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綿羊卵清蛋白特IgG(OVAsIgG)ELISA試劑盒
綿羊卵清蛋白特IgG(OVAsIgG)ELISA試劑盒
上海篤瑪生物科技有限公司ELISA試劑盒采用原裝進(jìn)口,一步孵育,一步洗板,操作時間僅需90分鐘,就能準(zhǔn)確的實驗結(jié)果。剛開起的酶聯(lián)板孔會含有少許水樣,此為正,F(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果造成任何影響,您盡可放心使用。本司研發(fā)各種種屬ELISA試劑盒:1、細(xì)胞因子檢劑盒,如白介素、選擇素、集落因子,壞死因子,素,轉(zhuǎn)化生長因子,趨化因子,細(xì)胞因子受體,粘附分子,生長因子,凋亡因子等等;2、肝纖維化檢測ELISA試劑盒,如纖維連接蛋白,質(zhì)酸,膠原,基質(zhì)金屬蛋白酶因子,基質(zhì)金屬蛋白酶,層粘蛋白等等;3、檢測ELISA試劑盒,如肌鈣蛋白,肌紅蛋白,C-反應(yīng)蛋白等等;4、內(nèi)檢測ELISA試劑盒,如甲狀腺,,性,,,,生長抑素,內(nèi)皮素,皮質(zhì)醇,骨鈣素,催乳素,皮質(zhì),促素,,雌三醇,5-色胺,17-等等;5、自身檢測ELISA試劑盒,如甲狀腺,鹽水可提取核抗原(ENA),抗核,DNA,抗心磷脂,類因子,循環(huán)復(fù)合物,抗胰島細(xì)胞,胰蛋白酶原,Sm,大皰性類皰,蛋白酶,短膜蟲法,肝-,肝--胃,肌內(nèi)膜,角蛋白,抗核,抗核糖體蛋白,抗聚角蛋白微絲蛋白,抗鏈O,抗,抗肌,抗線粒體,抗心肌,抗組蛋白,粒細(xì)胞彈性蛋白酶,皮膚,小球基底膜,小球基底膜,髓過氧化物酶,條紋肌,網(wǎng)硬蛋白,胃壁細(xì)胞,胃蛋白酶,,性滲透性增強(qiáng)因子等等;6、標(biāo)志物檢測ELISA試劑盒,如標(biāo)志物,組織多肽抗原,相關(guān),細(xì)胞角蛋白片段,胃腸癌,鐵蛋白,糖鏈抗原,神經(jīng)特稀醇化酶,上皮膜抗原,,人抗小鼠,,甲胎蛋白,,,,大隱血檢測,癌胚抗原,β-2微球蛋白等等;7、優(yōu)生優(yōu)育檢測ELISA試劑盒,如早,新生兒TSH,檢測,抗心磷脂,抗帶,抗帶,抗,抗,巨細(xì)胞,弓形體,風(fēng)疹,分娩,單核白細(xì)胞增多癥,單純皰疹,促素,促,便隱血,HCG等等;8、傳染病檢測ELISA試劑盒,如幽門螺桿菌,乙腦,,丙肝,丁肝,戊肝,庚肝,,,腺,微小B19,天皰,水-帶狀皰疹,生支原體,,沙眼,腮腺炎,人型支原體,,輪,,萊姆病,柯薩奇,抗解尿支原體,軍團(tuán)菌,結(jié)核,膠原,,甲肝,,急性炎尿胰蛋白酶,,呼吸道合胞,肝吸蟲,副流感,肺炎,帶狀皰疹,傳染性單核細(xì)胞增多癥,層粘蛋白,布魯氏桿菌,,,艾柯,EB,A族鏈球菌等等;9、特種蛋白檢測ELISA試劑盒,如球蛋白,抗鏈O-aso,類因子RF,C反應(yīng)蛋白,微量白蛋白,β-2微球蛋白human,鐵蛋白,轉(zhuǎn)鐵蛋白transferrin等等.
