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細(xì)胞前處理
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上傳時(shí)間:2015/12/25 9:42:13
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上 傳 者:江萊生物-廠家現(xiàn)貨價(jià)格
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養(yǎng)的是人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,用25cm2的培養(yǎng)瓶養(yǎng)的,我們這里沒有超聲破碎儀和研磨器,之前有同學(xué)用反復(fù)凍融后再加裂解液的方法,結(jié)果不是很理想,剛才打電話咨詢咱們技術(shù)工程師他說可以用勻漿器,我們的勻漿器是PRO200 Bio-Gen siries serial NO.是02-0473,一搬都是裂解組織的,不知道這種可以裂解細(xì)胞嗎?如果可以,基于我們實(shí)驗(yàn)室條件有限,您建議我們怎么做實(shí)驗(yàn)結(jié)果會好些呢?麻煩您把實(shí)驗(yàn)的步驟發(fā)給我好嗎?我們剛剛做實(shí)驗(yàn),有些東西不夠了解,麻煩您講的詳細(xì)些。還有就是測SOD、CAT、GSH-PX、MDA時(shí),細(xì)胞處理的過程都一樣嗎, 我還想再咨詢下,如果用這個(gè)勻漿器,細(xì)胞量少會不會貼到勻漿器的轉(zhuǎn)子上,也會影響結(jié)果呢?如果用化學(xué)裂解的方法呢?您建議用哪個(gè)廠家的裂解液呢,25cm2的培養(yǎng)瓶您建議一瓶加多少裂解液呢?
這個(gè)根據(jù)收集細(xì)胞數(shù)量,培養(yǎng)細(xì)胞的前處理:將培養(yǎng)細(xì)胞消化,1000~1500轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘,棄上清,留下層細(xì)胞,每管加0.3~0.5ml生理鹽水或勻漿介質(zhì)制備成106/cm3細(xì)胞懸液,即106/ml,再進(jìn)行破碎。破碎細(xì)胞的方法有三種:①、用勻漿器勻漿。②、用超聲粉碎器粉碎。③、反復(fù)凍溶3次(第③種方法有時(shí)會影響酶活力)。制備好的細(xì)胞懸液一般不需要離心。細(xì)胞數(shù)量較大可以適當(dāng)加大勻漿介質(zhì)量。至于老師考慮的會黏附到勻漿管上,這樣會有一定量的損失,總體不會干擾測定結(jié)果。裂解液考慮到成分可能干擾反應(yīng),所以不推薦使用,或者使用相對溫和的裂解液Triton X-100.建議采用物理方法破碎細(xì)胞
*新產(chǎn)品:
*新產(chǎn)品:
A0511|雌三醇純抗原及半抗原"類別:純抗原及半抗原(用于制備標(biāo)記抗原和抗體)
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A0702|皮質(zhì)醇純抗原及半抗原"類別:純抗原及半抗原(用于制備標(biāo)記抗原和抗體)
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A9003|牛血清白蛋白(第五組分)純抗原及半抗原"類別:純抗原及半抗原(用于制備標(biāo)記抗原和抗體)
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B0101|甲胎蛋白(AFP)部分純化抗原"類別:部分純化抗原 (配制免疫分析標(biāo)準(zhǔn)品)
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B0102|癌胚抗原(CEA)純抗原及半抗原"類別:部分純化抗原 (配制免疫分析標(biāo)準(zhǔn)品)
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B0103|人肝鐵蛋白(Ferritin)"類別:部分純化抗原 (配制免疫分析標(biāo)準(zhǔn)品)
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B0104|人前列腺特異性抗原(PSA)"類別:部分純化抗原 (配制免疫分析標(biāo)準(zhǔn)品)
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B0105|CA12-5部分純化抗原"類別:部分純化抗原 (配制免疫分析標(biāo)準(zhǔn)品)
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B0106|CA19-9部分純化抗原"類別:部分純化抗原 (配制免疫分析標(biāo)準(zhǔn)品)
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B0108|CA242部分純化抗原"類別:部分純化抗原 (配制免疫分析標(biāo)準(zhǔn)品)
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B0109|CA50部分純化抗原"類別:部分純化抗原 (配制免疫分析標(biāo)準(zhǔn)品)
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B0208|人甲狀腺球蛋白(hTG)"類別:部分純化抗原 (配制免疫分析標(biāo)準(zhǔn)品)
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B0210|人促甲狀腺激素(TSH)"類別:部分純化抗原 (配制免疫分析標(biāo)準(zhǔn)品)
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B0301|人血清白蛋白 (HSA)"類別:部分純化抗原 (配制免疫分析標(biāo)準(zhǔn)品)
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B0302|α1-微球蛋白 (α1-MG)"類別:部分純化抗原 (配制免疫分析標(biāo)準(zhǔn)品)
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B0303|β2-微球蛋白 (β2-MG)"類別:部分純化抗原 (配制免疫分析標(biāo)準(zhǔn)品)
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B0401|豬胰島素 (p-Ins)部分純化抗原"類別:部分純化抗原 (配制免疫分析標(biāo)準(zhǔn)品)
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B0402|胰高血糖素(Glu)部分純化抗原"類別:部分純化抗原 (配制免疫分析標(biāo)準(zhǔn)品)
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B0501|人絨毛膜促性腺激素(hCG)"類別:部分純化抗原 (配制免疫分析標(biāo)準(zhǔn)品)
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B0503|人促黃體生成激素(LH)"類別:部分純化抗原 (配制免疫分析標(biāo)準(zhǔn)品)
