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雞G蛋白偶聯(lián)受體家族C5組成員(GPRC5A)ELISA試劑盒
雞G蛋白偶聯(lián)受體家族C5組成員(GPRC5A)ELISA試劑盒
ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)原理.ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)原理是建立在抗原與學(xué)反應(yīng)的基礎(chǔ)上的,同時(shí)結(jié)合了酶的催化作用。其基本原理包括三個(gè)方面:1.抗原或能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白和聚表面間的疏水性部分相互吸附,并保持其學(xué)活性。2.抗原或可通過共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能保持其學(xué)和酶學(xué)活性。3.酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗(yàn)結(jié)果。ELISA法一方面是建立在抗原與學(xué)反應(yīng)的基礎(chǔ)上,因而具有特。而另一方面又由于酶標(biāo)記抗原或是酶分子與抗原或分子的結(jié)合物,它可以催化底物分子發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生放大作用,正因?yàn)榇朔N放大作用而使本法具有很高的性。因此,ELISA法是一種既又特異的。
試劑盒性能
1. 特高:由于是抗原的特結(jié)合,因此試驗(yàn)的特很高,能夠排除其他的。
2. 靈敏度高:由于酶的放大作用,使得試驗(yàn)的靈敏度大大,能夠檢測出微量的抗原或。
3. 操作簡便:ELISA試驗(yàn)操作相對(duì)簡單,容易,適合于大規(guī)模樣本檢測。
4. 適用范圍廣:可以用于檢測各種抗原、和等生物分子。
樣品收集、處理及保存
1. :使用不含熱原和內(nèi)的試管,操作中避免任何細(xì)胞,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. :EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測,請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解 凍并確保樣品均勻地充分解凍。
酶免ELISA試劑盒是一種常用的學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù),常用于抗原或的定量檢測。這種試劑盒利用酶聯(lián)吸附法(ELISA)技術(shù),將已知的抗原或吸附在固相載體表面,使酶標(biāo)記的抗原反應(yīng)在固相表面進(jìn)行,用洗滌法將液相中的游離成分洗除。ELISA試劑盒具有高靈敏度、高特、快速、易操作等優(yōu)點(diǎn),在醫(yī)學(xué)、生物學(xué)和化學(xué)等域廣泛應(yīng)用。
雞G蛋白偶聯(lián)受體家族C5組成員(GPRC5A)ELISA試劑盒
酶聯(lián)吸附法(ELISA)是一種靈敏、特異的學(xué)技術(shù),常用于醫(yī)學(xué)、生物域中的抗原或檢測。其作用包括:1.診斷:ELISA可以用于檢測或組織樣本中的特定分子,如抗原、抗原、標(biāo)志物等,協(xié)助進(jìn)行診斷。2.檢測:ELISA可以用于檢測血液中的,如乙型表面、人類缺陷等,用于流行病學(xué)調(diào)查和臨床診斷。3.評(píng)估:ELISA可以用于檢測后的以及劑量對(duì)的化學(xué)反應(yīng)等,幫助對(duì)患者進(jìn)行個(gè)性化。4.生物分子檢測:ELISA可以用于檢測生物分子,如蛋白質(zhì)、多肽、等,在生物醫(yī)學(xué)研究域廣泛應(yīng)用?傊,酶聯(lián)吸附法在醫(yī)學(xué)、生物域中具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值,是臨床診斷和中重要的輔助手段。
操作步驟
1)涂層:微孔板的孔涂上捕獲或抗原。
2)封閉:孔內(nèi)加入封閉劑(如牛白蛋白或羧纖維素),非特蛋
白質(zhì)結(jié)合。
3)樣本添加:加入含有未知濃度的目標(biāo)抗原或的樣本。
4)洗滌:去除未結(jié)合的。
5)檢測添加:加入對(duì)特定抗原有特的酶標(biāo)記檢測。
6) 再次洗滌:再次去除未結(jié)合的檢測。
7)底物添加:加入酶的底物,酶作用于底物產(chǎn)生顏色變化。
8)終止反應(yīng):加入終止溶液停止酶的反應(yīng)(在某些類型的ELISA中需要)。
9) 讀數(shù):使用光譜光度計(jì)測定每個(gè)孔的吸光度(通常是在特定波長下),吸光度
與樣本中抗原或的濃度成正比。
標(biāo)本的采集及保存
1.:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3.細(xì)胞物上清或其它生物標(biāo)本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 (注:標(biāo)本溶血會(huì)影響**檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。)
結(jié)果分析
根據(jù)試劑盒提供的品濃度及對(duì)應(yīng)的OD值,利用品繪制的曲線,計(jì)算待測樣品的濃度。一般采用擬合曲線法或直線回歸法進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,通過計(jì)算待測樣品的濃度。
免責(zé)聲明
試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或生物體實(shí)驗(yàn),否則所產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān), 本公司概不負(fù)責(zé)。
嚴(yán)格按照說明書操作,不同批號(hào)不可交換使用,實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。
原創(chuàng)作者:上海篤瑪生物科技有限公司