產(chǎn)品展示
人胚腎細(xì)胞供應(yīng)
點(diǎn)擊次數(shù)：76發(fā)布時(shí)間：2015/8/12 12:23:51
更新日期：2015/8/12 12:23:51
所 在 地：中國大陸
產(chǎn)品型號(hào)：DM0025
相關(guān)標(biāo)簽：人胚腎細(xì)胞
優(yōu)質(zhì)供應(yīng)
詳細(xì)內(nèi)容
上海篤瑪生物科技有限公司人胚腎細(xì)胞供應(yīng)原代培養(yǎng)及其操作步驟：原代分離細(xì)胞培養(yǎng)是指從供體內(nèi)取出組織后，經(jīng)機(jī)械以及消化分離成單個(gè)細(xì)胞或單一型細(xì)胞群，使之在體外模擬人體生理環(huán)境，在無菌、適當(dāng)溫度和一定的營養(yǎng)條件下，生存、生長和繁殖。原代培養(yǎng)細(xì)胞常有不同的細(xì)胞成分，生長緩慢，但是更能代表所來源的組織細(xì)胞類型和表達(dá)組織的特異性特征。利用原代細(xì)胞培養(yǎng)做各種實(shí)驗(yàn)，如藥物測(cè)試、細(xì)胞分化及病毒學(xué)方面的試驗(yàn)效果很好。
產(chǎn)品名稱：人胚腎細(xì)胞
其操作人胚腎細(xì)胞步驟如下。
產(chǎn)品名稱：人胚腎細(xì)胞
產(chǎn)品用途：科研
保證運(yùn)輸中細(xì)胞的正常生長，關(guān)于其價(jià)格、報(bào)價(jià)、貨期，請(qǐng)咨詢我們。
產(chǎn)品特點(diǎn)：活性好、存活率高、實(shí)驗(yàn)成果特征明顯
產(chǎn)品來源：人組織、小鼠組織、大鼠組織、兔組織等動(dòng)物組織
產(chǎn)品運(yùn)輸：免費(fèi)快遞
產(chǎn)品包裝：瓶裝
產(chǎn)品用途：細(xì)胞培養(yǎng)研究
其操作人胚腎細(xì)胞步驟如下。
1.剪切組織 先將所取得的組織，用D-Hanks或Hanks液清洗，以去除表面血污，并用手術(shù)鑷去除黏附的結(jié)締組織等非培養(yǎng)所需組織。再次清洗后，用手術(shù)刀將組織切成若干小塊，移入青霉素小瓶或小燒杯中，加入適量緩沖液，用彎頭眼科剪，反復(fù)剪切組織，直到組織成糊狀，約1mm3大小。靜置片刻后，用吸管吸去上層液體，加入適當(dāng)?shù)木彌_液再清洗一次。
2.消化分離 消化分離的目的是將細(xì)小的組織塊消化分離成細(xì)胞團(tuán)或分散的單個(gè)細(xì)胞，以利于進(jìn)一步的培養(yǎng)，常用的消化酶有胰蛋白酶和膠原酶。
3.培養(yǎng) 細(xì)胞懸液用計(jì)數(shù)板進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。用培養(yǎng)液將細(xì)胞數(shù)調(diào)整為（2～5）×105 cells／ml，或?qū)嶒?yàn)所需密度，分裝于培養(yǎng)瓶中，使細(xì)胞懸液的量以覆蓋后略高于培養(yǎng)瓶底部為宜。置CO2培養(yǎng)箱內(nèi)，5％CO2，37℃靜置培養(yǎng)。一般3～5d，原代培養(yǎng)細(xì)胞可以黏附于瓶壁，并伸展開始生長，可補(bǔ)加原培養(yǎng)液量1／2的新培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)2～3d后換液，一般7～14d可以長滿瓶壁，進(jìn)行傳代。
4.注意事項(xiàng)
（1）無菌操作：細(xì)菌或霉菌污染是培養(yǎng)失敗的常見原因，必須加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的無菌操作觀念，以預(yù)防為主，一旦污染，一般很難消除。
（2）培養(yǎng)液：所用的培養(yǎng)液必須滿足細(xì)胞生存和生長的必要條件。由于細(xì)胞來源的動(dòng)物種類、組織類型不同，對(duì)培養(yǎng)液的要求有一定的差異，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。
（3）小牛血清：小牛血清對(duì)于維持培養(yǎng)細(xì)胞的生存和促進(jìn)細(xì)胞增殖起著關(guān)鍵性作用�？蛇x擇多種不同批號(hào)的小牛血清進(jìn)行小樣分析。一旦確定某一廠家的某一批號(hào)小牛血清后，就保持應(yīng)用至實(shí)驗(yàn)完成。
（4）膠原酶溶液：必須新鮮配制，貯存時(shí)間過長(即使是-20℃低溫保存)，也將影響消化效力，導(dǎo)致消化時(shí)間過長，細(xì)胞損傷增加。
（5）L-谷氨酰胺：幾乎所有細(xì)胞對(duì)谷氨酰胺都有較高的要求，細(xì)胞需要谷氨酰胺合成核酸和蛋白質(zhì)，在缺少谷氨酰胺時(shí)，細(xì)胞會(huì)因生長不良而死亡。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定，加有谷氨酰胺的培養(yǎng)液在4℃冰箱貯存兩周以上時(shí)，就應(yīng)重新加入原來量的谷氨酰胺。
