產(chǎn)品展示
優(yōu)質(zhì)供應(yīng)
詳細(xì)內(nèi)容
利用我們的創(chuàng)新和專有的脂質(zhì)體共軛結(jié)合技術(shù)，專門(mén)設(shè)計(jì)和配制了LipoD293™ (Ver. II)轉(zhuǎn)染試劑，它添加了專有的增強(qiáng)劑促進(jìn)HEK293細(xì)胞和其它的哺乳動(dòng)物細(xì)胞的轉(zhuǎn)染。作為DNA轉(zhuǎn)染試劑的第二代脂質(zhì)體產(chǎn)品，對(duì)HEK293相關(guān)細(xì)胞和其它哺乳動(dòng)物細(xì)胞， LipoD293™ (Ver. II)轉(zhuǎn)染試劑提供了極高的轉(zhuǎn)染效率，并且細(xì)胞毒性 低。LipoD293™ (Ver. II)轉(zhuǎn)染試劑，通過(guò)加入轉(zhuǎn)染增強(qiáng)肽的方式，使基因轉(zhuǎn) 染效率提高了3～4倍。LipoD293™(Ver. II)轉(zhuǎn)染試劑，1.0ml，能在24孔板中足夠完成666次轉(zhuǎn)染，在6孔板中足夠完成333次轉(zhuǎn)染。
圖 1. 示意圖說(shuō)明LipoD293™轉(zhuǎn)染試劑(升級(jí)版)增強(qiáng)轉(zhuǎn)染的原理。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
- 難轉(zhuǎn)染細(xì)胞的*佳選擇
- 產(chǎn)生高滴度的病毒
- 對(duì)長(zhǎng)DNA 片段同樣有效(*長(zhǎng)可達(dá)180kb)
- 對(duì)懸浮293細(xì)胞同樣有效(例如293F, 293H等)
- 產(chǎn)生高 水平的重組蛋白
- 血清和抗體不影響轉(zhuǎn)染效率
- 對(duì)單DNA和多DNA 片段的共轉(zhuǎn)染特別有效
- 物美價(jià)廉
儲(chǔ)存條件：
40C儲(chǔ)存。若儲(chǔ)藏合適，產(chǎn)品的穩(wěn)定性能保持12個(gè)月以上。
LipoD293™體外DNA轉(zhuǎn)染試劑(升級(jí)版)與市場(chǎng)主導(dǎo)品牌產(chǎn)品轉(zhuǎn)染效率的比較。
LipoD293™試劑(升級(jí)版)、lipofectamine 2000 (L2K)和Fugene HD對(duì)HepG2細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較。右圖：使用以上轉(zhuǎn)染試劑將GFP的cDNA (pEGFP-N3)按照生產(chǎn)商的提供的轉(zhuǎn)染步驟轉(zhuǎn)染到HepG2細(xì)胞 (在膠原預(yù)處理的培養(yǎng)皿中培養(yǎng)）。在轉(zhuǎn)染48小時(shí)之后，用流式細(xì)胞儀檢測(cè)GFP陽(yáng)性細(xì)胞(%)和熒光強(qiáng)度。左圖：血清和抗生素存在的條件下能提高LipoD293試劑(升級(jí)版)對(duì)在HepG2細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率。通過(guò)三種不同的條件下轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞(生長(zhǎng)在膠原處理的培養(yǎng)皿上) －－-無(wú)血清和抗生素，10%血清和抗生素的存在，轉(zhuǎn)染5小時(shí)后換液和不換液。
LipoD293™試劑(升級(jí)版)，Lipofectamine 2000 (L2K), TransIT和Fugene 6對(duì)CHO細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較。右圖：使用以上轉(zhuǎn)染試劑將編碼熒光素酶蛋白的cDNA (phRL-CMV)和綠色熒光蛋白GFP的cDNA按照生產(chǎn)商的提供的轉(zhuǎn)染步驟分別轉(zhuǎn)染到CHO細(xì)胞。在轉(zhuǎn)染24小時(shí)后，熒光素酶的活性使用Beckman公司的化學(xué)發(fā)光監(jiān)測(cè)器測(cè)定；GFP陽(yáng)性細(xì)胞率使用BD公司的FACS檢測(cè)。左圖：LipoD293試劑(升級(jí)版)和Lipofecatmine 2000 (L2K), TransIT以及Fugene 6的價(jià)格比較(美元/1000微升)。所有的價(jià)格是從生產(chǎn)制造商的網(wǎng)站上收集的。
LipoD293™試劑(升級(jí)版)和Lipofectamine 2000 (L2K)對(duì)在難轉(zhuǎn)染細(xì)胞(原代大鼠動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞)的轉(zhuǎn)染效率的比較。制備大鼠的動(dòng)脈平滑肌原代細(xì)胞并用使用LipoD293™試劑(左圖)和Lipofecatmine 2000(L2K,右圖)分別將GFP的cDNA(pEGFP-N3)按照生產(chǎn)制造商的轉(zhuǎn)染操作步轉(zhuǎn)染至該細(xì)胞。轉(zhuǎn)染24小時(shí)后，用尼康Eclipse 2000 熒光顯微鏡檢測(cè)GFP熒光，以此來(lái)評(píng)價(jià)轉(zhuǎn)染效率。上面的圖片由芝加哥大學(xué)的肺和重癥護(hù)理系的Nickolai Dulin博士友情提供的。
