自從Engvall和Perlman(1971）報道建立酶聯(lián)吸附試驗（Enzyme-Linked ImmunosorbentAssays,ELISA）以來，由于ELISA具有快速、、簡便、易于化等優(yōu)點，使其迅速的發(fā)展和廣泛應用。盡管早期的ELISA由于特不夠高而妨礙了其在實際中應用的步伐，但隨著的不斷改進、材料的不斷更新，尤其是采用基因工程制備包被抗原，采用針對某一抗原表位的單克隆進行ELISA試驗，都大大了ELISA的特，加之電腦化程度的ELISA檢測儀的使用，使ELISA更為簡便實用和化，從而使其成為廣泛應用的檢測。如ELISA已被廣泛應用于多種和等的診斷。在動物檢疫方面，ELISA在豬傳染性胃腸炎、牛副結(jié)核病、牛傳染性鼻氣管炎、豬偽、藍舌病等的診斷中已為廣泛采用的。

ELISA檢劑盒應用定性夾心檢測技術(shù),用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是型HEV毒株核心酸序列中抗原性很強的肽段,分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM,這些就會與HEV 的多肽抗原結(jié)合,并固定在上面,洗板除去其它非特和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結(jié)合物,經(jīng) 次孵育后,酶結(jié)合物就會與 次孵育結(jié)合上的HEV IgM相結(jié)合,洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時會發(fā)生酶-底物反應,只有那些含有HEV IgM和酶結(jié)合物所形成的復合物的孔才會發(fā)生顏色變化,加入溶液終止酶和底物間的反應,并在波長: 450nm處測量O.D.值,按照本HEV IgMelisa試劑盒的, O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認為是初試陽性。

綿羊血小板膜糖蛋白IV(GP4/CD36)ELISA試劑盒

ELISA的基礎(chǔ)是抗原或的固相化及抗原或的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或仍保持其學活性,酶標記的抗原或既保留其學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的或抗原)與固相載體表面的抗原或起反應。用洗滌的使固相載體上形成的抗原復合物與中的其他分開。再加入酶標記的抗原或,也通過反應而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了反應的結(jié)果,使測定達到很高的度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定。

一、、靈敏、特異的;二、的重復性和可靠性;三、吸附性能好,空白值低,孔底度高的固相載體;四、適用、、組織勻漿液、細胞上清液、等等多種標本類型;五、節(jié)省實驗經(jīng)費。elisa試劑盒回收率是反應待測物在樣品分析中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標液1PPM,就是1毫克/升,而作出數(shù)據(jù)為0.99毫克/升,就是說你的回收率是99%,這個與真實成分有密切的關(guān)系,說明的準確度。比如水中總無機氯含量測定,樣品水中含有無機氯20mg/L,取100mL被測水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無機氯樣品,測定時忽略體積變化,如果測定出樣品中無機氯為29.8mg/L,則認為回收率為99%。

ELISA：本法主要用于檢測型特。該現(xiàn)已成為豬傳染性胃腸炎（TGE）、豬偽（PR）及豬胸膜肺炎（AP）的主要檢測。下面以AP2型的ELISA檢測法為例介紹其操作程序：① 100μl AP2型工作量抗原包被 → 4℃過夜，洗滌三次、拋干② 用200μl緩沖液進行封閉 → 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干③ 加工作量1:4稀釋被檢豬100μl → 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干④ 加100μl工作量兔抗AP2型 → 37℃ 30分鐘，洗滌三次、拋干⑤ 加100μl工作量豬抗兔IgG-HRP → 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干⑥ 加100μl OPD底物液 → 37℃ 20分鐘，加終止液⑦ 用ELISA檢測儀測定OD值。本試驗同時設(shè)陰、陽性對照、兔抗AP2型陽性對照、空白對照。

布ELISA：（C－ELISA）　C－ELISA（Cloth-ELISA）是加拿大學者Blais,B. W.等于1989年建立的一種新型檢測技術(shù)。該是以疏水性聚脂布（Hydrophobic Polyester Cloth）即滌綸布為固相載體，這種大孔徑的的疏水布具有吸附樣品量大，可為反應提供較大的表面積，反應的性，且容易洗滌，不需特殊儀器等優(yōu)點。其基本原理與Dot-ELISA類似，只是載體不同。以對布氏桿菌抗原的檢測為例，C－ELISA的主要程序為：⑴ 把抗布氏桿菌的包被（吸附）在聚脂布上，并經(jīng)洗滌及封閉；⑵ 加被檢樣品并于室溫下感作30分鐘，然后洗5次；⑶ 加酶標記的抗布氏桿菌，于室溫下感作30分鐘，然后洗滌5次；⑷ 加入底物液顯色；⑸ 測定OD值。

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