豚鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒

ELISA試劑盒的操作步驟如下：1.包被：用PH9.6的CBS包被液稀釋包被抗原至5μg/ml，酶標(biāo)板中每孔加入50μl，室溫、4℃或37℃過(guò)夜包被。2.洗滌：棄包被液（拍干，再用無(wú)塵紙吸干），用PH7.2-7.4的1×PBST洗滌液洗板3次（每孔均要加滿），每次3min~5min。3.封閉：每孔加封閉液（1%BSA）250μl，37℃封閉2h。4.洗滌：用1×PBST洗滌液洗板3次，每次3min~5min。5.結(jié)合一抗：用1×PBST緩沖液1∶1000稀釋被檢，每孔100μl，要設(shè)立陰性對(duì)照，37℃孵育1.5h。6.洗滌：同上。7.結(jié)合酶標(biāo)二抗：每孔加1×PBST緩沖液1000倍稀釋的酶標(biāo)二抗羊抗鼠IgG-HRP（稀釋倍數(shù)根據(jù)產(chǎn)品不同有所不同，可按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行）50μl，37℃孵育1h.8.洗滌：同上。9.顯色：每孔加底物溶液（TMB）50μl，置室溫避光顯色10min。10.待顯色后，每孔加入50μl終止液（2mol/L H2SO4）終止反應(yīng)。使用酶標(biāo)儀讀取450nm的OD值，以確定水平。以上步驟僅供參考，具體操作請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況和產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

試劑盒性能

1. 特高：由于是抗原的特結(jié)合，因此試驗(yàn)的特很高，能夠排除其他的。

2. 靈敏度高：由于酶的放大作用，使得試驗(yàn)的靈敏度大大，能夠檢測(cè)出微量的抗原或。

3. 操作簡(jiǎn)便：ELISA試驗(yàn)操作相對(duì)簡(jiǎn)單，容易，適合于大規(guī)模樣本檢測(cè)。

4. 適用范圍廣：可以用于檢測(cè)各種抗原、和等生物分子。

樣品收集、處理及保存

1. ：使用不含熱原和內(nèi)的試管，操作中避免任何細(xì)胞，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2. ：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上清。

3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解 凍并確保樣品均勻地充分解凍。

酶免ELISA試劑盒是一種常用的學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)，常用于抗原或的定量檢測(cè)。這種試劑盒利用酶聯(lián)吸附法（ELISA）技術(shù)，將已知的抗原或吸附在固相載體表面，使酶標(biāo)記的抗原反應(yīng)在固相表面進(jìn)行，用洗滌法將液相中的游離成分洗除。ELISA試劑盒具有高靈敏度、高特、快速、易操作等優(yōu)點(diǎn)，在醫(yī)學(xué)、生物學(xué)和化學(xué)等域廣泛應(yīng)用。

豚鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒

酶免ELISA試劑盒是一種常用的學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)，常用于抗原或的定量檢測(cè)。這種試劑盒利用酶聯(lián)吸附法（ELISA）技術(shù)，將已知的抗原或吸附在固相載體表面，使酶標(biāo)記的抗原反應(yīng)在固相表面進(jìn)行，用洗滌法將液相中的游離成分洗除。ELISA試劑盒具有高靈敏度、高特、快速、易操作等優(yōu)點(diǎn)，在醫(yī)學(xué)、生物學(xué)和化學(xué)等域廣泛應(yīng)用。

操作步驟

1)涂層:微孔板的孔涂上捕獲或抗原。

2)封閉:孔內(nèi)加入封閉劑(如牛白蛋白或羧纖維素)，非特蛋

白質(zhì)結(jié)合。

3)樣本添加:加入含有未知濃度的目標(biāo)抗原或的樣本。

4)洗滌:去除未結(jié)合的。

5)檢測(cè)添加:加入對(duì)特定抗原有特的酶標(biāo)記檢測(cè)。

6) 再次洗滌:再次去除未結(jié)合的檢測(cè)。

7)底物添加:加入酶的底物，酶作用于底物產(chǎn)生顏色變化。

8)終止反應(yīng):加入終止溶液停止酶的反應(yīng)(在某些類型的ELISA中需要)。

9) 讀數(shù):使用光譜光度計(jì)測(cè)定每個(gè)孔的吸光度(通常是在特定波長(zhǎng)下)，吸光度

與樣本中抗原或的濃度成正比。

標(biāo)本的采集及保存

1.：全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)一晚后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 

2.：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 

3.細(xì)胞物上清或其它生物標(biāo)本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 (注：標(biāo)本溶血會(huì)影響**檢測(cè)結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。) 

結(jié)果分析

根據(jù)試劑盒提供的品濃度及對(duì)應(yīng)的OD值，利用品繪制的曲線，計(jì)算待測(cè)樣品的濃度。一般采用擬合曲線法或直線回歸法進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，通過(guò)計(jì)算待測(cè)樣品的濃度。

免責(zé)聲明

試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或生物體實(shí)驗(yàn)，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)， 本公司概不負(fù)責(zé)。

嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作，不同批號(hào)不可交換使用，實(shí)驗(yàn)者違反說(shuō)明書(shū)操作，后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。

原創(chuàng)作者：上海篤瑪生物科技有限公司