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動物組織樣本的前處理

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上傳時間:2016/3/4 16:00:36

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上 傳 者:江萊生物-廠家現(xiàn)貨價格

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 一、勻漿介質(zhì)的制備:

 

一般采用pH 7.40.01mol/L Tris-HCl1mmol/L EDTA-2Na0.01mol/L蔗糖,0.8%氯化鈉溶液或直接用0.86%的生理鹽水作為勻漿介質(zhì)。

二、組織勻漿的制備

1、取組織塊(0.1g~0.2g)*少可到25mg在冰冷的生理鹽水中漂洗,除去血液,濾紙拭干,準(zhǔn)確稱重,放入5ml的勻漿管中。

2、按重量(g):體積(ml)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)(pH7.4, 0.01mol/L Tris-HCl,1mmol/L EDTA-2Na ,0.01mol/L蔗糖,0.8%的氯化鈉溶液)或者0.86%的生理鹽水于勻漿管中,冰水浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎組織塊。

3、勻漿的方式有多種:手工勻漿,機器勻漿,超聲粉碎。

① 手工勻漿:左手持勻漿管將下端插入盛有冰水混合物的器皿中,右手將搗桿垂直插入套管中,上下轉(zhuǎn)動研磨數(shù)十次(6~8分鐘),充分研碎,制成10%的勻漿液。

② 機器勻漿:用組織搗碎機10000~15000 轉(zhuǎn)/分 上下研磨制成10%組織勻漿,也可用內(nèi)切式組織勻漿機制備(勻漿時間10秒/次,間隙30秒,連續(xù)3~5次,在冰水中進行),皮膚、肌肉組織等可延長勻漿時間。

③ 超聲粉碎:用超聲粉碎機進行粉碎,可用Soniprep150型超聲波發(fā)生器以振幅14微米超聲處理30秒使細胞破碎,也可用國產(chǎn)超聲波發(fā)生儀,用400安培,5秒/次,間隙10秒反復(fù)3~5次。

        鏡檢觀察:取少量組織勻漿作涂片(直接涂片、染色均可以),顯微鏡下觀察細胞是否破碎,若沒有則可延長勻漿時間。

4、將制備好的10%勻漿液用普通離心機或低溫低速離心機2500轉(zhuǎn)/分左右,離心10~15分鐘,取上清液進行測定.

、樣本保存:

        動物組織樣本暫時不測定,可立即低溫凍存,溫度越低越好,中間如不反復(fù)凍融,-20℃以下可保存三個月,-70℃以下可保存六個月。

        制備好的勻漿液建議不要凍存,當(dāng)天進行測定,如放置時間過長相關(guān)酶活會有所下降,部分指標(biāo)4℃可存放3~5天(如SOD要存放2~3天,MDA可存放3~5,總蛋白測定可存5~7天等)

*新產(chǎn)品:

PIPES緩沖液(10mmol/L,pH6.8) 貨號:CT0065
規(guī)格:100ml
儲存條件:4℃,8個月
用途:流式細胞術(shù)檢測細胞周期
注意事項:主要由PIPES、氯化鈉、氯化鎂、Triton X-100等組成。
     
碳酸氫鈉溶液(7.5%) 貨號:CC0142
規(guī)格:100ml
儲存條件:4℃,6個月
用途:調(diào)整細胞培養(yǎng)基中pH值
注意事項:無菌溶液,經(jīng)過濾除菌處理,注意無菌操作。
     
石碳酸復(fù)紅染色液 貨號:DM0090
規(guī)格:100ml
儲存條件:室溫,避光,18個月
用途:又稱石炭酸復(fù)紅染色液,多種細菌染色,包括結(jié)核桿菌、革蘭氏菌
注意事項:染色液呈紅色。
     
Ficoll溶液(8% m/V) 貨號:CS0032
規(guī)格:100ml
儲存條件:4℃,2個月
用途:分離完整的酵母囊泡,又稱Ficoll梯度緩沖液
注意事項:無菌溶液。主要由8%Ficoll 400、Ficoll梯度緩沖液、蛋白酶抑制劑組成。經(jīng)過濾除菌處理。
     
G418溶液(geneticin,20mg/ml) 貨號:CA0002
規(guī)格:10ml
儲存條件:—20℃,避光,6個月
用途:又稱遺傳霉素,新霉素,對細菌、酵母、高等植物、原生生物、哺乳動物細胞具有氨基苷類毒性,對真核細胞進行篩選。
注意事項:無菌溶液。pH7.2-7.9,經(jīng),一般工作濃度為50-1000ug/ml。
     
甘油三脂(TG)檢測試劑盒(單試劑GPO-PAP比色法) 貨號:TC1243
規(guī)格:100T
儲存條件:4℃,避光,6個月
用途:單試劑GPO-PAP法檢測血清、血漿、組織等樣本的甘油三酯(又稱三酰甘油)含量
注意事項:又稱GPO-PAP酶法或酶,為國內(nèi)外推薦的方法,甘油三脂被分解成甘油,甘油被甘油激酶及ATP磷酸化,經(jīng)GPO氧化成G3P,再經(jīng)3P反應(yīng)顯色,分光光度計或全自動生化分析儀500-520nm比色檢測吸光度。
     
丙酮酸檢測試劑盒(測血清、組織等,酶比色法) 貨號:TC0755
規(guī)格:50T
儲存條件:—20℃,避光,6個月
用途:定量檢測血清、腦脊液、血漿、體液、組織等樣品的丙酮酸含量
注意事項:利用在NAD存在下,乳酸脫氫酶催化乳酸氧化成丙酮酸,同時產(chǎn)生NADH,檢測340nm處吸光度。
     
