發(fā)貨周期：1～3天

本產(chǎn)品應用于免疫印跡實驗，以化學發(fā)光法檢測蛋白質(zhì)。其原理是以辣根過氧化物酶(HRP)標記的抗體直接或間接結(jié)合膜上的目的蛋白質(zhì)，在洗膜后加入本試劑盒配制的ECL工作液，即可由HRP催化發(fā)出熒光。

本產(chǎn)品對抗原的 檢測限可達到中飛克，在Western blot實驗中，一抗(1mg/mL)儲存液可稀釋1:1,000至1:50,000倍，二抗(1mg/mL)儲存液可稀釋1:50,000至1:200,000倍。發(fā)光信號持久，結(jié)果可以通過X光膠片曝光或者其他適當熒光成像設備進行檢測。

注意事項：

• 本ECL試劑盒靈敏度高，需要優(yōu)化好上樣量、一抗、二抗?jié)舛群拖♂屢骸⒂≯E膜及封閉試劑，并按照蛋白表達豐度，參考推薦的抗體稀釋比例，來獲得 實驗結(jié)果。
• 如果印跡膜上條帶過亮時，建議使用膜再生液去除抗體后重新封閉孵育，
  并提高一抗二抗稀釋比例。如果條帶過暗也可將二抗稀釋比例降低至1:5000至1:10,000倍，以達到 效果。
• 本試劑盒A液和B液不可以相互污染，否則會降低產(chǎn)品的使用效果。
• 發(fā)光強度會隨時間緩慢減弱，建議在兩小時內(nèi)完成實驗。
• 孵育二抗后，洗膜緩沖液應避免使用疊氮鈉，疊氮鈉是HPR的抑制劑。
• 為了您的安全和健康，請穿戴實驗服并戴一次性手套操作。

操作步驟：

• 進行常規(guī)Western Blot。
• ECL工作液按照1:1的比例等體積混合適量A液和B液制備。
  注：工作液 在臨近使用配制，推薦使用劑量：0.1mL工作液/cm2膜。
• 用鑷子取出洗好的膜，瀝干膜上洗膜液，將結(jié)合有蛋白的一面朝上，放置于潔凈保鮮膜上。
• 加上配好的ECL工作液，孵育時確保工作液覆蓋整張膜，室溫孵育1～2min。
• 棄去印跡膜上ECL工作液，將一張潔凈的保鮮膜平整的鋪在印跡膜上。
• 將處理好的印跡膜置于X光片盒中，在暗室中取一張膠片小心置于膜上，曝光時間取決于膜上的發(fā)光強度，曝光后立即顯影定影，或?qū)⒂≯E膜放置到熒光成像儀內(nèi)，按儀器說明書進行檢測。

原創(chuàng)作者：上海篤瑪生物科技有限公司