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聯(lián)系人:楊燕燕
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技術(shù)文章
豚鼠S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)ELISA試劑盒
使用說明書
試劑盒采用雙一步夾心法酶聯(lián)吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被白蛋白(ALB)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
本試劑盒采用雙夾心法酶聯(lián)吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被捕獲的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、品、HRP標(biāo)記的檢測,經(jīng)過溫育并洗滌。
樣品收集、處理及保存
2. :EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
4. 組織勻漿:將組織加入適量鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
1. 酶標(biāo)儀(450nm)
3. 37℃恒溫箱
用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的。顏色的深淺和樣品中呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
豚鼠S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)ELISA試劑盒
操作注意事項
2. 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
4. 嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
試劑的
洗板
2. 自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
3. 樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
5. 棄去,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
繪制曲線:在Excel工作表中,以品濃度作橫坐標(biāo),對應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。
自從Engvall和Perlman(1971)報道建立酶聯(lián)吸附試驗(Enzyme-Linked ImmunosorbentAssays,ELISA)以來,由于ELISA具有快速、、簡便、易于化等優(yōu)點,使其迅速的發(fā)展和廣泛應(yīng)用。盡管早期的ELISA由于特不夠高而妨礙了其在實際中應(yīng)用的步伐,但隨著的不斷改進、材料的不斷更新,尤其是采用基因工程制備包被抗原,采用針對某一抗原表位的單克隆進行ELISA試驗,都大大了ELISA的特,加之電腦化程度的ELISA檢測儀的使用,使ELISA更為簡便實用和化,從而使其成為廣泛應(yīng)用的檢測。如ELISA已被廣泛應(yīng)用于多種和等的診斷。在動物檢疫方面,ELISA在豬傳染性胃腸炎、牛副結(jié)核病、牛傳染性鼻氣管炎、豬偽、藍(lán)舌病等的診斷中已為廣泛采用的。
試劑盒性能
2. 靈敏度檢測濃度小于1.0 mg/mL。
4. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
6. 有效期:6個月
免責(zé)聲明
2. 嚴(yán)格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔(dān)。
原創(chuàng)作者:上海篤瑪生物科技有限公司