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豚鼠淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原2(LFA-2/CD2)ELISA試劑盒
豚鼠淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原2(LFA-2/CD2)ELISA試劑盒
ELISA測(cè)定結(jié)果如何計(jì)算.ELISA測(cè)定結(jié)果計(jì)算如下:1.計(jì)算陰性對(duì)照A值的平均數(shù)(NCX )和陽性對(duì)照A值的平均數(shù)(PCX)。2.兩個(gè)平均數(shù)的差(P-N)大于一個(gè)特定的數(shù)值,例如0.400,試驗(yàn)才有效。3.3個(gè)陰性對(duì)照A值均應(yīng)≥0.5×NCX,并≤1.5×NCX,如其中超出此范圍,則棄去,而已另兩個(gè)陰性對(duì)照重新計(jì)算NCX;如有兩個(gè)陰性對(duì)照A值超出以上范圍,則該次實(shí)驗(yàn)無效。4.陽性判定值按下式計(jì)算:陽性判定值=NCX+0.05。5.標(biāo)本A值>陽性判定值的為陽性,小于陽性判定值的為陰性。需要注意的是,試劑盒的常數(shù)只適合于該特定條件下,而不是對(duì)各種試劑均可通用。
試劑盒性能
1. 特高:由于是抗原的特結(jié)合,因此試驗(yàn)的特很高,能夠排除其他的。
2. 靈敏度高:由于酶的放大作用,使得試驗(yàn)的靈敏度大大,能夠檢測(cè)出微量的抗原或。
3. 操作簡便:ELISA試驗(yàn)操作相對(duì)簡單,容易,適合于大規(guī)模樣本檢測(cè)。
4. 適用范圍廣:可以用于檢測(cè)各種抗原、和等生物分子。
樣品收集、處理及保存
1. :使用不含熱原和內(nèi)的試管,操作中避免任何細(xì)胞,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. :EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解 凍并確保樣品均勻地充分解凍。
酶聯(lián)吸附法(ELISA)的優(yōu)點(diǎn)包括:1.高靈敏度:ELISA可以檢測(cè)出微量的抗原或,其靈敏度通常比其他學(xué)更高。2.高特:ELISA僅與特定的抗原或結(jié)合,因此不易受到其他的,具有較高的特。3.快速:ELISA操作簡便、快速,可以在短時(shí)間內(nèi)結(jié)果.4.易操作:ELISA實(shí)驗(yàn)操作相對(duì)簡單,易于化和自動(dòng)化,因此適合于大規(guī)模樣品的檢測(cè)。5.應(yīng)用范圍廣:ELISA可以用于檢測(cè)多種生物分子,如蛋白質(zhì)、多肽、等,因此在醫(yī)學(xué)、生物域廣泛應(yīng)用。6.無放射性核素污染:與放射測(cè)定法相比,ELISA不需要使用放射性核素,因此更為安全、環(huán)保?傊珽LISA是一種高靈敏度、高特、快速、易操作的學(xué)技術(shù),具有廣泛的應(yīng)用景。
豚鼠淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原2(LFA-2/CD2)ELISA試劑盒
90分鐘一步法ELISA試劑盒可以適用于、、組織勻漿、細(xì)胞上清液等樣本類型。這些樣本可以用于檢測(cè)、和其他微生物等病原體,以及、自身性等病理情況。同時(shí),ELISA試劑盒還可以用于檢測(cè)濃度、維生素等營養(yǎng),以及污染物等有害的殘留量。需要注意的是,不同樣本類型和檢測(cè)項(xiàng)目可能對(duì)ELISA試劑盒的靈敏度和特產(chǎn)生影響,因此在選擇使用ELISA試劑盒時(shí)需要根據(jù)具體情況進(jìn)行選擇。
操作步驟
1)涂層:微孔板的孔涂上捕獲或抗原。
2)封閉:孔內(nèi)加入封閉劑(如牛白蛋白或羧纖維素),非特蛋
白質(zhì)結(jié)合。
3)樣本添加:加入含有未知濃度的目標(biāo)抗原或的樣本。
4)洗滌:去除未結(jié)合的。
5)檢測(cè)添加:加入對(duì)特定抗原有特的酶標(biāo)記檢測(cè)。
6) 再次洗滌:再次去除未結(jié)合的檢測(cè)。
7)底物添加:加入酶的底物,酶作用于底物產(chǎn)生顏色變化。
8)終止反應(yīng):加入終止溶液停止酶的反應(yīng)(在某些類型的ELISA中需要)。
9) 讀數(shù):使用光譜光度計(jì)測(cè)定每個(gè)孔的吸光度(通常是在特定波長下),吸光度
與樣本中抗原或的濃度成正比。
標(biāo)本的采集及保存
1.:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3.細(xì)胞物上清或其它生物標(biāo)本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 (注:標(biāo)本溶血會(huì)影響**檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。)
結(jié)果分析
根據(jù)試劑盒提供的品濃度及對(duì)應(yīng)的OD值,利用品繪制的曲線,計(jì)算待測(cè)樣品的濃度。一般采用擬合曲線法或直線回歸法進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,通過計(jì)算待測(cè)樣品的濃度。
免責(zé)聲明
試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或生物體實(shí)驗(yàn),否則所產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān), 本公司概不負(fù)責(zé)。
嚴(yán)格按照說明書操作,不同批號(hào)不可交換使用,實(shí)驗(yàn)者違反說明書操作,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。
原創(chuàng)作者:上海篤瑪生物科技有限公司