兔膜聯(lián)蛋白A5(ANXA5) ELISA 試劑盒 兔Apelin 17(AP17) ELISA 試劑盒  

試劑盒組成

1. 酶標板：用于包被抗原和加入酶標抗體；

2. 酶標抗體：與待測血清中的、、、、結合；

3. 抗原：用于包被酶標板，與待測血清中的、、、、結合；

4. 陰性對照血清：用于設置陰性和陽性對照；

5. 陽性對照血清：用于設置陰性和陽性對照；

6. 洗滌液：用于清洗酶標板；

7. 底物：用于顯色反應；

8. 終止液：用于終止顯色反應。

操作步驟

1. 準備工作

（1）將試劑盒從冰箱中取出，放置至室溫；

（2）準備所需的試劑和樣品；

（3）將酶標板用洗滌液清洗干凈。

2. 包被抗原

（1）將抗原按照說明書要求稀釋后，加入酶標板孔中，每孔100μL；

（2）將酶標板輕輕搖晃，使抗原充分覆蓋酶標板孔底部；

（3）將酶標板放入濕盒中，4℃孵育過夜。

3. 洗滌和干燥

（1）取出酶標板，用洗滌液清洗5次，每次清洗時間為1分鐘；

（2）用吸水紙輕輕吸干酶標板表面的水分。

4. 加樣和孵育

（1）在每個酶標板孔中加入100μL待測血清；

（2）將酶標板輕輕搖晃，使血清充分覆蓋抗原；

（3）將酶標板放入濕盒中，37℃孵育1小時。

5. 洗滌和干燥

（1）取出酶標板，用洗滌液清洗5次，每次清洗時間為1分鐘；

（2）用吸水紙輕輕吸干酶標板表面的水分。

6. 加酶標抗體

（1）在每個酶標板孔中加入100μL酶標抗體；

（2）將酶標板輕輕搖晃，使酶標抗體充分覆蓋抗原；

（3）將酶標板放入濕盒中，37℃孵育1小時。

7. 洗滌和干燥

（1）取出酶標板，用洗滌液清洗5次，每次清洗時間為1分鐘；

（2）用吸水紙輕輕吸干酶標板表面的水分。

8. 加底物顯色

（1）在每個酶標板孔中加入100μL底物溶液；

（2）將酶標板輕輕搖晃，使底物溶液充分覆蓋抗原；

（3）將酶標板放入濕盒中，37℃孵育15-30分鐘。

9. 終止反應并測量吸光度值

（1）在每個酶標板孔中加入50μL終止液；

（2）立即用酶標儀測量各孔的吸光度值。

計算

以標準物的濃度為橫坐標（對數(shù)坐標），OD值為縱坐標（普通坐標），在半對數(shù)坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。

兔Apelin 17(AP17) ELISA 試劑盒  

實驗注意事項

1. 保證試劑盒的質量：選擇正規(guī)廠家生產的試劑盒，確保試劑盒的質量和穩(wěn)定性。

2. 嚴格控制實驗條件：實驗過程中要嚴格控制溫度、pH值、離子強度等條件，以保證實驗結果的準確性。

3. 避免交叉污染：實驗過程中要避免交叉污染，確保每個步驟使用的試劑和材料都是清潔無污染的。

4. 標準化操作：實驗操作要標準化，嚴格按照試劑盒說明書進行操作，避免人為誤差對實驗結果的影響。

5. 定期校準：定期對實驗儀器進行校準，確保儀器的準確性和穩(wěn)定性。

6. 保存好實驗數(shù)據(jù)：實驗過程中要保存好實驗數(shù)據(jù)，以便后續(xù)分析和處理。

試劑盒性能：

1. 檢測范圍：1.95 nmol/L –100 nmol/L。

2. 靈敏度：低檢測濃度小于0.78 nmol/L。

3. 特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

4. 重復性：板內變異系數(shù)小于10% ，板間變異系數(shù)小于15% 。

合作單位:

中國醫(yī)科大學、復旦大學、北京大學、貴陽醫(yī)學院、中國農業(yè)大學

天津疾控中心、江南大學、山東大學、青島大學、香港大學

云南省產品質量監(jiān)督檢驗研究院

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