時不測定,可立即低溫凍存,溫度越低越好,中間如不反復(fù)凍融,-20℃以下可保存三個月,-70℃以下可保存六個月。
制備好的勻漿液建議不要凍存,當(dāng)天進行測定,如放置時間過長相關(guān)酶活會有所下降,部分指標(biāo)4℃可存放3~5天(如SOD要存放2~3天,MDA可存放3~5,總蛋白測定可存5~7天等)
*新產(chǎn)品:
PIPES緩沖液(10mmol/L,pH6.8) | 貨號:CT0065 規(guī)格:100ml 儲存條件:4℃,8個月 用途:流式細胞術(shù)檢測細胞周期 注意事項:主要由PIPES、氯化鈉、氯化鎂、Triton X-100等組成。 | |||
碳酸氫鈉溶液(7.5%) | 貨號:CC0142 規(guī)格:100ml 儲存條件:4℃,6個月 用途:調(diào)整細胞培養(yǎng)基中pH值 注意事項:無菌溶液,經(jīng)過濾除菌處理,注意無菌操作。 | |||
石碳酸復(fù)紅染色液 | 貨號:DM0090 規(guī)格:100ml 儲存條件:室溫,避光,18個月 用途:又稱石炭酸復(fù)紅染色液,多種細菌染色,包括結(jié)核桿菌、革蘭氏菌 注意事項:染色液呈紅色。 | |||
Ficoll溶液(8% m/V) | 貨號:CS0032 規(guī)格:100ml 儲存條件:4℃,2個月 用途:分離完整的酵母囊泡,又稱Ficoll梯度緩沖液 注意事項:無菌溶液。主要由8%Ficoll 400、Ficoll梯度緩沖液、蛋白酶抑制劑組成。經(jīng)過濾除菌處理。 | |||
G418溶液(geneticin,20mg/ml) | 貨號:CA0002 規(guī)格:10ml 儲存條件:—20℃,避光,6個月 用途:又稱遺傳霉素,新霉素,對細菌、酵母、高等植物、原生生物、哺乳動物細胞具有氨基苷類毒性,對真核細胞進行篩選。 注意事項:無菌溶液。pH7.2-7.9,經(jīng),一般工作濃度為50-1000ug/ml。 | |||
甘油三脂(TG)檢測試劑盒(單試劑GPO-PAP比色法) | 貨號:TC1243 規(guī)格:100T 儲存條件:4℃,避光,6個月 用途:單試劑GPO-PAP法檢測血清、血漿、組織等樣本的甘油三酯(又稱三酰甘油)含量 注意事項:又稱GPO-PAP酶法或酶,為國內(nèi)外推薦的方法,甘油三脂被分解成甘油,甘油被甘油激酶及ATP磷酸化,經(jīng)GPO氧化成G3P,再經(jīng)3P反應(yīng)顯色,分光光度計或全自動生化分析儀500-520nm比色檢測吸光度。 | |||
丙酮酸檢測試劑盒(測血清、組織等,酶比色法) | 貨號:TC0755 規(guī)格:50T 儲存條件:—20℃,避光,6個月 用途:定量檢測血清、腦脊液、血漿、體液、組織等樣品的丙酮酸含量 注意事項:利用在NAD存在下,乳酸脫氫酶催化乳酸氧化成丙酮酸,同時產(chǎn)生NADH,檢測340nm處吸光度。 | |||
JYBL-Ⅰ脫鈣液 | 貨號:DD0016 規(guī)格:500ml 儲存條件:室溫,避光,6個月 用途:快速脫鈣液,推薦用于日常骨組織病理樣本的脫鈣,對組織損傷小。 注意事項:主要由甲酸、福爾馬林等組成,一般24~36h完成脫鈣。 | |||
羧甲基纖維素溶液(CMC,1%) | 貨號:CC0113 規(guī)格:500ml 儲存條件:4℃,6個月 用途:增加懸浮細胞培養(yǎng)基的黏度 注意事項:經(jīng)高壓滅菌處理。 | |||
枸櫞酸鈉抗凝劑(3.2%) | 貨號:R10126 規(guī)格:100ml 儲存條件:4℃,6個月 用途:離子螯合類抗凝血藥,適用于凝血象和紅細胞沉降率測定。 注意事項:抗凝劑(3.2%)與血液的比例一般采用1:9(V:V) | |||
磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液(0.2mol/L,pH5.8-8.0) | 貨號:R00407 規(guī)格:500ml 儲存條件:室溫,12個月 用途:常規(guī)磷酸鹽緩沖液 注意事項:主要由磷酸氫二鈉和磷酸二氫鈉組成,磷酸根濃度為0.2mol/L.pH值可選5.8,5.9,6.0,6.1,6.2,6.3,6.4,6.5,6.6,6.7,6.8.6.9,7.0,7.1,7.2,7.3,7.4,7.5,7.6,7.7,7.8,7.9,8.0。 | |||
