ELISA：本法主要用于檢測型特。該現已成為豬傳染性胃腸炎（TGE）、豬偽（PR）及豬胸膜肺炎（AP）的主要檢測。下面以AP2型的ELISA檢測法為例介紹其操作程序：① 100μl AP2型工作量抗原包被 → 4℃過夜，洗滌三次、拋干② 用200μl緩沖液進行封閉 → 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干③ 加工作量1:4稀釋被檢豬100μl → 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干④ 加100μl工作量兔抗AP2型 → 37℃ 30分鐘，洗滌三次、拋干⑤ 加100μl工作量豬抗兔IgG-HRP → 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干⑥ 加100μl OPD底物液 → 37℃ 20分鐘，加終止液⑦ 用ELISA檢測儀測定OD值。本試驗同時設陰、陽性對照、兔抗AP2型陽性對照、空白對照。

ELISA檢劑盒應用定性夾心檢測技術,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是型HEV毒株核心酸序列中抗原性很強的肽段,分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM,這些就會與HEV 的多肽抗原結合,并固定在上面,洗板除去其它非特和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結合物,經 次孵育后,酶結合物就會與 次孵育結合上的HEV IgM相結合,洗板除去未結合的酶結合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時會發(fā)生酶-底物反應,只有那些含有HEV IgM和酶結合物所形成的復合物的孔才會發(fā)生顏色變化,加入溶液終止酶和底物間的反應,并在波長: 450nm處測量O.D.值,按照本HEV IgMelisa試劑盒的, O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認為是初試陽性。

雞抗神經節(jié)苷脂M1(Anti-GM1)ELISA試劑盒

ELISA的基礎是抗原或的固相化及抗原或的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或仍保持其學活性,酶標記的抗原或既保留其學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的或抗原)與固相載體表面的抗原或起反應。用洗滌的使固相載體上形成的抗原復合物與中的其他分開。再加入酶標記的抗原或,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了反應的結果,使測定達到很高的度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定。

一、、靈敏、特異的;二、的重復性和可靠性;三、吸附性能好,空白值低,孔底度高的固相載體;四、適用、、組織勻漿液、細胞上清液、等等多種標本類型;五、節(jié)省實驗經費。elisa試劑盒回收率是反應待測物在樣品分析中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標液1PPM,就是1毫克/升,而作出數據為0.99毫克/升,就是說你的回收率是99%,這個與真實成分有密切的關系,說明的準確度。比如水中總無機氯含量測定,樣品水中含有無機氯20mg/L,取100mL被測水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無機氯樣品,測定時忽略體積變化,如果測定出樣品中無機氯為29.8mg/L,則認為回收率為99%。

操作注意事項：1. 試劑盒保存在 2-8℃，使用室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正�，F象，水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。3. 濃度為 0 的品可視為陰性對照或者空白；按照說明書操作時樣本已經稀釋 5 倍，終結果乘以5才是樣本終濃度。4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作.5. 所有組分使用充分搖勻。6. 若中英文說明書有誤，請以中文說明書為準。7. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按 1：20 稀釋，即 1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水。8. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的。顏色的深淺和樣品中呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。

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