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技術文章

鏈霉蛋白酶

點擊次數(shù):43 發(fā)布時間:2024/7/31 10:03:45
  

一般描述

鏈霉蛋白酶是從灰色鏈球菌K-1中獲得的蛋白水解酶。它由多種成分組成,包括絲氨酸型蛋白酶、Zn2+ 內(nèi)肽酶、Zn2+-亮氨酸氨肽酶和 Zn2+ 羧肽酶。

鏈酶蛋白酶 是幾種非特異性內(nèi)、外蛋白酶的混合物,可將蛋白質消化成單個氨基酸。


特異性

鏈霉蛋白酶具有廣泛的特異性,幾乎可以將所有的蛋白質分解成它們各自的氨基酸;釋放出羧酸和醇。

應用

使用鏈霉蛋白酶在研究應用中水解蛋白質。鏈霉蛋白酶被應用于DNA和RNA分離過程中蛋白質的降解,如噬菌體DNA的提取或質粒DNA的分離。使用不必讓鏈霉蛋白酶自行消化。它也被用于組織化學和細胞培養(yǎng)中,與膠原酶和胰蛋白酶一起進行組織分離,[1][2][3] 并被用于從純化的糖蛋白中產(chǎn)生糖肽。它已可用于斑馬魚胚胎的脫色。[4]

生化/生理作用

鏈酶蛋白酶具有廣泛的特異性。因此,當需要廣泛或降解蛋白質時,通常使用該產(chǎn)品。其應用包括細胞器中的蛋白質分析、DNA 和 RNA 分離過程中蛋白質的去除,以及用于生產(chǎn)用于氨基酸分析的蛋白質水解產(chǎn)物。[5]此外,鏈霉蛋白酶分散成纖維細胞系的能力優(yōu)于胰蛋白酶,在單層分離和單細胞懸液的產(chǎn)生方面均表現(xiàn)。[6]

單位定義

在+40℃和pH7.5條件下,非特異性蛋白酶活性的單位增加了酪蛋白中福林-陽性氨基酸和肽的釋放速度。一單位(U)可釋放1μmol/min酪氨酸,單位“PU”為1 μg/min (1 U=181 PU);單位“PUK”為0.1/min(測量的是與folin ′s試劑反應條件下形成的鉬藍吸光度變化,1PUK=50PU)。

制備說明

穩(wěn)定劑:鈣離子保護效應:

該制劑中含20%的醋酸鈣,用于其穩(wěn)定性。按照現(xiàn)行的質量控制程序,它不含淀粉。含有0.01-0.1M鈣的稀釋溶液,在4到8℃的中性pH下,其活性在24小時內(nèi)是穩(wěn)定的。鏈霉素蛋白酶也可以通過低水平的鈣來防止熱失活。
工作溶液濃度:0.5 到 2 mg/ml
工作溶液:建議溶劑為蒸餾水。
在蒸餾水(10-20 mg/ml)中加入聯(lián)袂蛋白酶粉,制得儲液。
保存條件(工作溶液):-15至-25 °C

重懸

凍干粉可溶于水(10 到 20 mg/ml)。

儲存及穩(wěn)定性

干燥儲存

其他說明

僅用于生命科學研究。不可用于診斷。

原創(chuàng)作者:上海篤瑪生物科技有限公司

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