使用說明書

試劑盒采用雙一步夾心法酶聯(lián)吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被白蛋白（ALB）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

自從Engvall和Perlman(1971）報道建立酶聯(lián)吸附試驗（Enzyme-Linked ImmunosorbentAssays,ELISA）以來，由于ELISA具有快速、、簡便、易于化等優(yōu)點，使其迅速的發(fā)展和廣泛應(yīng)用。盡管早期的ELISA由于特不夠高而妨礙了其在實際中應(yīng)用的步伐，但隨著的不斷改進、材料的不斷更新，尤其是采用基因工程制備包被抗原，采用針對某一抗原表位的單克隆進行ELISA試驗，都大大了ELISA的特，加之電腦化程度的ELISA檢測儀的使用，使ELISA更為簡便實用和化，從而使其成為廣泛應(yīng)用的檢測。如ELISA已被廣泛應(yīng)用于多種和等的診斷。在動物檢疫方面，ELISA在豬傳染性胃腸炎、牛副結(jié)核病、牛傳染性鼻氣管炎、豬偽、藍舌病等的診斷中已為廣泛采用的。

樣品收集、處理及保存

2.  ：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

4.  組織勻漿：將組織加入適量鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

1. 酶標(biāo)儀（450nm）

3. 37℃恒溫箱

間接ELISA：本法主要用于檢測。（DVH）的ELISA為例，間接ELISA的操作程序如下。⑴ 材料① 包被液、洗滌液、保溫液、底物液、終止液；② DVH包被抗原、酶標(biāo)抗、陰性及陽性DVH參考；待檢鴨；③ ELISA檢測儀、加樣器、聚微量板。⑵ 步驟① 加抗原包被 → 4℃過夜，洗滌三次、拋干② 加待檢 → 37℃ 2小時，洗滌三次、拋干③ 加酶標(biāo) → 37℃ 2小時，洗滌三次、拋干④ 加底物液　→ 37℃ 30分鐘，加終止液⑤ 用ELISA檢測儀測定OD值，并計算出P/N比值。⑶ 結(jié)果判定　已知陽性與已知陰性的比值（P/N）≥2.1，而且已知陽性的OD值≥0.4；在上述條件成立的情況下，如果待檢與已知陰性的比值（P/N）≥2.1，而且待檢的OD值≥0.4，則判為陽性，否則判為陰性。

豚鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶肽38(PACAP-38)ELISA試劑盒

操作注意事項

2.  實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。

4.  嚴格按照說明書中標(biāo)明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

試劑的

洗板

2.  自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

3.  樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加。

5.  棄去，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機洗板）。

7.  每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。

 繪制曲線：在Excel工作表中，以品濃度作橫坐標(biāo)，對應(yīng)OD值作縱坐標(biāo)，繪制出品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。

上海篤瑪生物科技有限公司ELISA試劑盒采用原裝進口，一步孵育，一步洗板，操作時間僅需90分鐘，就能準(zhǔn)確的實驗結(jié)果。剛開起的酶聯(lián)板孔會含有少許水樣，此為正常現(xiàn)象，不會對實驗結(jié)果造成任何影響，您盡可放心使用。本司研發(fā)各種種屬ELISA試劑盒：1、細胞因子檢劑盒，如白介素、選擇素、集落因子，壞死因子，素，轉(zhuǎn)化生長因子，趨化因子，細胞因子受體，粘附分子，生長因子，凋亡因子等等；2、肝纖維化檢測ELISA試劑盒，如纖維連接蛋白，質(zhì)酸，膠原，基質(zhì)金屬蛋白酶因子，基質(zhì)金屬蛋白酶，層粘蛋白等等；3、檢測ELISA試劑盒，如肌鈣蛋白，肌紅蛋白，C-反應(yīng)蛋白等等；4、內(nèi)檢測ELISA試劑盒，如甲狀腺,,性,,,,生長抑素,內(nèi)皮素,皮質(zhì)醇,骨鈣素,催乳素,皮質(zhì),促素,，雌三醇，5-色胺，17-等等；5、自身檢測ELISA試劑盒，如甲狀腺,鹽水可提取核抗原(ENA),抗核,DNA,抗心磷脂,類因子,循環(huán)復(fù)合物,抗胰島細胞,胰蛋白酶原,Sm,大皰性類皰,蛋白酶,短膜蟲法,肝-,肝－－胃,肌內(nèi)膜,角蛋白,抗核,抗核糖體蛋白,抗聚角蛋白微絲蛋白,抗鏈O,抗,抗肌,抗線粒體,抗心肌,抗組蛋白,粒細胞彈性蛋白酶,皮膚,小球基底膜,小球基底膜,髓過氧化物酶,條紋肌,網(wǎng)硬蛋白,胃壁細胞,胃蛋白酶,,性滲透性增強因子等等；6、標(biāo)志物檢測ELISA試劑盒，如標(biāo)志物，組織多肽抗原，相關(guān)，細胞角蛋白片段，胃腸癌，鐵蛋白，糖鏈抗原，神經(jīng)特稀醇化酶，上皮膜抗原，，人抗小鼠，，甲胎蛋白，，，，大隱血檢測，癌胚抗原，β-2微球蛋白等等；7、優(yōu)生優(yōu)育檢測ELISA試劑盒，如早,新生兒TSH,檢測,抗心磷脂,抗帶,抗帶,抗,抗,巨細胞,弓形體,風(fēng)疹,分娩,單核白細胞增多癥,單純皰疹,促素,促,便隱血,HCG等等；8、傳染病檢測ELISA試劑盒，如幽門螺桿菌,乙腦,,丙肝,丁肝,戊肝,庚肝,,,腺,微小B19,天皰,水-帶狀皰疹,生支原體,,沙眼,腮腺炎,人型支原體,,輪,,萊姆病,柯薩奇,抗解尿支原體,軍團菌,結(jié)核,膠原,,甲肝,,急性炎尿胰蛋白酶,,呼吸道合胞,肝吸蟲,副流感,肺炎,帶狀皰疹,傳染性單核細胞增多癥,層粘蛋白,布魯氏桿菌,,,艾柯,EB,A族鏈球菌等等；9、特種蛋白檢測ELISA試劑盒，如球蛋白,抗鏈O-aso,類因子RF,C反應(yīng)蛋白,微量白蛋白,β-2微球蛋白human,鐵蛋白,轉(zhuǎn)鐵蛋白transferrin等等.

試劑盒性能

2.  靈敏度檢測濃度小于1.0 mg/mL。

4.  重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

6.  有效期：6個月

免責(zé)聲明

2.   嚴格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔(dān)。

原創(chuàng)作者：上海篤瑪生物科技有限公司