（6）靜置培養(yǎng)：原代細(xì)胞在消化分離后，置于CO2培養(yǎng)箱的頭24～48h (必要時(shí)72h)內(nèi)，應(yīng)處于絕對(duì)靜置狀態(tài)，切忌不時(shí)地取出培養(yǎng)瓶觀察生長狀況，這將使原代分離細(xì)胞難以貼壁，更談不上伸展和增殖，初學(xué)者尤應(yīng)注意。不必?fù)?dān)心培養(yǎng)液中的營養(yǎng)成分會(huì)消耗光，在細(xì)胞增殖之前對(duì)營養(yǎng)的要求并不大。原代培養(yǎng)初期僅加一薄層培養(yǎng)液的目的也在于有利于細(xì)胞貼壁伸展。
（7）消化時(shí)間：一般消化至肉眼尚可見微小組織顆粒即可，因?yàn)榇藭r(shí)組織顆粒已經(jīng)松散，略經(jīng)吹打即成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞，過久的消化往往導(dǎo)致細(xì)胞損傷加重，細(xì)胞培養(yǎng)成活率降低。 （8）其他生長因子：經(jīng)過以上處理，一般原代分離細(xì)胞培養(yǎng)均可以成功。對(duì)于少數(shù)特殊類型細(xì)胞也可以考慮加一些特殊的生長因子，如胰島素能促使細(xì)胞攝取葡萄糖和氨基酸。另外，內(nèi)毒素、EGF、FGF等均有促有絲分裂作用，但費(fèi)用較高。
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人人前列腺癌細(xì)胞
鼠鼠腹水瘤（EAC-E2G8）
牛牛胚氣管細(xì)胞
人人食道癌細(xì)胞Eca-109
人人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞系(ECV-304)(具有T24細(xì)胞特性)
小鼠小鼠淋巴瘤（EL-4）
鯉魚鯉魚上皮細(xì)胞EPC
人人卵巢透明細(xì)胞癌
人人腺癌細(xì)胞系(F56)
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人人肝細(xì)胞FL62891
小鼠小鼠骨髓瘤細(xì)胞
猴恒河猴胚腎細(xì)胞(FRhK-4)
魚草魚腎細(xì)胞系(GIK)
人上頜牙齦癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移癌GNM
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鼠BALB/C小鼠肝癌細(xì)胞系（H22）
鼠鼠肝癌細(xì)胞（H22-H8D8）
人人表皮肺癌細(xì)胞H292
人人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞（H4）
鼠大鼠肝癌細(xì)胞系H4-ⅡE
人人T淋巴細(xì)胞系(H9)
大鼠大鼠心肌細(xì)胞
人人羊膜細(xì)胞
人人永生化表皮細(xì)胞(HaCAT)
人人口腔癌細(xì)胞HB
人人乳腺細(xì)胞HBL-100
大鼠大鼠腎小球系膜細(xì)胞EC (HBZY－1)
人人子宮鱗癌細(xì)胞（高分化）
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人人膽管細(xì)胞型肝癌細(xì)胞
人人盲腸腺癌細(xì)胞（未分化）
人人結(jié)腸癌細(xì)胞
人人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞
人人盲腸腺癌細(xì)胞HCT-8
人人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞
人人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞
人人二倍體細(xì)胞系(HEL)
人人宮頸癌細(xì)胞系(Hela)
人人宮頸癌細(xì)胞
人宮頸癌細(xì)胞HeLa-S3
人人肝癌細(xì)胞
人人肝癌細(xì)胞
人人喉表皮樣癌細(xì)胞
人人喉癌細(xì)胞系(Hep-2)
人人肝癌細(xì)胞系(Hep-3B)
小鼠小鼠肝癌細(xì)胞
人 表達(dá)HBV病毒的人肝細(xì)胞HepG2.2.15
人人胚肺成纖維細(xì)胞
人人胃癌細(xì)胞（未分化）
人人小腸癌細(xì)胞系(HIC)
人腎小管上皮細(xì)胞株HK－2
人人二倍體細(xì)胞系(HL)
人早幼粒急性白血病細(xì)胞系(HL-60)
人人肝正常細(xì)胞HL-7702
人人B淋巴母細(xì)胞
人人卵巢癌細(xì)胞HO-8910
人人正常乳腺細(xì)胞
人人乳腺癌細(xì)胞
人男性正常龜頭細(xì)胞系HS68