JYBL-Ⅰ脫鈣液 貨號:DD0016
規(guī)格:500ml
儲存條件:室溫,避光,6個月
用途:快速脫鈣液,推薦用于日常骨組織病理樣本的脫鈣,對組織損傷小。
注意事項:主要由甲酸、福爾馬林等組成,一般24~36h完成脫鈣。
     
羧甲基纖維素溶液(CMC,1%) 貨號:CC0113
規(guī)格:500ml
儲存條件:4℃,6個月
用途:增加懸浮細胞培養(yǎng)基的黏度
注意事項:經(jīng)高壓滅菌處理。
     
枸櫞酸鈉抗凝劑(3.2%) 貨號:R10126
規(guī)格:100ml
儲存條件:4℃,6個月
用途:離子螯合類抗凝血藥,適用于凝血象和紅細胞沉降率測定。
注意事項:抗凝劑(3.2%)與血液的比例一般采用1:9(V:V)
     
磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液(0.2mol/L,pH5.8-8.0) 貨號:R00407
規(guī)格:500ml
儲存條件:室溫,12個月
用途:常規(guī)磷酸鹽緩沖液
注意事項:主要由磷酸氫二鈉和磷酸二氫鈉組成,磷酸根濃度為0.2mol/L.pH值可選5.8,5.9,6.0,6.1,6.2,6.3,6.4,6.5,6.6,6.7,6.8.6.9,7.0,7.1,7.2,7.3,7.4,7.5,7.6,7.7,7.8,7.9,8.0。
     
Earle's平衡鹽溶液(10×EBSS,含鈣鎂糖) 貨號:CC0046
規(guī)格:500ml
儲存條件:4℃,3個月
用途:又稱Earle's BSS,厄爾平衡鹽溶液,簡稱為EBSS,本試劑含鈣離子、鎂離子、葡萄糖、無酚紅,常用于培養(yǎng)細胞的清洗,尤其是神經(jīng)細胞。
注意事項:經(jīng)無菌處理。主要由氯化鉀、磷酸二氫鉀、氯化鈉、碳酸氫鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀等組成,無酚紅,含鈣鎂糖。pH值為7.4。使用時需用無菌水稀釋為1×后使用。
     
草酸水溶液(2%) 貨號:DZ0236
規(guī)格:500ml
儲存條件:室溫,12個月 
用途:組織切片漂白
注意事項:主要由草酸、去離子水組成。
     
葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)檢測試劑盒(簡易比色法) 貨號:TE0123
規(guī)格:100T
儲存條件:—20℃,避光,6個月
用途:簡易法檢測葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(6GPD)活性
注意事項:通過G6PD獲得NAPDH,通過檢測340nm處NADPH吸光度增高速率,計算酶的活性。
     
乙醇-福爾馬林-醋酸固定液 貨號:DF0170
規(guī)格:500ml
儲存條件:室溫,避光,12個月
用途:復(fù)合固定液,既有脫水作用,也有交聯(lián)作用
注意事項:屬于脫水-交聯(lián)固定劑,甲醛、乙酸溶于95%的乙醇即成。
     
甘油溶液(100%,無菌) 貨號:R00334
規(guī)格:100ml
儲存條件:室溫,12個月
用途:化學(xué)儲存液
注意事項:經(jīng)高壓滅菌。
     
Tris-HCl緩沖液(0.1mol/L,pH6.4) 貨號:R00222
規(guī)格:500ml
儲存條件:室溫,12個月 
用途:常規(guī)pH緩沖液
注意事項:主要由Tris、去離子水組成,調(diào)pH值至6.4。
     
芽孢染色液 貨號:DM0028
規(guī)格:3×20ml
儲存條件:室溫,避光,12個月
用途:又稱芽胞染色液,觀察菌體芽孢結(jié)構(gòu)
注意事項:芽孢呈紅色,菌體呈藍色
     
電解脫鈣液(甲酸法) 貨號:DD0022
規(guī)格:500ml
儲存條件:室溫,6個月
用途:電解脫鈣液
注意事項:
     
雙鏈DNA變性緩沖液 貨號:NH0079
規(guī)格:100ml
儲存條件:室溫,12個月
用途:又稱為中性轉(zhuǎn)移緩沖液,常用于雜交
注意事項:
     
肌酐(Cr)檢測試劑盒(去蛋白終點法) 貨號:TC1193
規(guī)格:100T
儲存條件:4℃,避光,6個月
用途:去蛋白終點法檢測血清、血漿、尿液等樣本的肌酐含量,可用于內(nèi)生肌酐清除率的測定
注意事項:肌酐與PA在鎢酸的參與下,生成橘紅色的肌酐PA復(fù)合物,分光光度計510nm比色檢測吸光度。
     
黏蛋白染色液(溫和甲基化法) 貨號:DG0060
規(guī)格:2×50ml
儲存條件:4℃,避光,6個月 
用途:區(qū)分黏蛋白中酸性基團:羧基和硫酸根
注意事項:酸性甲醇與阿利新藍聯(lián)合使用,碳水化合物含有羧基呈陰性,出現(xiàn)任何著色則意味著含有硫酸根。
     
姬姆薩染色液(Giemsa stain,1:9) 貨號:DM0002
規(guī)格:100ml
儲存條件:室溫,24個月
用途:血液和細胞涂片、細菌、染色體顯帶、原生動物寄生蟲等染色
注意事項:主要由吉姆薩原液、磷酸鹽緩沖液組成,按1:9混合使用。細胞核呈紫紅色或藍紫色,胞漿呈粉紅色。
     

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