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聯(lián)系人:楊燕燕
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雞尿激酶型纖溶酶原因子(PLAU/uPA)ELISA試劑盒
雞尿激酶型纖溶酶原因子(PLAU/uPA)ELISA試劑盒
ELISA試劑盒的用法包括以下步驟:1.包被:用PH9.6的CBS包被液稀釋包被抗原至5μg/ml,酶標板中每孔加入50μl,室溫、4℃或37℃過夜包被。2.洗滌:棄包被液(拍干,再用無塵紙吸干),用PH7.2-7.4的1×PBST洗滌液洗板3次(每孔均要加滿),每次3min~5min。3.封閉:每孔加封閉液(1%BSA)250μl,37℃封閉2h。4.洗滌:用1×PBST洗滌液洗板3次,每次3min~5min。5.加樣:加入已經(jīng)稀釋好的樣品,37℃反應(yīng)1h。一般樣本加入50-100μl,充分混勻。6.洗滌:用洗滌液洗板3次,每次3min~5min。7.加入酶標試劑:每孔加入100μl酶標溶液,37℃,1h。8.洗滌:用洗滌液洗板3次,每次3min~5min。9.顯色:每孔先加入顯色劑A液50μl,再加入顯色劑B液50μl,37℃避光10-15min。10.終止及測定:加入50μl終止液,終止反應(yīng),用酶標儀在450nm波長處測OD值。
試劑盒性能
1. 特高:由于是抗原的特結(jié)合,因此試驗的特很高,能夠排除其他的。
2. 靈敏度高:由于酶的放大作用,使得試驗的靈敏度大大,能夠檢測出微量的抗原或。
3. 操作簡便:ELISA試驗操作相對簡單,容易,適合于大規(guī)模樣本檢測。
4. 適用范圍廣:可以用于檢測各種抗原、和等生物分子。
樣品收集、處理及保存
1. :使用不含熱原和內(nèi)的試管,操作中避免任何細胞,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將和紅細胞迅速小心地分離。
2. :EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解 凍并確保樣品均勻地充分解凍。
酶聯(lián)吸附法(ELISA)是一種靈敏、特異的學技術(shù),常用于醫(yī)學、生物域中的抗原或檢測。其作用包括:1.診斷:ELISA可以用于檢測或組織樣本中的特定分子,如抗原、抗原、標志物等,協(xié)助進行診斷。2.檢測:ELISA可以用于檢測血液中的,如乙型表面、人類缺陷等,用于流行病學調(diào)查和臨床診斷。3.評估:ELISA可以用于檢測后的以及劑量對的化學反應(yīng)等,幫助對患者進行個性化。4.生物分子檢測:ELISA可以用于檢測生物分子,如蛋白質(zhì)、多肽、等,在生物醫(yī)學研究域廣泛應(yīng)用?傊嘎(lián)吸附法在醫(yī)學、生物域中具有廣泛的應(yīng)用價值,是臨床診斷和中重要的輔助手段。
雞尿激酶型纖溶酶原因子(PLAU/uPA)ELISA試劑盒
酶聯(lián)吸附法(ELISA)在多個行業(yè)都有應(yīng)用,特別是在醫(yī)學和生物技術(shù)域中了廣泛應(yīng)用。以下是一些應(yīng)用ELISA的行業(yè):1.醫(yī)學診斷:ELISA被廣泛應(yīng)用于各種和等的診斷,如、、結(jié)核病等。在動物檢疫方面,ELISA已為廣泛采用的,例如用于診斷豬傳染性胃腸炎、牛副結(jié)核病、牛傳染性鼻氣管炎、豬偽、藍舌病等。2.生物技術(shù)研發(fā):ELISA可以用于檢測生物分子,如蛋白質(zhì)、多肽、等,在生物醫(yī)學研究域廣泛應(yīng)用。例如,在研發(fā)中,ELISA可以用于檢測的生物活性、與靶點的結(jié)合情況等。3.食品安全檢測:ELISA可以用于檢測食品中的有害,如殘留、獸藥殘留等,保障食品安全。4.監(jiān)測:ELISA可以用于評估水質(zhì)、空氣等指標,監(jiān)測狀況?傊嘎(lián)吸附法在醫(yī)學、生物技術(shù)、食品安全和監(jiān)測等域都有廣泛的應(yīng)用價值。
操作步驟
1)涂層:微孔板的孔涂上捕獲或抗原。
2)封閉:孔內(nèi)加入封閉劑(如牛白蛋白或羧纖維素),非特蛋
白質(zhì)結(jié)合。
3)樣本添加:加入含有未知濃度的目標抗原或的樣本。
4)洗滌:去除未結(jié)合的。
5)檢測添加:加入對特定抗原有特的酶標記檢測。
6) 再次洗滌:再次去除未結(jié)合的檢測。
7)底物添加:加入酶的底物,酶作用于底物產(chǎn)生顏色變化。
8)終止反應(yīng):加入終止溶液停止酶的反應(yīng)(在某些類型的ELISA中需要)。
9) 讀數(shù):使用光譜光度計測定每個孔的吸光度(通常是在特定波長下),吸光度
與樣本中抗原或的濃度成正比。
標本的采集及保存
1.:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復凍融。
2.:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復凍融。
3.細胞物上清或其它生物標本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復凍融。 (注:標本溶血會影響**檢測結(jié)果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。)
結(jié)果分析
根據(jù)試劑盒提供的品濃度及對應(yīng)的OD值,利用品繪制的曲線,計算待測樣品的濃度。一般采用擬合曲線法或直線回歸法進行數(shù)據(jù)處理,通過計算待測樣品的濃度。
免責聲明
試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或生物體實驗,否則所產(chǎn)生的一切后果,由實驗者承擔, 本公司概不負責。
嚴格按照說明書操作,不同批號不可交換使用,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔。
原創(chuàng)作者:上海篤瑪生物科技有限公司