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豚鼠熱休克蛋白60(HSP-60/HSPD1)ELISA試劑盒
豚鼠熱休克蛋白60(HSP-60/HSPD1)ELISA試劑盒
實驗原理ELISA運用了學原理和化學反應顯色原理,需要將抗原或預包被在固相載體表面,使后來形成的抗原--酶 (熒光基團) -底物復合物黏附在載體上,通過檢測OD值或發(fā)光值,來檢測靶蛋白的含量。
酶聯吸附法(ELISA)是一種靈敏、特異的學技術,常用于醫(yī)學、生物域中的抗原或檢測。其操作步驟如下:1.包被:將抗原或與酶結合,形成酶標抗原或,并固定在固相載體上。2.洗滌:去除未結合的和雜質。3.封閉:加入封閉液,封閉固相載體上未結合的位點,以非特結合。4.洗滌:去除未結合的封閉液和雜質。5.加樣:加入待檢測的樣本,使其與固相載體上的抗原或結合。6.洗滌:去除未結合的樣本和雜質。7.加入酶標:使固相載體上的抗原或與酶標結合,將抗原或間接標記上酶。8.洗滌:去除未結合的酶標和雜質。9.顯色:加入底物,使酶催化底物生成有色產物,根據顏色反應的程度進行抗原或的定性或定量檢測。需要注意的是,具體的操作步驟可能因實驗設計、試劑品牌等不同而有所差異。在進行ELISA實驗時,應嚴格按照試劑盒說明書和實驗指導手冊進行操作,控制好實驗條件和操作步驟,以實驗結果的準確性和可靠性。
酶聯吸附法(ELISA)的優(yōu)點包括:1.高靈敏度:ELISA可以檢測出微量的抗原或,其靈敏度通常比其他學更高。2.高特:ELISA僅與特定的抗原或結合,因此不易受到其他的,具有較高的特。3.快速:ELISA操作簡便、快速,可以在短時間內結果.4.易操作:ELISA實驗操作相對簡單,易于化和自動化,因此適合于大規(guī)模樣品的檢測。5.應用范圍廣:ELISA可以用于檢測多種生物分子,如蛋白質、多肽、等,因此在醫(yī)學、生物域廣泛應用。6.無放射性核素污染:與放射測定法相比,ELISA不需要使用放射性核素,因此更為安全、環(huán)保?傊珽LISA是一種高靈敏度、高特、快速、易操作的學技術,具有廣泛的應用景。
90分鐘一步法ELISA試劑盒可以適用于、、組織勻漿、細胞上清液等樣本類型。這些樣本可以用于檢測、和其他微生物等病原體,以及、自身性等病理情況。同時,ELISA試劑盒還可以用于檢測濃度、維生素等營養(yǎng),以及污染物等有害的殘留量。需要注意的是,不同樣本類型和檢測項目可能對ELISA試劑盒的靈敏度和特產生影響,因此在選擇使用ELISA試劑盒時需要根據具體情況進行選擇。
ELISA試劑盒的實驗原理.ELISA試劑盒的實驗原理是建立在抗原與學反應的基礎上的,同時結合了酶的催化作用。其基本原理包括三個方面:1.抗原或能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白和聚表面間的疏水性部分相互吸附,并保持其學活性。2.抗原或可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物,而此種酶結合物仍能保持其學和酶學活性。3.酶結合物與相應抗原或結合后,可根據加入底物的顏色反應來判定是否有反應的存在,而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗結果。ELISA法一方面是建立在抗原與學反應的基礎上,因而具有特。而另一方面又由于酶標記抗原或是酶分子與抗原或分子的結合物,它可以催化底物分子發(fā)生反應,產生放大作用,正因為此種放大作用而使本法具有很高的性。因此,ELISA法是一種既又特異的。
操作步驟
1. 工作:將試劑盒從冰箱中取出,室溫放置30分鐘,使試劑盒恢復至室溫。同時好實驗所需的材料和。2. 加樣:在酶標板的弟1個孔中加入品50μL,然后在后續(xù)的孔中依次加入待測樣本50μL。3. 溫育:將酶標板密封,在37℃下溫育30分鐘。4. 洗滌:用洗滌液清洗酶標板,共洗滌5次。每次洗滌后,用吸水紙輕輕吸干孔內。5. 加酶:在每個孔中加入酶標物100μL。6. 溫育:再次將酶標板密封,在37℃下溫育30分鐘。7. 洗滌:用洗滌液清洗酶標板,共洗滌5次。每次洗滌后,用吸水紙輕輕吸干孔內。8. 加底物:在每個孔中加入底物A液50μL,再加入底物B液50μL。9. 終止反應:在每個孔中加入終止液50μL。10. 檢測:用酶標儀在450nm波長下讀取各孔的吸光度(OD值)。
豚鼠熱休克蛋白60(HSP-60/HSPD1)ELISA試劑盒
結果分析
根據品和樣本的OD值,繪制曲線,從而計算出樣本中角蛋白1(KRT1)的濃度。具體分析可參劑盒說明書或相關文獻。
注意事項
1. 在操作中,應保持酶標板的干燥,避免水分進入孔內。2. 加樣時需確保加樣準確、無氣泡產生。3. 溫育和洗滌中需嚴格控制時間和溫度,確保實驗結果的準確性。4. 在使用酶標儀讀取OD值時,需確保波長設置正確,避免誤差產生。5. 在整個實驗中,需保持操作的清潔和整潔,避免交叉污染。
原創(chuàng)作者:上海篤瑪生物科技有限公司