試劑盒性能

1. 特高：由于是抗原的特結合，因此試驗的特很高，能夠排除其他的。

2. 靈敏度高：由于酶的放大作用，使得試驗的靈敏度大大，能夠檢測出微量的抗原或。

3. 操作簡便：ELISA試驗操作相對簡單，容易，適合于大規(guī)模樣本檢測。

4. 適用范圍廣：可以用于檢測各種抗原、和等生物分子。

樣品收集、處理及保存

1. ：使用不含熱原和內的試管，操作中避免任何細胞，收集血液后，3000 轉離心 10 分鐘將和紅細胞迅速小心地分離。

2. ：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心 30 分鐘取上清。

3. 細胞上清液：3000 轉離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉離心 10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解 凍并確保樣品均勻地充分解凍。

 90分鐘一步法ELISA試劑盒：1.，靈敏，特異的，2，的重復性和可靠性；3吸附性能好，空白值低，孔底度和固相載體；4適用、、組織勻漿液，等多種標本型。

實驗原理

      試劑盒采用雙一步夾心法酶聯(lián)吸附試驗（ELISA）。往預先包被相關指標的的包被微孔中，依次加入標本、品、HRP標記的檢測，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的。顏色的深淺和樣品中的相關指標呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

 豚鼠緊密連接蛋白Claudin4(CLDN4)ELISA試劑盒

操作步驟

1)涂層:微孔板的孔涂上捕獲或抗原。

2)封閉:孔內加入封閉劑(如牛白蛋白或羧纖維素)，非特蛋

白質結合。

3)樣本添加:加入含有未知濃度的目標抗原或的樣本。

4)洗滌:去除未結合的。

5)檢測添加:加入對特定抗原有特的酶標記檢測。

6) 再次洗滌:再次去除未結合的檢測。

7)底物添加:加入酶的底物，酶作用于底物產(chǎn)生顏色變化。

8)終止反應:加入終止溶液停止酶的反應(在某些類型的ELISA中需要)。

9) 讀數(shù):使用光譜光度計測定每個孔的吸光度(通常是在特定波長下)，吸光度

與樣本中抗原或的濃度成正比。

實驗原理：試劑盒采用雙一步夾心法酶聯(lián)吸附試驗（ELISA）。往預先包被小鼠4壬烯醛(4-HNE)捕獲的包被微孔中，依次加入標本、品、HRP標記的檢測，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的。顏色的深淺和樣品中的小鼠4壬烯醛(4-HNE)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

標本的采集及保存

1.：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 

2.：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 

3.細胞物上清或其它生物標本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 (注：標本溶血會影響**檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。) 

結果分析

根據(jù)試劑盒提供的品濃度及對應的OD值，利用品繪制的曲線，計算待測樣品的濃度。一般采用擬合曲線法或直線回歸法進行數(shù)據(jù)處理，通過計算待測樣品的濃度。

免責聲明

試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或生物體實驗，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實驗者承擔， 本公司概不負責。

嚴格按照說明書操作，不同批號不可交換使用，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。

雙夾心ELISA：此法與雙夾心ELISA的主要區(qū)別在于：它是采用酶標抗檢查多種大分子抗原，它不僅不必標記每一種，還可試驗的性。此法的基本程序為：① 加（Ab-1）包被 → 4℃過夜，洗滌三次、拋干② 加待檢抗原（Ag） → 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干③ 加用非同種動物生產(chǎn)的特（Ab-2)→ 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干④ 加入酶標抗Ab-2（AB-3）→ 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干⑤ 加底物液 → 37℃ 20分鐘，加終止液⑥ 用ELISA檢測儀測定OD值。

原創(chuàng)作者：上海篤瑪生物科技有限公司