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綿羊抗甲狀腺球蛋白(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒
綿羊抗甲狀腺球蛋白(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒
計(jì)算:以物的濃度為橫坐標(biāo)(對(duì)數(shù)坐標(biāo)),OD值為縱坐標(biāo)(普通坐標(biāo)),在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪出曲線,根據(jù)樣品的OD值由曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用物的濃度與OD值計(jì)算出曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
操作注意事項(xiàng)
1. 試劑盒保存在 2-8℃,使用室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。
2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3. 濃度為 0 的品可視為陰性對(duì)照或者空白;按照說(shuō)明書操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋 5 倍,終結(jié)果乘以5才是樣本終濃度。
4. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
5. 所有組分使用充分搖勻。
6. 若中英文說(shuō)明書有誤,請(qǐng)以中文說(shuō)明書為準(zhǔn)。
7. 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按 1:20 稀釋,即 1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水。
8. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟 1.從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回 4℃。 2. 設(shè)置品孔、樣本孔和空白孔,空白孔什么都不加;品孔各加不同濃度的品 50μL; 3. 待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本 10μL,再加樣本稀釋液 40μL; 4. 隨后品孔和樣本孔中(空白孔不加)加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè) 50μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。 5. 棄去,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置 1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗 板 5 次(也可用洗板機(jī)洗板)。 6. 所有孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。 7. 所有孔加入終止液 50μL,15min 內(nèi),在 450nm 波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的 OD 值。 結(jié)果判斷 繪制曲線:在Excel工作表中,以品濃度作橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出品線性回歸曲線,按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。
免責(zé)聲明
試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或生物體實(shí)驗(yàn),否則所產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān), 本公司概不負(fù)責(zé)。 嚴(yán)格按照說(shuō)明書操作,不同批號(hào)不可交換使用,實(shí)驗(yàn)者違反說(shuō)明書操作,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。
綿羊抗甲狀腺球蛋白(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒
免責(zé)聲明:試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或生物體實(shí)驗(yàn),否則所產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān), 本公司概不負(fù)責(zé)。嚴(yán)格按照說(shuō)明書操作,不同批號(hào)不可交換使用,實(shí)驗(yàn)者違反說(shuō)明書操作,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。
原創(chuàng)作者:上海篤瑪生物科技有限公司