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技術(shù)文章
膠原酶D
點擊次數(shù):35 發(fā)布時間:2024/7/30 11:45:42
一般描述
膠原酶D是通過過濾、硫酸銨沉淀、透析和凍干而從溶組織梭菌的培養(yǎng)物中制備的。
特異性
膠原酶可降解天然膠原蛋白。梭菌蛋白酶、胰蛋白酶樣酶和中性蛋白酶也會降解其他蛋白質(zhì)。
應用
特點和優(yōu)勢
內(nèi)含物
凍干粉,未滅菌
凍干粉,未滅菌
單位定義
來自Roche的膠原酶以Wünsch單位(在+25°C下每分鐘用Wünsch底物形成μmol的產(chǎn)物)進行測定。
通常,膠原酶活性是以Mandl單位(在+37℃下5小時內(nèi)從膠原釋放的1 μmol亮氨酸)給出的。
不幸的是,兩個活性單位之間沒有統(tǒng)一的轉(zhuǎn)換因子,因為Mandl單位部分取決于膠原酶制劑中污染性蛋白酶的濃度,而這是一個不確定的變量。較純的膠原酶制劑相對于粗制劑在Mandl單位中實際上具有更低的比活性。梭菌制劑通常具有約1:1800的轉(zhuǎn)換因子(如某個特定批次的梭菌膠原酶所含有的約0.15 Wünsch U/mg和250 Mandl U/mg)。
通常,膠原酶活性是以Mandl單位(在+37℃下5小時內(nèi)從膠原釋放的1 μmol亮氨酸)給出的。
不幸的是,兩個活性單位之間沒有統(tǒng)一的轉(zhuǎn)換因子,因為Mandl單位部分取決于膠原酶制劑中污染性蛋白酶的濃度,而這是一個不確定的變量。較純的膠原酶制劑相對于粗制劑在Mandl單位中實際上具有更低的比活性。梭菌制劑通常具有約1:1800的轉(zhuǎn)換因子(如某個特定批次的梭菌膠原酶所含有的約0.15 Wünsch U/mg和250 Mandl U/mg)。
外形
凍干粉,未滅菌。
制備說明
激活劑:Ca2+
工作濃度:0.5 - 2.5mg/ml
儲存條件(工作溶液):-15至-25°C
Roche建議僅重懸需要立即使用的凍干粉的量。重新配制的溶液可以在-15至-25℃下儲存長達一周。因為重新配制后活性降低了,所以要避免反復凍融。
抑制劑:
膠原酶抑制劑:EDTA, EGTA, Cys, His, DTT,
膠原酶不會被血清所抑制。
梭菌蛋白酶抑制劑:TLCK
胰蛋白酶抑制劑:抑肽酶,胰蛋白酶抑制劑(蛋清,大豆)
酶活:
膠原酶活性:>0.15 U/mg (基于Wünsch) (+25°C, 4-苯基-偶氮芐基-氧基羰基-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg作為底物)
污染性酶活:胰蛋白酶,梭菌蛋白酶和總蛋白水解活性
膠原酶D具有正常至高的膠原酶活性,以及非常低的胰蛋白酶活性(通常<0.2單位/mg,BAEE作為底物)。
工作濃度:0.5 - 2.5mg/ml
儲存條件(工作溶液):-15至-25°C
Roche建議僅重懸需要立即使用的凍干粉的量。重新配制的溶液可以在-15至-25℃下儲存長達一周。因為重新配制后活性降低了,所以要避免反復凍融。
抑制劑:
膠原酶抑制劑:EDTA, EGTA, Cys, His, DTT,
膠原酶不會被血清所抑制。
梭菌蛋白酶抑制劑:TLCK
胰蛋白酶抑制劑:抑肽酶,胰蛋白酶抑制劑(蛋清,大豆)
酶活:
膠原酶活性:>0.15 U/mg (基于Wünsch) (+25°C, 4-苯基-偶氮芐基-氧基羰基-Pro-Leu-Gly-Pro-D-Arg作為底物)
污染性酶活:胰蛋白酶,梭菌蛋白酶和總蛋白水解活性
膠原酶D具有正常至高的膠原酶活性,以及非常低的胰蛋白酶活性(通常<0.2單位/mg,BAEE作為底物)。
重懸
在任何平衡鹽溶液中重懸(如HBSS)
儲存及穩(wěn)定性
避光
其他說明
僅用于生命科學研究。不可用于診斷。
原創(chuàng)作者:上海篤瑪生物科技有限公司