LipoD293™試劑和Fugene HD對(duì)難轉(zhuǎn)染細(xì)胞LNCap細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較。LNCap細(xì)胞的培養(yǎng)和傳代嚴(yán)格由ATCC建議的操作步驟進(jìn)行，與pBabe-hygro-SSeCKs (1.5ug)和pEGFP-N3 (1:1，共1.0 微克)共轉(zhuǎn)染(6孔板中每孔的量)，并用 LipoD293™試劑(左圖)和Fugene HD (右圖)分別按照生產(chǎn)制造商的科學(xué)實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染24小時(shí)后，用尼康Eclipse 2000 熒光顯微鏡檢測(cè)GFP熒光，以此來(lái)評(píng)價(jià)轉(zhuǎn)染效率。上面的圖片由羅斯威爾公園癌癥研究所(Roswell Cancer Institute)的Lyn Gao博士友情提供的。
LipoD293™試劑對(duì)難轉(zhuǎn)染細(xì)胞像HepG2和SaoS-2上出色的轉(zhuǎn)染效率。在血清和抗生素的存在下，HepG2和SaoS-2細(xì)胞用pEGFP-N3和pSV-β-半乳糖苷酶DNAs分別轉(zhuǎn)染達(dá)到95%的細(xì)胞融合。轉(zhuǎn)染48小時(shí)后，分別通過(guò)Zeiss 510激光共聚焦顯微鏡和 β-半乳糖苷酶染色試劑盒檢測(cè)效率。
LipoD293™試劑和 293fectin對(duì)HEK293細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較。用LipoD293™體外DNA轉(zhuǎn)染試劑(Ver. II)(上圖)和受歡迎的品牌產(chǎn)品Invitrogen公司的293fectin™(下圖)轉(zhuǎn)染pEGFP-C1質(zhì)粒到HEK293細(xì)胞中。轉(zhuǎn)染24小時(shí)后，細(xì)胞的尼康Eclipse熒光顯微鏡DIC成像圖(左側(cè))和熒光成像圖(右側(cè))。
LipoD293™試劑和 293fectin，Xfect和Fugene 6轉(zhuǎn)染試劑對(duì)懸浮HEK293F產(chǎn)生蛋白質(zhì)效率的比較。30毫升的293F細(xì)胞分別使用LipoD293™試劑、293fectin、Xfect和Fugene 6等轉(zhuǎn)染試劑按照生產(chǎn)商的標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)染步驟將pEGFP-6xHis質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)胞表達(dá)，用量為L(zhǎng)ipoD293™試劑，20微克，所有其他三種轉(zhuǎn)染試劑均使用30微克質(zhì)粒DNA。轉(zhuǎn)染48小時(shí)后，使用尼康熒光顯微鏡GFP熒光進(jìn)行成像（左側(cè)四幅圖），A：LipoD293； B：293fectin；C：Xfect和D：Fugene 6. 帶有6xHis標(biāo)記的 GFP熒光蛋白使用Ni-NTA親和柱技術(shù)實(shí)現(xiàn)分離。5微升洗脫液載入SDS-PAGE凝膠電泳分離并進(jìn)行Coomassie亮藍(lán)染色(右上圖E)，道1為L(zhǎng)ipoD293293、道2為標(biāo)準(zhǔn)蛋白分子、道3為Xfect、道4為293fectin和道5為Fugene 6。這四種轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)生蛋白質(zhì)的效率被進(jìn)一步定量（見(jiàn)右下圖F）。
LipoD293™試劑(升級(jí)版)和Lipofecatmine LTX (LTX)產(chǎn)生慢病毒的比較。通過(guò)LipoD293™試劑(升級(jí)版)和Lipofectamine LTX (LTX)試劑將三個(gè)cDNAs共轉(zhuǎn)染進(jìn)293T細(xì)胞。一個(gè)GFP載體，pHR-SIN-cppt-CMVEWP被用來(lái)測(cè)定慢病毒的滴度。在24孔板中每孔加入1x10^5 293T細(xì)胞，其次是分別添加不同量的慢定都上清液，1 微升(上圖)和10微升(下圖)。5天后，細(xì)胞通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)。右上角的數(shù)字表明轉(zhuǎn)導(dǎo)的細(xì)胞的百分比來(lái)測(cè)定慢病毒的滴度。由LipoD293™ ａnd LTX產(chǎn)生的慢病毒的滴度被量化，分為是8x10^6和3x10^6tu/ml 。
