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人CD63/四旋蛋白30(TSPAN30/CD63)ELISA試劑盒
計(jì)算:以物的濃度為橫坐標(biāo)(對(duì)數(shù)坐標(biāo)),OD值為縱坐標(biāo)(普通坐標(biāo)),在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪出曲線,根據(jù)樣品的OD值由曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用物的濃度與OD值計(jì)算出曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的。顏色的深淺和樣品中呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。
ELISA試劑盒在國(guó)內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)試劑盒、酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)分析試劑盒、酶劑盒等,比較常見(jiàn)的叫法是ELISA檢劑盒、酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒等。ELISA試劑盒自從60-70年代問(wèn)世以來(lái),全 科研工作者的認(rèn)可及推崇,在歐美及很大的推廣,尤其是國(guó)內(nèi)生化域的長(zhǎng)足發(fā)展。Elisa生物試驗(yàn)是一種性高,特強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷。由于其試劑、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在學(xué)檢驗(yàn)的各域中。ELISA檢劑盒適用于體外定性檢測(cè)人或中的抗人類(HEV) IgM ELISA檢測(cè)。
人CD63/四旋蛋白30(TSPAN30/CD63)ELISA試劑盒
ELISA檢劑盒應(yīng)用定性?shī)A心檢測(cè)技術(shù),用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是型HEV毒株核心酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段,分別來(lái)自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM,這些就會(huì)與HEV 的多肽抗原結(jié)合,并固定在上面,洗板除去其它非特和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過(guò)氧化物酶)酶結(jié)合物,經(jīng) 次孵育后,酶結(jié)合物就會(huì)與 次孵育結(jié)合上的HEV IgM相結(jié)合,洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時(shí)會(huì)發(fā)生酶-底物反應(yīng),只有那些含有HEV IgM和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會(huì)發(fā)生顏色變化,加入溶液終止酶和底物間的反應(yīng),并在波長(zhǎng): 450nm處測(cè)量O.D.值,按照本HEV IgMelisa試劑盒的, O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認(rèn)為是初試陽(yáng)性。
用途:
ELISA的基礎(chǔ)是抗原或的固相化及抗原或的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或仍保持其學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或既保留其學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的或抗原)與固相載體表面的抗原或起反應(yīng)。用洗滌的使固相載體上形成的抗原復(fù)合物與中的其他分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定達(dá)到很高的度。 ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定。
然而,影響Elisa試驗(yàn)結(jié)果的因素很多,故加強(qiáng)各個(gè)環(huán)節(jié)的才能充分發(fā)揮其學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。
產(chǎn)品特點(diǎn):
一、、靈敏、特異的;二、的重復(fù)性和可靠性;三、吸附性能好,空白值低,孔底度高的固相載體;四、適用、、組織勻漿液、細(xì)胞上清液、等等多種標(biāo)本類型;五、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。elisa試劑盒回收率是反應(yīng)待測(cè)物在樣品分析中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標(biāo)液1PPM,就是1毫克/升,而作出數(shù)據(jù)為0.99毫克/升,就是說(shuō)你的回收率是99%,這個(gè)與真實(shí)成分有密切的關(guān)系,說(shuō)明的準(zhǔn)確度。比如水中總無(wú)機(jī)氯含量測(cè)定,樣品水中含有無(wú)機(jī)氯20mg/L,取100mL被測(cè)水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無(wú)機(jī)氯樣品,測(cè)定時(shí)忽略體積變化,如果測(cè)定出樣品中無(wú)機(jī)氯為29.8mg/L,則認(rèn)為回收率為99%。
自從Engvall和Perlman(1971)報(bào)道建立酶聯(lián)吸附試驗(yàn)(Enzyme-Linked ImmunosorbentAssays,ELISA)以來(lái),由于ELISA具有快速、、簡(jiǎn)便、易于化等優(yōu)點(diǎn),使其迅速的發(fā)展和廣泛應(yīng)用。盡管早期的ELISA由于特不夠高而妨礙了其在實(shí)際中應(yīng)用的步伐,但隨著的不斷改進(jìn)、材料的不斷更新,尤其是采用基因工程制備包被抗原,采用針對(duì)某一抗原表位的單克隆進(jìn)行ELISA試驗(yàn),都大大了ELISA的特,加之電腦化程度的ELISA檢測(cè)儀的使用,使ELISA更為簡(jiǎn)便實(shí)用和化,從而使其成為廣泛應(yīng)用的檢測(cè)。如ELISA已被廣泛應(yīng)用于多種和等的診斷。在動(dòng)物檢疫方面,ELISA在豬傳染性胃腸炎、牛副結(jié)核病、牛傳染性鼻氣管炎、豬偽、藍(lán)舌病等的診斷中已為廣泛采用的。
ELISA (Enzyme-Linkedimmunosorbent assay)的基礎(chǔ)是抗原或的固相化及抗原或的酶標(biāo)記。這一的基本原理是:①使抗原或結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其活性。②使抗原或與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或,這種酶標(biāo)抗原或既保留其活性,又保留酶的活力。在測(cè)定時(shí),把待測(cè)樣本(測(cè)定其中的或抗原)和酶標(biāo)抗原或按不同的步驟與固相載體表面的抗原或起反應(yīng)。用洗滌的使固相載體上形成的抗原復(fù)合物與其他分開結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢的量直接相關(guān),所以可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺定性或定量分析。由于酶的催化速率很高,所以可地放大反應(yīng)效果,從而使測(cè)定達(dá)到很高的度。
原創(chuàng)作者:上海篤瑪生物科技有限公司