用途:科研與實(shí)驗(yàn)用試劑,不得用于臨床診斷。
標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
運(yùn)輸方面:現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨
常見ELISA試劑盒系列:IL-1、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-2R、IL-27、IL-23、IL-17、IL-18、IL-9、IL-8、IL-6、IL-5、IL-4、IL-2、IL-13、IL-11、IL-10、IL-12P70、IL-12P40、IFN-ω、IFN-β、IFN-α、值IFN-γ、TNF-β、TNF-α、sICAM-1、LEP、MMP-3等.

1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔) 
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100ul/孔),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用一小時(shí)內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。 
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始,請?zhí)崤渲煤盟性噭?試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1.         加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔�？瞻卓准訕悠废♂屢�100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.         棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3.         溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.         每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5.         溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6.         依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.         依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.         用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。

ATG ELISA Kit人抗胸細(xì)胞球蛋白ELISA試劑盒 ATG ELISA KitHuman anti-thymocyte globulin, ATG Elisa Kit人抗胸細(xì)胞球蛋白(ATG)elisa試劑盒 人抗胸細(xì)胞球蛋白ELISA檢測試劑,ATG檢測試劑盒ATG檢測試劑人抗胸細(xì)胞球蛋白ELISA試劑盒

EBMZ ELISA Kit人抗表皮細(xì)胞基底膜抗體檢測試劑盒 EBMZ ELISA KitHuman epidermal basement membrane zone, EBMZ Elisa Kit人抗表皮細(xì)胞基底膜抗體(EBMZ)elisa試劑盒 人抗表皮細(xì)胞基底膜抗體ELISA檢測試劑,EBMZ檢測試劑盒EBMZ檢測試劑人抗表皮細(xì)胞基底膜抗體ELISA試劑盒

ACA ELISA Kit人抗中性粒/中心體抗體測定試劑盒 ACA ELISA KitHuman anti-centrol ａnd centrosome antibody, ACA Elisa Kit人抗中性粒/中心體抗體(ACA)elisa試劑盒 人抗中性粒/中心體抗體ELISA檢測試劑,ACA檢測試劑盒ACA檢測試劑人抗中性粒/中心體抗體ELISA試劑盒

AAA ELISA Kit人抗白蛋白抗體免費(fèi)代測試劑盒 AAA ELISA KitHuman anti-albumin antibody, AAA Elisa Kit人抗白蛋白抗體(AAA)elisa試劑盒 人抗白蛋白抗體ELISA檢測試劑,AAA檢測試劑盒AAA檢測試劑人抗白蛋白抗體ELISA試劑盒

PCA-1/Yo ELISA Kit人抗浦肯野細(xì)胞抗體/抗Yo抗體ELISA試劑盒 PCA-1/Yo ELISA KitHuman purkinje cell autoantibody, PCA-1/Yo Elisa Kit人抗浦肯野細(xì)胞抗體/抗Yo抗體(PCA-1/Yo)elisa試劑盒 人抗浦肯野細(xì)胞抗體/抗Yo抗體ELISA檢測試劑,PCA-1/Yo檢測試劑盒PCA-1/Yo檢測試劑人抗浦肯野細(xì)胞抗體/抗Yo抗體ELISA試劑盒

FSA胚胎性硫糖蛋白抗原elisa檢測試劑盒EDA/Cy5Cy5標(biāo)記的外胚層1抗體

AFF4/Cy5Cy5標(biāo)記的淋巴細(xì)胞相關(guān)AF4樣抗體

C6orf191/Cy5Cy5標(biāo)記的6號(hào)染色體開放閱讀框191抗體

Cystatin SN/Cy5Cy5標(biāo)記的胱抑素SN/半胱氨酸酶抑制劑SN抗體

PRMT2/Cy5Cy5標(biāo)記的精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶2抗體

kappa Opioid receptor/Cy5Cy5標(biāo)記的kappa型阿片受體抗體

Neurturin/Cy5Cy5標(biāo)記的神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體

SGTA/Cy5Cy5標(biāo)記的小谷氨酰胺三角四肽重復(fù)區(qū)α抗體

ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆�。�?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

原創(chuàng)作者：上海篤瑪生物科技有限公司