豚鼠淋巴細胞功能相關抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒

ELISA：本法主要用于檢測型特。該現(xiàn)已成為豬傳染性胃腸炎（TGE）、豬偽（PR）及豬胸膜肺炎（AP）的主要檢測。下面以AP2型的ELISA檢測法為例介紹其操作程序：① 100μl AP2型工作量抗原包被 → 4℃過夜，洗滌三次、拋干② 用200μl緩沖液進行封閉 → 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干③ 加工作量1:4稀釋被檢豬100μl → 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干④ 加100μl工作量兔抗AP2型 → 37℃ 30分鐘，洗滌三次、拋干⑤ 加100μl工作量豬抗兔IgG-HRP → 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干⑥ 加100μl OPD底物液 → 37℃ 20分鐘，加終止液⑦ 用ELISA檢測儀測定OD值。本試驗同時設陰、陽性對照、兔抗AP2型陽性對照、空白對照。

操作注意事項

1. 試劑盒保存在 2-8℃，使用室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正�，F(xiàn)象，水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。

2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。

3. 濃度為 0 的品可視為陰性對照或者空白；按照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋 5 倍，終結果乘以5才是樣本終濃度。

4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

5. 所有組分使用充分搖勻。

6. 若中英文說明書有誤，請以中文說明書為準。

7. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按 1：20 稀釋，即 1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水。

8. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟 1.從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回 4℃。 2. 設置品孔、樣本孔和空白孔，空白孔什么都不加；品孔各加不同濃度的品 50μL； 3. 待測樣本孔先加待測樣本 10μL，再加樣本稀釋液 40μL； 4. 隨后品孔和樣本孔中（空白孔不加）加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測 50μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。 5. 棄去，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置 1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗 板 5 次（也可用洗板機洗板）。 6. 所有孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。 7. 所有孔加入終止液 50μL，15min 內(nèi)，在 450nm 波長處測定各孔的 OD 值。 結果判斷 繪制曲線：在Excel工作表中，以品濃度作橫坐標，對應OD值作縱坐標，繪制出品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。

免責聲明

試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或生物體實驗，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實驗者承擔， 本公司概不負責。 嚴格按照說明書操作，不同批號不可交換使用，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。

 豚鼠淋巴細胞功能相關抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒

雙夾心ELISA：此法與雙夾心ELISA的主要區(qū)別在于：它是采用酶標抗檢查多種大分子抗原，它不僅不必標記每一種，還可試驗的性。此法的基本程序為：① 加（Ab-1）包被 → 4℃過夜，洗滌三次、拋干② 加待檢抗原（Ag） → 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干③ 加用非同種動物生產(chǎn)的特（Ab-2)→ 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干④ 加入酶標抗Ab-2（AB-3）→ 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干⑤ 加底物液 → 37℃ 20分鐘，加終止液⑥ 用ELISA檢測儀測定OD值。

原創(chuàng)作者：上海篤瑪生物科技有限公司