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技術(shù)文章
血清的操作
點(diǎn)擊次數(shù):44 發(fā)布時(shí)間:2024/6/6 13:44:37
血清解凍采用逐步解凍法(-20℃→2—8℃→25℃或37℃),解凍過(guò)程中必須隨時(shí)輕搖,使血清受熱溫度均勻。

操作步驟

血清凝絮物,血清解凍后會(huì)出現(xiàn)少量片狀或絮狀物析出,這主要是由于血清內(nèi)不穩(wěn)定蛋白變性、纖維蛋白析出形成沉淀物,實(shí)驗(yàn)證明沉淀物不會(huì)影響血清本身質(zhì)量。
熱滅活本產(chǎn)品除注明外均未滅活。如果必須滅活,請(qǐng)嚴(yán)格按照56℃30分鐘(水。┨幚硪呀鈨鲅。
常溫狀態(tài)下短期融化并不會(huì)影響血清質(zhì)量。
產(chǎn)品有效期,檢定合格之日起有效期5年。

操作步驟
試管法(改良 Mayer 法)
1、致敏羊紅細(xì)胞: 2%綿羊紅細(xì)胞加等量稀釋后的溶血素( 1:2000),混勻,置 37℃水浴 30min。
2、稀釋血清:待測(cè)血清 0.2ml,加應(yīng)用液 3.8ml,稀釋度為 1:20。
3、配制溶血標(biāo)準(zhǔn)管:全溶血管:2%綿羊紅細(xì)胞 2ml 加 8ml 蒸餾水,混勻。
50%溶血管:取全溶血管液 2ml 加緩沖液 2ml。
4、按表所示,依次加各成分于試管中,混勻,置 37℃水浴 30min, 第 10 管為非溶血對(duì)照:補(bǔ)體 CH50 測(cè)定試管法
5、結(jié)果測(cè)定:取出試管, 2000r/min 離心 10min,對(duì)照管應(yīng)不溶血。肉眼比色,選與 50%溶血標(biāo)準(zhǔn)管相近二管,再用分光光度計(jì)測(cè)(波長(zhǎng) 542nm、 0.5cm 比色杯) OD 值,
確定與標(biāo)準(zhǔn)管接近者為終點(diǎn)管,然后按下公式計(jì)算 CH50 值:
血清補(bǔ)體 CH50( U/ml) =( 1/血清用量)×稀釋度。
如第 5 管為終點(diǎn)管,測(cè)待測(cè)血清中CH50為66.7U/ml。血清補(bǔ)體CH50正常值為50-100U/ml。

應(yīng)用范圍:
酶標(biāo)試劑、免疫比濁試劑、免疫膠乳試劑生產(chǎn)、提取純化抗體、組化實(shí)驗(yàn)中
對(duì)應(yīng)抗原,或封閉對(duì)應(yīng)雜抗體,測(cè)定對(duì)應(yīng)抗原濃度,或抗原夾芯法測(cè)定對(duì)應(yīng)
抗體,吸收雜抗原成分,層析純化抗原,分析與鑒定對(duì)應(yīng)抗原成分,封閉交
叉抗原,測(cè)定對(duì)應(yīng)抗原成分,測(cè)定抗原純度等。
1.液體抗血清保存原則:避免反復(fù)凍融
2.短期保存的抗血清:如幾周內(nèi)就會(huì)使用,收到后推薦在 2-8℃保存,2-8℃短暫保存
數(shù)周對(duì)活性沒(méi)有影響。
3.保存的抗體:如抗體需超過(guò) 1 個(gè)月后才會(huì)使用,請(qǐng)酌情分裝后于-20℃保存。
原創(chuàng)作者:上海篤瑪生物科技有限公司