產(chǎn)品展示
優(yōu)質(zhì)供應(yīng)
詳細(xì)內(nèi)容
首先, EvaGreen® 對 PCR 的抑制性遠(yuǎn)小于 SYBR Green I 。因此,使用 EvaGreen® 進(jìn)行的 qPCR 實驗可以使用快速 PCR 步驟。同時, EvaGreen 在實驗中可以使用較高的濃度,從而獲得遠(yuǎn)強(qiáng)于 SYBR Green I 擴(kuò)增信號(圖 1)。較高濃度的 EvaGreen 也消除了“染料重分布”的缺陷,使 EvaGreen 既可用于多重 PCR ,也可用于高分辨率(高清晰)熔解曲線分析( HRM )(圖 4 )。該分析正被越來越多的用于 PCR 后的基因分型和異源雙鏈分析 。由于 SYBR Green I 對 PCR 的抑制性,從而要求其使用濃度必須很低,因此 SYBR Green I 無法解決由低濃度造成的染料重分布問題,既不能用于多重 PCR 也不能用于 HRM 。同時,染料重分布問題也可能影響常規(guī)熔解曲線的可靠性,因為低熔點的 DNA 鏈可能由于這種原因而無法檢測到 。
第二, EvaGreen 的穩(wěn)定性極強(qiáng)。在正常的儲存、操作和 PCR 過程中不會被破壞。在緩沖溶液中的染料可以安全的儲存在室溫或冰箱里,也可以反復(fù)凍融。與之相反, SYBR Green I 不穩(wěn)定而且降解后對 PCR 抑制性更強(qiáng) 。
EvaGreen 降低了細(xì)胞膜透性,因而比 SYBR Green 1 更加安全(圖 6 )。獨立實驗室的測試結(jié)果顯示, EvaGreen 既沒有誘變性也沒有細(xì)胞毒性 。相反,雖然 SYBR Green I 本身誘變性很弱,但它在細(xì)胞中可能抑制了正常 DNA 的修復(fù)機(jī)制,使其有誘變增強(qiáng)作用 ?紤]到 PCR 的廣泛使用,其安全性應(yīng)該足夠重視。