本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗人ACE抗體包被于酶標板上，實驗時樣品或標準品中的人ACE會與包被抗體結(jié)合，游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人ACE抗體和辣根過氧化物酶標記的親和素�？谷薃CE抗體與結(jié)合在包被抗體上的人ACE結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB)，TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍色，加終止液后變成黃色。用酶標儀在450nm波長處測OD值，ACE濃度與OD450值之間呈正比，通過繪制標準曲線計算出樣品中ACE的濃度。 
 
本產(chǎn)品適用于體外定量檢測人血清、血漿或其它相關(guān)生物液體中天然和重組ACE濃度
 
*: [96T/48T]（打開包裝后請及時檢查所有物品是否齊全完整） 
#: 一周內(nèi)使用可存于4℃，需長時間存放或多次使用建議存于-20℃. 
相關(guān)試劑在分裝時會比標簽上標明的體積稍多一些，請在使用時量取而非直接倒出！ 
 
人激活素A(ACVA)酶聯(lián)免疫試劑盒
試驗所需自備物品: 
1. 酶標儀(450nm波長濾光片) 
2. 高精度移液器，EP管及一次性吸頭：0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL 
3. 37℃恒溫箱，雙蒸水或去離子水 
4. 吸水紙 
 
檢測準備工作: 
1. 請?zhí)?0分鐘從冰箱中取出試劑盒，平衡至室溫。 
2. 將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋(1:25)。未用完的放回4℃。從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶，屬于正�，F(xiàn)象，可用40℃水浴微加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制洗滌液（加熱溫度不要超過50℃，使用時洗滌液應(yīng)為室溫）。當日使用。 
3. 標準品: 于10000×g離心1分鐘，加入標準品&樣品稀釋液1.0mL至凍干標準品中，旋緊管蓋，靜置10分鐘，上下顛倒數(shù)次，待其充分溶解后，用移液器將其輕輕混勻（濃度為50ng/mL）。然后根據(jù)需要進行倍比稀釋（注：不要直接在反應(yīng)孔中進行倍比稀釋）。建議配制成以下濃度：50、25、12.5、6.25、3.125、1.563、0.781、0ng/mL，標準品&樣品稀釋液直接作為空白孔0ng/mL。如配制25ng/mL標準品：取0.5mL50ng/mL的上述標準品加入含有0.5mL標準品&樣品稀釋液的EP管中，混勻即可，其余濃度依此類推。
6th Edition, revised in June, 2014 
www.elabscience.cn 4 
 
人激活素A(ACVA)酶聯(lián)免疫試劑盒
4. 生物素化抗體工作液：實驗計算當次實驗所需用量（以100μL/孔計），實際配制時應(yīng)多配制100-200μL。使用15分鐘，以生物素化抗體稀釋液稀釋濃縮生物素化抗體(1:100)成工作濃度。當日使用。 
5. 酶結(jié)合物工作液：實驗計算當次實驗所需用量（以100μL/孔計），實際配制時應(yīng)多配制100-200μL。使用15分鐘，以酶結(jié)合物稀釋液稀釋濃縮HRP酶結(jié)合物(1:100)成工作濃度。當日使用。 
 
結(jié)果判斷: 
1. 每個標準品的OD值減去空白孔的OD值后作圖，如設(shè)置復(fù)孔，則應(yīng)取其平均值計算。以標準品的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，繪出標準曲線。亦可以O(shè)D值為橫坐標，標準品的濃度為縱坐標，繪出標準曲線。
2. 推薦使用業(yè)的曲線制作軟件，如curve expert 1.3或1.4，在軟件界面既可根據(jù)樣品OD值，由標準曲線查出相應(yīng)的濃度，乘以稀釋倍數(shù)；亦可將樣品的OD值代入標準曲線的擬合方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。
3. 若樣品OD值高于標準曲線上限，應(yīng)適當稀釋后重測，計算濃度時應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。 
 

人激活素A(ACVA)酶聯(lián)免疫試劑盒
靈敏度、檢測范圍、特異性和重復(fù)性: 
●靈敏度：小可測0.469ng/mL。 
●檢測范圍：0.781–50ng/mL。 
● 特異性：可檢測重組或天然的人ACE，且與其它相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
● 重復(fù)性：板內(nèi)，板間變異系數(shù)均<10%。