Earle's平衡鹽溶液(10×EBSS,含鈣鎂糖) | 貨號:CC0046 規(guī)格:500ml 儲存條件:4℃,3個月 用途:又稱Earle's BSS,厄爾平衡鹽溶液,簡稱為EBSS,本試劑含鈣離子、鎂離子、葡萄糖、無酚紅,常用于培養(yǎng)細胞的清洗,尤其是神經(jīng)細胞。 注意事項:經(jīng)無菌處理。主要由氯化鉀、磷酸二氫鉀、氯化鈉、碳酸氫鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀等組成,無酚紅,含鈣鎂糖。pH值為7.4。使用時需用無菌水稀釋為1×后使用。 | |||
草酸水溶液(2%) | 貨號:DZ0236 規(guī)格:500ml 儲存條件:室溫,12個月 用途:組織切片漂白 注意事項:主要由草酸、去離子水組成。 | |||
葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)檢測試劑盒(簡易比色法) | 貨號:TE0123 規(guī)格:100T 儲存條件:—20℃,避光,6個月 用途:簡易法檢測葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(6GPD)活性 注意事項:通過G6PD獲得NAPDH,通過檢測340nm處NADPH吸光度增高速率,計算酶的活性。 | |||
乙醇-福爾馬林-醋酸固定液 | 貨號:DF0170 規(guī)格:500ml 儲存條件:室溫,避光,12個月 用途:復(fù)合固定液,既有脫水作用,也有交聯(lián)作用 注意事項:屬于脫水-交聯(lián)固定劑,甲醛、乙酸溶于95%的乙醇即成。 | |||
甘油溶液(100%,無菌) | 貨號:R00334 規(guī)格:100ml 儲存條件:室溫,12個月 用途:化學(xué)儲存液 注意事項:經(jīng)高壓滅菌。 | |||
Tris-HCl緩沖液(0.1mol/L,pH6.4) | 貨號:R00222 規(guī)格:500ml 儲存條件:室溫,12個月 用途:常規(guī)pH緩沖液 注意事項:主要由Tris、去離子水組成,調(diào)pH值至6.4。 | |||
芽孢染色液 | 貨號:DM0028 規(guī)格:3×20ml 儲存條件:室溫,避光,12個月 用途:又稱芽胞染色液,觀察菌體芽孢結(jié)構(gòu) 注意事項:芽孢呈紅色,菌體呈藍色 | |||
電解脫鈣液(甲酸法) | 貨號:DD0022 規(guī)格:500ml 儲存條件:室溫,6個月 用途:電解脫鈣液 注意事項: | |||
雙鏈DNA變性緩沖液 | 貨號:NH0079 規(guī)格:100ml 儲存條件:室溫,12個月 用途:又稱為中性轉(zhuǎn)移緩沖液,常用于雜交 注意事項: | |||
肌酐(Cr)檢測試劑盒(去蛋白終點法) | 貨號:TC1193 規(guī)格:100T 儲存條件:4℃,避光,6個月 用途:去蛋白終點法檢測血清、血漿、尿液等樣本的肌酐含量,可用于內(nèi)生肌酐清除率的測定 注意事項:肌酐與PA在鎢酸的參與下,生成橘紅色的肌酐PA復(fù)合物,分光光度計510nm比色檢測吸光度。 | |||
黏蛋白染色液(溫和甲基化法) | 貨號:DG0060 規(guī)格:2×50ml 儲存條件:4℃,避光,6個月 用途:區(qū)分黏蛋白中酸性基團:羧基和硫酸根 注意事項:酸性甲醇與阿利新藍聯(lián)合使用,碳水化合物含有羧基呈陰性,出現(xiàn)任何著色則意味著含有硫酸根。 | |||
姬姆薩染色液(Giemsa stain,1:9) | 貨號:DM0002 規(guī)格:100ml 儲存條件:室溫,24個月 用途:血液和細胞涂片、細菌、染色體顯帶、原生動物寄生蟲等染色 注意事項:主要由吉姆薩原液、磷酸鹽緩沖液組成,按1:9混合使用。細胞核呈紫紅色或藍紫色,胞漿呈粉紅色。 |
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