酶聯(lián)吸附法（ELISA）的優(yōu)點(diǎn)包括：1.高靈敏度：ELISA可以檢測(cè)出微量的抗原或，其靈敏度通常比其他學(xué)更高。2.高特：ELISA僅與特定的抗原或結(jié)合，因此不易受到其他的，具有較高的特。3.快速：ELISA操作簡(jiǎn)便、快速，可以在短時(shí)間內(nèi)結(jié)果.4.易操作：ELISA實(shí)驗(yàn)操作相對(duì)簡(jiǎn)單，易于化和自動(dòng)化，因此適合于大規(guī)模樣品的檢測(cè)。5.應(yīng)用范圍廣：ELISA可以用于檢測(cè)多種生物分子，如蛋白質(zhì)、多肽、等，因此在醫(yī)學(xué)、生物域廣泛應(yīng)用。6.無放射性核素污染：與放射測(cè)定法相比，ELISA不需要使用放射性核素，因此更為安全、環(huán)保�？傊�，ELISA是一種高靈敏度、高特、快速、易操作的學(xué)技術(shù)，具有廣泛的應(yīng)用景。

ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)原理.ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)原理是建立在抗原與學(xué)反應(yīng)的基礎(chǔ)上的，同時(shí)結(jié)合了酶的催化作用。其基本原理包括三個(gè)方面：1.抗原或能以物理性地吸附于固相載體表面，可能是蛋白和聚表面間的疏水性部分相互吸附，并保持其學(xué)活性。2.抗原或可通過共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物，而此種酶結(jié)合物仍能保持其學(xué)和酶學(xué)活性。3.酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或結(jié)合后，可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有反應(yīng)的存在，而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或的量成正比例的，因此，可以按底物顯色的程度顯示試驗(yàn)結(jié)果。ELISA法一方面是建立在抗原與學(xué)反應(yīng)的基礎(chǔ)上，因而具有特。而另一方面又由于酶標(biāo)記抗原或是酶分子與抗原或分子的結(jié)合物，它可以催化底物分子發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生放大作用，正因?yàn)榇朔N放大作用而使本法具有很高的性。因此，ELISA法是一種既又特異的。

ELISA測(cè)定結(jié)果如何計(jì)算.ELISA測(cè)定結(jié)果計(jì)算如下：1.計(jì)算陰性對(duì)照A值的平均數(shù)(NCX )和陽(yáng)性對(duì)照A值的平均數(shù)(PCX)。2.兩個(gè)平均數(shù)的差(P-N)大于一個(gè)特定的數(shù)值，例如0.400，試驗(yàn)才有效。3.3個(gè)陰性對(duì)照A值均應(yīng)≥0.5×NCX，并≤1.5×NCX，如其中超出此范圍，則棄去，而已另兩個(gè)陰性對(duì)照重新計(jì)算NCX；如有兩個(gè)陰性對(duì)照A值超出以上范圍，則該次實(shí)驗(yàn)無效。4.陽(yáng)性判定值按下式計(jì)算：陽(yáng)性判定值=NCX+0.05。5.標(biāo)本A值>陽(yáng)性判定值的為陽(yáng)性，小于陽(yáng)性判定值的為陰性。需要注意的是，試劑盒的常數(shù)只適合于該特定條件下，而不是對(duì)各種試劑均可通用。

雙夾心 本法主要用于檢測(cè)大分子抗原�，F(xiàn)以檢測(cè)雞傳染性法氏囊�。↖BDV）的雙夾心ELISA為例介紹本法的操作程序。 ① 加包被 → 4℃過夜，洗滌三次、拋干 ② 加待檢抗原 → 37℃ 30分鐘，洗滌三次、拋干 ③ 加酶標(biāo) → 37℃ 30分鐘，洗滌三次、拋干 ④ 加底物液　→ 37℃ 15分鐘，加終止液 ⑤ 用ELISA檢測(cè)儀測(cè)定OD值。 雙夾心ELISA 此法與雙夾心ELISA的主要區(qū)別在于：它是采用酶標(biāo)抗檢查多種大分子抗原，它不僅不必標(biāo)記每一種，還可試驗(yàn)的性。此法的基本程序?yàn)椋?① 加（Ab-1）包被 → 4℃過夜，洗滌三次、拋干 ② 加待檢抗原（Ag） → 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干 ③ 加用非同種動(dòng)物生產(chǎn)的特（Ab-2)→ 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干 ④ 加入酶標(biāo)抗Ab-2（AB-3）→ 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干 ⑤ 加底物液 → 37℃ 20分鐘，加終止液 ⑥ 用ELISA檢測(cè)儀測(cè)定OD值。 競(jìng)爭(zhēng)ELISA 此法主要用于測(cè)定小分子抗原及半抗原，其原理類似于放射測(cè)定。其基本程序?yàn)椋?① 包被 → 4℃過夜，洗滌三次、拋干 ② 加入待檢抗原及一定量的酶標(biāo)抗原（對(duì)照孔僅加酶標(biāo)抗原）→ 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干 ③ 加底物液 → 37℃ 20分鐘，加終止液 ④ 用ELISA檢測(cè)儀測(cè)定OD值。

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