綿羊卵清蛋白特IgG(OVAsIgG)ELISA試劑盒
上海篤瑪生物科技有限公司ELISA試劑盒采用原裝進(jìn)口,一步孵育,一步洗板,操作時間僅需90分鐘,就能準(zhǔn)確的實驗結(jié)果。剛開起的酶聯(lián)板孔會含有少許水樣,此為正,F(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果造成任何影響,您盡可放心使用。本司研發(fā)各種種屬ELISA試劑盒:1、細(xì)胞因子檢劑盒,如白介素、選擇素、集落因子,壞死因子,素,轉(zhuǎn)化生長因子,趨化因子,細(xì)胞因子受體,粘附分子,生長因子,凋亡因子等等;2、肝纖維化檢測ELISA試劑盒,如纖維連接蛋白,質(zhì)酸,膠原,基質(zhì)金屬蛋白酶因子,基質(zhì)金屬蛋白酶,層粘蛋白等等;3、檢測ELISA試劑盒,如肌鈣蛋白,肌紅蛋白,C-反應(yīng)蛋白等等;4、內(nèi)檢測ELISA試劑盒,如甲狀腺,,性,,,,生長抑素,內(nèi)皮素,皮質(zhì)醇,骨鈣素,催乳素,皮質(zhì),促素,,雌三醇,5-色胺,17-等等;5、自身檢測ELISA試劑盒,如甲狀腺,鹽水可提取核抗原(ENA),抗核,DNA,抗心磷脂,類因子,循環(huán)復(fù)合物,抗胰島細(xì)胞,胰蛋白酶原,Sm,大皰性類皰,蛋白酶,短膜蟲法,肝-,肝--胃,肌內(nèi)膜,角蛋白,抗核,抗核糖體蛋白,抗聚角蛋白微絲蛋白,抗鏈O,抗,抗肌,抗線粒體,抗心肌,抗組蛋白,粒細(xì)胞彈性蛋白酶,皮膚,小球基底膜,小球基底膜,髓過氧化物酶,條紋肌,網(wǎng)硬蛋白,胃壁細(xì)胞,胃蛋白酶,,性滲透性增強(qiáng)因子等等;6、標(biāo)志物檢測ELISA試劑盒,如標(biāo)志物,組織多肽抗原,相關(guān),細(xì)胞角蛋白片段,胃腸癌,鐵蛋白,糖鏈抗原,神經(jīng)特稀醇化酶,上皮膜抗原,,人抗小鼠,,甲胎蛋白,,,,大隱血檢測,癌胚抗原,β-2微球蛋白等等;7、優(yōu)生優(yōu)育檢測ELISA試劑盒,如早,新生兒TSH,檢測,抗心磷脂,抗帶,抗帶,抗,抗,巨細(xì)胞,弓形體,風(fēng)疹,分娩,單核白細(xì)胞增多癥,單純皰疹,促素,促,便隱血,HCG等等;8、傳染病檢測ELISA試劑盒,如幽門螺桿菌,乙腦,,丙肝,丁肝,戊肝,庚肝,,,腺,微小B19,天皰,水-帶狀皰疹,生支原體,,沙眼,腮腺炎,人型支原體,,輪,,萊姆病,柯薩奇,抗解尿支原體,軍團(tuán)菌,結(jié)核,膠原,,甲肝,,急性炎尿胰蛋白酶,,呼吸道合胞,肝吸蟲,副流感,肺炎,帶狀皰疹,傳染性單核細(xì)胞增多癥,層粘蛋白,布魯氏桿菌,,,艾柯,EB,A族鏈球菌等等;9、特種蛋白檢測ELISA試劑盒,如球蛋白,抗鏈O-aso,類因子RF,C反應(yīng)蛋白,微量白蛋白,β-2微球蛋白human,鐵蛋白,轉(zhuǎn)鐵蛋白transferrin等等.
試劑盒操作步驟:
實驗開始,請?zhí)崤渲煤盟性噭,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1.加樣:分別設(shè)空白孔、孔、待測樣品孔?瞻卓准訕悠废♂屢100μl,余孔分別加品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。 為實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的品溶液。
2.棄去,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記工作液 100μl(取1μl生物素標(biāo)記加99μl生物素標(biāo)記稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi),甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi),甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時可見品的3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn))。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。
標(biāo)本的采集及保存:
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:全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
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:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
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細(xì)胞物上清或其它生物標(biāo)本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 (注:標(biāo)本溶血會影響**檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項檢測。)
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標(biāo)本的稀釋原則:通過文獻(xiàn)檢索的了解待測樣本的大致含量,確定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至曲線的范圍內(nèi),檢測的結(jié)果才是準(zhǔn)確的。稀釋的中,應(yīng)做好詳細(xì)的記錄。計算濃度時,稀釋了“N”倍,標(biāo)本的濃度應(yīng)再乘以“N”。
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品的稀釋原則:2瓶,每瓶臨用以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為300 pg/ml,做系列倍比稀釋后,分別稀釋300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,樣品稀釋液直接作為濃度0 pg/ml,臨用15分鐘內(nèi)配制。 如配制150 pg/ml品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
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生物素標(biāo)記的稀釋原則:臨用以生物素標(biāo)記稀釋液稀釋,稀釋根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔100μl),實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標(biāo)記加990μl生物素標(biāo)記稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用小時內(nèi)配制。
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辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素的稀釋原則:臨用以辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液稀釋,稀釋根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔100μl),實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素加990μl辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 的比例配制,輕輕混勻,在使用小時內(nèi)配置
標(biāo)記:良好的酶結(jié)合物取決于兩個條件:即價的和高活性的酶。的活性和純度對制備標(biāo)記至關(guān)重要,因為特反應(yīng)隨活性和純度的而增強(qiáng)。在酶標(biāo)記中,的活性有所,故需要純度高、效及抗原親和力強(qiáng)的球蛋白使用親和層析提純的,可性,而且可稀釋使用,非特吸附。
實驗結(jié)果計算:
以物的濃度為橫坐標(biāo)(對數(shù)坐標(biāo)),OD值為縱坐標(biāo)(普通坐標(biāo)),在半對數(shù)坐標(biāo)紙上繪出曲線,根據(jù)樣品的OD值由曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用物的濃度與OD值計算出曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
繪制曲線:在Excel工作表中,以品濃度作橫坐標(biāo),對應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。
注意事項:
1.當(dāng)混合蛋白溶液時應(yīng)盡量輕緩,避免起泡。
2.洗滌非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。
3.一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,建議使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做曲線,做復(fù)孔。
5.如標(biāo)本中待測含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請乘以稀釋倍數(shù)。
6.在配制品、檢測溶液工作液時,請以相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。
7.底物請避光保存。
8.不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。
試劑盒性能
1.準(zhǔn)確性:品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
2.靈敏度檢測濃度小于10 pg/ml。
3.特:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4.重復(fù)性:批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和15%。
原創(chuàng)作者:上海篤瑪生物科技有限公司