小鼠血清（NQBB血清）采用健康小鼠血液為原料，經(jīng)無菌采集、分離、微孔過濾后而成，性狀為澄清液體，無噬菌體、低內(nèi)毒素，無溶血無異物無細菌真菌支原體霉形體衣原體等，適用于試驗室或生化科研相關(guān)試驗，滿足不同科研實驗的多種需求。小鼠血源以封閉的穿刺方式采自動物，產(chǎn)品經(jīng)3次100nm過濾，在凈化車間過濾包裝。經(jīng)嚴格檢測確保無支原體，細菌病毒檢測依據(jù)美國藥典（USP）和美國聯(lián)邦法規(guī)第九篇（9CFR），符合檢測標準。

小鼠血清是由小鼠血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很復(fù)雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且小鼠血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。小鼠血清是血漿中不含纖維蛋白原的膠狀液體,具有維持血液的正常粘度、酸堿度、滲透壓等作用。它主要由水和各種化學(xué)成分組成,這些化學(xué)成分包括白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,總膽固醇,谷丙轉(zhuǎn)氨酶等。小鼠血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等，這些物質(zhì)對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。

1:血清的成份可能有幾百種之多，目對其準確的成份、含量及其作用機制仍不清楚，尤其是對其中一些多肽類生長因子、激素和脂類等尚未充分認識，這給研究工作帶來許多困難；

2:血清都是批量生產(chǎn)，各批量之間差異很大，而且血清保存期至多一年，因此，要保證每批血清的相似性為困難，從而使實驗的標準化和連續(xù)性受到限制；

3:不能排除血清中含有易變物質(zhì)，這被認為是“瓶中惡化”的原因。

小鼠血清的保存應(yīng)該注意以下幾點：

(1)需要長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月.由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂.

(2)熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍的血清.加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活.除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,而且還會影響血清的質(zhì)量.補體參與反應(yīng)有:細胞毒作用,平滑肌細胞收縮,肥大細胞和血小板釋放組胺,增強吞噬作用,促進淋巴細胞和巨噬細胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化.

(3)瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生.切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀.

(4)一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌.如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾,切勿直接過濾血清.

(5)血清中的沉淀物絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量.可用離心3000rpm,5分鐘去除,也可不用處理.顯微鏡下"小黑點":經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物的形成會顯著增多.有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點",常誤認為血清受污染.一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但如果懷疑血清質(zhì)量,則應(yīng)立即停止使用,更換另一批號的血清.

(6)切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會破會而影響血清質(zhì)量

小鼠血清，NQBB血清可用于小鼠淋巴瘤研究：

取對數(shù)生長期的小鼠淋巴瘤細胞(L5178Y3.7.2c-tk+/-)設(shè)立陰性對照組和陽性對照組,陰性對照組加入100μL DMSO,陽性對照組加入100μL 10μg/m L 4-硝基喹啉(4-NQO)誘導(dǎo)突變,測定細胞懸浮增長率(SG)、相對懸浮增長率(RSG)、平板效率(PE)、相對存活率(RS)和相對總生長率(RTG)等指標。根據(jù)血清滅活與否和選擇突變劑三氟胸苷(TFT)的含量,在篩選突變集落過程中,將陰性對照組和陽性對照組各分為:滅活組、未滅活+1.5倍TFT組、未滅活組,測定突變頻率(MF),對試驗結(jié)果進行評價。

結(jié)果陰性對照組SG在8~32,細胞倍增速度符合試驗要求;PE在65%~120%,符合試驗成立條件。陽性對照的滅活組、未滅活+1.5倍TFT組、未滅活組中MF均比陰性對照組至少增加300×10-6且小克隆突變頻率至少占40%,符合試驗要求。陰性對照滅活組的MF數(shù)值在標準范圍內(nèi),未滅活組的MF數(shù)值明顯高于滅活組,超過標準數(shù)值范圍,且96孔板中的大小克隆不易區(qū)分;陰性對照未滅活+1.5倍TFT組使得MF數(shù)值在標準范圍內(nèi),但遠高于滅活組。結(jié)論在小鼠淋巴瘤試驗中,測定MF的平板一定要用滅活的血清,未滅活血清可能通過抵消TFT作用對結(jié)果產(chǎn)生很大影響。

原創(chuàng)作者：上海篤瑪生物科技有限公司