分光光度計(jì)就是利用分光光度法對物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器。而分光光度法則是通過測定被測物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸收度,對該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。隨著光度計(jì)行業(yè)的不斷發(fā)展,越來越多的企業(yè)和行業(yè)運(yùn)用到了光度計(jì),也有大量的企業(yè)進(jìn)入了光度計(jì)并發(fā)展。
物質(zhì)對光的選擇性吸收波長,以及相應(yīng)的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)。當(dāng)已知某純物質(zhì)在一定條件下的吸收系數(shù)后,可用同樣條件將該供試品配成溶液,測定其吸收度,即可由上式計(jì)算出供試品中該物質(zhì)的含量。在可見光區(qū),除某些物質(zhì)對光有吸收外,很多物質(zhì)本身并沒有吸收,但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過處理使其顯色后再測定,故又稱比色分析。由于顯色時影響呈色深淺的因素較多,且常使用單色光純度較差的儀器,故測定時應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌吠瑫r操作。
分光光度計(jì)已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器。常用于核酸,蛋白定量以及細(xì)菌生長濃度的定量。儀器主要由光源、單色器、樣品室、檢測器、信號處理器和顯示與存儲系統(tǒng)組成。
儀器特點(diǎn)
1. 無疲勞集成光電傳感器和微處量器,測量精度高
2. 時時顯示環(huán)境溫度,可設(shè)定顯色和測量時間
DT-8809A數(shù)字顯示光度計(jì)原理 北京金泰科儀批發(fā)
一,工作原理:
物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量,相應(yīng)地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會相同。因此,每種物質(zhì)就有其特有的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。
二,數(shù)字光度計(jì)光度法
首先確定實(shí)驗(yàn)條件,并在此條件下測得標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的吸收峰以及其對應(yīng)波長值(同時可獲得該物質(zhì)的吸收波長);再在選定的波長范圍內(nèi)(或波長值處),分別以(不同濃度)標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度和溶液濃度為橫、縱坐標(biāo)繪出化合物溶液的標(biāo)準(zhǔn)曲線得到其所對應(yīng)的數(shù)學(xué)方程;接著在相同實(shí)驗(yàn)條件下配制待測溶液,測得待測溶液的吸光度,*后用已獲得的標(biāo)準(zhǔn)曲線方程求出待測溶液中所需測定的化合物的含量。
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三,使用范圍
凡具有芳香環(huán)或共軛雙鍵結(jié)構(gòu)的有機(jī)化合物,根據(jù)在特定吸收波長處所測得的吸收度,可用于純度檢查及含量測定。
四,使用方法
1.接通電源,打開儀器開關(guān),掀開樣品室暗箱蓋,預(yù)熱10分鐘。
2.將靈敏度開關(guān)調(diào)至"1"檔(若零點(diǎn)調(diào)節(jié)器調(diào)不到"0"檔時,需選用較高檔。)
3.根據(jù)所需波長轉(zhuǎn)動波長選擇鈕。
4.將空白液及測定液分別倒入比色杯3/4處,用擦鏡紙擦清外壁,放入樣品室內(nèi),使空白管對準(zhǔn)光路。
5.在暗箱蓋開啟狀態(tài)下調(diào)節(jié)零點(diǎn)調(diào)節(jié)器,使讀數(shù)盤指針指向t=0處。
6.蓋上暗箱蓋,調(diào)節(jié)"100"調(diào)節(jié)器,使空白管的t=100,指針穩(wěn)定后逐步拉出樣品滑竿,分別讀出測定管的光密度值,并記錄。
7.比色完畢,關(guān)上電源,取出比色皿洗凈,樣品室用軟布或軟紙擦凈。