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兔淋巴細胞功能相關抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒

點擊次數(shù):15 發(fā)布時間:2024/1/23 11:31:10
 兔淋巴細胞功能相關抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒

用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的。顏色的深淺和樣品中呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。

ELISA檢劑盒應用定性夾心檢測技術,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是型HEV毒株核心酸序列中抗原性很強的肽段,分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM,這些就會與HEV 的多肽抗原結合,并固定在上面,洗板除去其它非特和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結合物,經 次孵育后,酶結合物就會與 次孵育結合上的HEV IgM相結合,洗板除去未結合的酶結合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時會發(fā)生酶-底物反應,只有那些含有HEV IgM和酶結合物所形成的復合物的孔才會發(fā)生顏色變化,加入溶液終止酶和底物間的反應,并在波長: 450nm處測量O.D.值,按照本HEV IgMelisa試劑盒的, O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認為是初試陽性。

 

兔淋巴細胞功能相關抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒

ELISA的基礎是抗原或的固相化及抗原或的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或仍保持其學活性,酶標記的抗原或既保留其學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的或抗原)與固相載體表面的抗原或起反應。用洗滌的使固相載體上形成的抗原復合物與中的其他分開。再加入酶標記的抗原或,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢的量直接相關,故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了反應的結果,使測定達到很高的度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定。

一、、靈敏、特異的;二、的重復性和可靠性;三、吸附性能好,空白值低,孔底度高的固相載體;四、適用、、組織勻漿液、細胞上清液、等等多種標本類型;五、節(jié)省實驗經費。elisa試劑盒回收率是反應待測物在樣品分析中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標液1PPM,就是1毫克/升,而作出數(shù)據(jù)為0.99毫克/升,就是說你的回收率是99%,這個與真實成分有密切的關系,說明的準確度。比如水中總無機氯含量測定,樣品水中含有無機氯20mg/L,取100mL被測水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無機氯樣品,測定時忽略體積變化,如果測定出樣品中無機氯為29.8mg/L,則認為回收率為99%。

本試劑盒采用雙夾心法酶聯(lián)吸附試驗(ELISA)。往預先包被捕獲的包被微孔中,依次加入標本、品、HRP標記的檢測,經過溫育并洗滌。

辣根過氧化物酶:過氧化物酶(HRP)廣泛分布于植物中,辣根中含,從辣根中提取的稱辣根過氧化物酶(HRP),是由無色酶蛋白和深棕色的鐵卟啉構成的一種糖蛋白(含糖量18%),分子量約40 000,約由300個酸組成,等電點為pH 3-9,催化反應的適pH值因供氫體不同而稍有差異,一般多在pH 5左右。此酶溶于水和50%飽和度以下的銨溶液。酶蛋白和輔基吸收光譜分別為275nm和403nm。

原創(chuàng)作者:上海篤瑪生物科技有限公司

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