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抗耐藥性基因1(BCAR1)ELISA試劑盒

點(diǎn)擊次數(shù):22 發(fā)布時(shí)間:2024/1/24 11:13:37
                                  

 

抗耐藥性基因1(BCAR1)ELISA試劑盒

實(shí)驗(yàn)原理

 

    ELISA運(yùn)用了學(xué)原理和化學(xué)反應(yīng)顯色原理,需要將抗原或預(yù)包被在固相載體表面,使后來(lái)形成的抗原--酶 (熒光基團(tuán)) -底物復(fù)合物黏附在載體上,通過(guò)檢測(cè)OD值或發(fā)光值,來(lái)檢測(cè)靶蛋白的含量。

 

 

ELISA試劑盒的操作步驟如下:1.包被:用PH9.6的CBS包被液稀釋包被抗原至5μg/ml,酶標(biāo)板中每孔加入50μl,室溫、4℃或37℃過(guò)夜包被。2.洗滌:棄包被液(拍干,再用無(wú)塵紙吸干),用PH7.2-7.4的1×PBST洗滌液洗板3次(每孔均要加滿),每次3min~5min。3.封閉:每孔加封閉液(1%BSA)250μl,37℃封閉2h。4.洗滌:用1×PBST洗滌液洗板3次,每次3min~5min。5.結(jié)合一抗:用1×PBST緩沖液1∶1000稀釋被檢,每孔100μl,要設(shè)立陰性對(duì)照,37℃孵育1.5h。6.洗滌:同上。7.結(jié)合酶標(biāo)二抗:每孔加1×PBST緩沖液1000倍稀釋的酶標(biāo)二抗羊抗鼠IgG-HRP(稀釋倍數(shù)根據(jù)產(chǎn)品不同有所不同,可按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行)50μl,37℃孵育1h.8.洗滌:同上。9.顯色:每孔加底物溶液(TMB)50μl,置室溫避光顯色10min。10.待顯色后,每孔加入50μl終止液(2mol/L H2SO4)終止反應(yīng)。使用酶標(biāo)儀讀取450nm的OD值,以確定水平。以上步驟僅供參考,具體操作請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況和產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

酶免ELISA試劑盒是一種常用的學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù),常用于抗原或的定量檢測(cè)。這種試劑盒利用酶聯(lián)吸附法(ELISA)技術(shù),將已知的抗原或吸附在固相載體表面,使酶標(biāo)記的抗原反應(yīng)在固相表面進(jìn)行,用洗滌法將液相中的游離成分洗除。ELISA試劑盒具有高靈敏度、高特、快速、易操作等優(yōu)點(diǎn),在醫(yī)學(xué)、生物學(xué)和化學(xué)等域廣泛應(yīng)用。

 

 

 

 

酶聯(lián)吸附法(ELISA)是一種靈敏、特異的學(xué)技術(shù),常用于醫(yī)學(xué)、生物域中的抗原或檢測(cè)。其使用范圍包括:1.臨床診斷:ELISA可以用于檢測(cè)傳染。ㄈ纭⒌龋、標(biāo)志物等,協(xié)助進(jìn)行診斷。2.食品安全:ELISA可以用于檢測(cè)食品中的有害(如殘留、獸藥殘留等),保障食品安全。3.監(jiān)測(cè):ELISA可以用于評(píng)估水質(zhì)、空氣等指標(biāo),監(jiān)測(cè)狀況。4.生物分子檢測(cè):ELISA可以用于檢測(cè)生物分子,如蛋白質(zhì)、多肽、等,在生物醫(yī)學(xué)研究域廣泛應(yīng)用?傊,酶聯(lián)吸附法在醫(yī)學(xué)、生物域中具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值,是臨床診斷和中重要的輔助手段。

ELISA試劑盒用法

 操作步驟

 

1. 工作:將試劑盒從冰箱中取出,室溫放置30分鐘,使試劑盒恢復(fù)至室溫。同時(shí)好實(shí)驗(yàn)所需的材料和。2. 加樣:在酶標(biāo)板的弟1個(gè)孔中加入品50μL,然后在后續(xù)的孔中依次加入待測(cè)樣本50μL。3. 溫育:將酶標(biāo)板密封,在37℃下溫育30分鐘。4. 洗滌:用洗滌液清洗酶標(biāo)板,共洗滌5次。每次洗滌后,用吸水紙輕輕吸干孔內(nèi)。5. 加酶:在每個(gè)孔中加入酶標(biāo)物100μL。6. 溫育:再次將酶標(biāo)板密封,在37℃下溫育30分鐘。7. 洗滌:用洗滌液清洗酶標(biāo)板,共洗滌5次。每次洗滌后,用吸水紙輕輕吸干孔內(nèi)。8. 加底物:在每個(gè)孔中加入底物A液50μL,再加入底物B液50μL。9. 終止反應(yīng):在每個(gè)孔中加入終止液50μL。10. 檢測(cè):用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下讀取各孔的吸光度(OD值)。

抗耐藥性基因1(BCAR1)ELISA試劑盒

結(jié)果分析

根據(jù)品和樣本的OD值,繪制曲線,從而計(jì)算出樣本中角蛋白1(KRT1)的濃度。具體分析可參劑盒說(shuō)明書(shū)或相關(guān)文獻(xiàn)。

 

注意事項(xiàng)

1. 在操作中,應(yīng)保持酶標(biāo)板的干燥,避免水分進(jìn)入孔內(nèi)。2. 加樣時(shí)需確保加樣準(zhǔn)確、無(wú)氣泡產(chǎn)生。3. 溫育和洗滌中需嚴(yán)格控制時(shí)間和溫度,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。4. 在使用酶標(biāo)儀讀取OD值時(shí),需確保波長(zhǎng)設(shè)置正確,避免誤差產(chǎn)生。5. 在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中,需保持操作的清潔和整潔,避免交叉污染。

 

原創(chuàng)作者:上海篤瑪生物科技有限公司

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