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B0504|人促卵泡生成激素(FSH)"類別:部分純化抗原 (配制免疫分析標(biāo)準(zhǔn)品)
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B0505|人胎盤催乳素(hPL)"類別:部分純化抗原 (配制免疫分析標(biāo)準(zhǔn)品)
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B0801|人生長激素(hGH)"類別:部分純化抗原 (配制免疫分析標(biāo)準(zhǔn)品)
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B9003|牛血清白蛋白(BSA)"類別:部分純化抗原 (配制免疫分析標(biāo)準(zhǔn)品)
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D0101|AFP單抗(已配對)"類別:單克隆抗體
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D0101e|HRP-AFP單抗"類別:單克隆抗體
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D0102|CEA單抗(已配對)"類別:單克隆抗體
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D0103|人鐵蛋白單抗(已配對)"類別:單克隆抗體
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D0104|PSA單抗(已配對)"類別:單克隆抗體
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D0104e|HRP-PSA單抗"類別:單克隆抗體
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D0104f| 游離-PSA單抗(已配對)"類別:單克隆抗體
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D0105|CA12-5單抗(已配對)"類別:單克隆抗體
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D0106|CA19-9單抗(已配對)"類別:單克隆抗體
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D0107|CA15-3單抗(已配對)"類別:單克隆抗體
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D0108|CA50單抗(已配對)"類別:單克隆抗體
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D0110|CA242單抗(已配對)"類別:單克隆抗體
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D0202|T3單抗單克隆抗體"類別:單克隆抗體
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D0203|T4單抗單克隆抗體"類別:單克隆抗體
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D0210|TSH單抗(已配對)單克隆抗體"類別:單克隆抗體
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D0212|TPO單抗單克隆抗體"類別:單克隆抗體
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貨號:D0212"
D0303|β2-MG單抗(已配對)"類別:單克隆抗體
性狀:溶液
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D0401|Ins單抗(已配對)"類別:單克隆抗體
性狀:凍干品
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D0501|HCG單抗(已配對)"類別:單克隆抗體
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D0503|LH單抗(已配對)"類別:單克隆抗體
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D0504|FSH單抗(已配對)"類別:單克隆抗體
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D0506|垂體泌乳素單抗(已配對)"類別:單克隆抗體
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D0509|孕酮單抗"類別:單克隆抗體
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D0510|雌二醇單抗"類別:單克隆抗體
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D0511|雌三醇單抗"類別:單克隆抗體
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D0602|乙肝e抗原單抗(已配對)"類別:單克隆抗體
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D1901|人IgG單抗"類別:單克隆抗體
性狀:溶液
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貨號:D1901"
D2201|清潔抗體單克隆抗體"類別:單克隆抗體
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E0101-7|兔抗AFP血清IgG"類別:純化一抗IgG
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貨號:E0101-7"
E0101-5|羊抗AFP血清IgG"類別:純化一抗IgG
性狀:凍干品
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貨號:E0101-5"
E0102-7|兔抗CEA血清IgG"類別:純化一抗IgG
性狀:凍干品
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貨號:E0102-7"
E0103-7|兔抗Ferr血清IgG"類別:純化一抗IgG
性狀:凍干品
規(guī)格:1mg(其他規(guī)格請來電索取)
貨號:E0103-7"
E0104-7|兔抗PSA血清IgG"類別:純化一抗IgG
性狀:凍干品
規(guī)格:1mg(其他規(guī)格請來電索取)
貨號:E0104-7"
E0202-5|綿羊抗T3血清IgG"類別:純化一抗IgG
性狀:凍干品
規(guī)格:1mg(其他規(guī)格請來電索取)
貨號:E0202-5"
E0202-7|兔抗T3血清IgG"類別:純化一抗IgG
性狀:凍干品
規(guī)格:1mg(其他規(guī)格請來電索取)
貨號:E0202-7"
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