豚鼠Smad同源物7(Smad7/MADH7)ELISA試劑盒

洗板：手工洗板：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標板內的；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下拍幾次；將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內，浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要，重復此數(shù)次。 自動洗板：如果有自動洗板機，應在熟練使用后再用到正式實驗中。

操作注意事項

1. 試劑盒保存在 2-8℃，使用室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正�，F(xiàn)象，水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。

2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。

3. 濃度為 0 的品可視為陰性對照或者空白；按照說明書操作時樣本已經稀釋 5 倍，終結果乘以5才是樣本終濃度。

4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

5. 所有組分使用充分搖勻。

6. 若中英文說明書有誤，請以中文說明書為準。

7. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按 1：20 稀釋，即 1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水。

8. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟 1.從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回 4℃。 2. 設置品孔、樣本孔和空白孔，空白孔什么都不加；品孔各加不同濃度的品 50μL； 3. 待測樣本孔先加待測樣本 10μL，再加樣本稀釋液 40μL； 4. 隨后品孔和樣本孔中（空白孔不加）加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測 50μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。 5. 棄去，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置 1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗 板 5 次（也可用洗板機洗板）。 6. 所有孔加入底物 A、B 各 50μL，37℃避光孵育 15min。 7. 所有孔加入終止液 50μL，15min 內，在 450nm 波長處測定各孔的 OD 值。 結果判斷 繪制曲線：在Excel工作表中，以品濃度作橫坐標，對應OD值作縱坐標，繪制出品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。

免責聲明

試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或生物體實驗，否則所產生的一切后果，由實驗者承擔， 本公司概不負責。 嚴格按照說明書操作，不同批號不可交換使用，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。

 豚鼠Smad同源物7(Smad7/MADH7)ELISA試劑盒

實驗原理：試劑盒采用雙一步夾心法酶聯(lián)吸附試驗（ELISA）。往預先包被小鼠4壬烯醛(4-HNE)捕獲的包被微孔中，依次加入標本、品、HRP標記的檢測，經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的。顏色的深淺和樣品中的小鼠4壬烯醛(4-HNE)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

原創(chuàng)作者：上海篤瑪生物科技有限公司