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人金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白1(ADAMTS1)ELISA試劑盒

點擊次數(shù):24 發(fā)布時間:2024/1/5 11:44:12
 人金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白1(ADAMTS1)ELISA試劑盒  

結(jié)果判斷: 繪制曲線:在Excel工作表中,以品濃度作橫坐標(biāo),對應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。

ELISA (Enzyme-Linkedimmunosorbent assay)的基礎(chǔ)是抗原或的固相化及抗原或的酶標(biāo)記。這一的基本原理是:①使抗原或結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其活性。②使抗原或與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或,這種酶標(biāo)抗原或既保留其活性,又保留酶的活力。在測定時,把待測樣本(測定其中的或抗原)和酶標(biāo)抗原或按不同的步驟與固相載體表面的抗原或起反應(yīng)。用洗滌的使固相載體上形成的抗原復(fù)合物與其他分開結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢的量直接相關(guān),所以可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺定性或定量分析。由于酶的催化速率很高,所以可地放大反應(yīng)效果,從而使測定達(dá)到很高的度。

自從Engvall和Perlman(1971)報道建立酶聯(lián)吸附試驗(Enzyme-Linked ImmunosorbentAssays,ELISA)以來,由于ELISA具有快速、、簡便、易于化等優(yōu)點,使其迅速的發(fā)展和廣泛應(yīng)用。盡管早期的ELISA由于特不夠高而妨礙了其在實際中應(yīng)用的步伐,但隨著的不斷改進(jìn)、材料的不斷更新,尤其是采用基因工程制備包被抗原,采用針對某一抗原表位的單克隆進(jìn)行ELISA試驗,都大大了ELISA的特,加之電腦化程度的ELISA檢測儀的使用,使ELISA更為簡便實用和化,從而使其成為廣泛應(yīng)用的檢測。如ELISA已被廣泛應(yīng)用于多種和等的診斷。在動物檢疫方面,ELISA在豬傳染性胃腸炎、牛副結(jié)核病、牛傳染性鼻氣管炎、豬偽、藍(lán)舌病等的診斷中已為廣泛采用的。

人金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白1(ADAMTS1)ELISA試劑盒  

自從Engvall和Perlman(1971)報道建立酶聯(lián)吸附試驗(Enzyme-Linked ImmunosorbentAssays,ELISA)以來,由于ELISA具有快速、、簡便、易于化等優(yōu)點,使其迅速的發(fā)展和廣泛應(yīng)用。盡管早期的ELISA由于特不夠高而妨礙了其在實際中應(yīng)用的步伐,但隨著的不斷改進(jìn)、材料的不斷更新,尤其是采用基因工程制備包被抗原,采用針對某一抗原表位的單克隆進(jìn)行ELISA試驗,都大大了ELISA的特,加之電腦化程度的ELISA檢測儀的使用,使ELISA更為簡便實用和化,從而使其成為廣泛應(yīng)用的檢測。如ELISA已被廣泛應(yīng)用于多種和等的診斷。在動物檢疫方面,ELISA在豬傳染性胃腸炎、牛副結(jié)核病、牛傳染性鼻氣管炎、豬偽、藍(lán)舌病等的診斷中已為廣泛采用的。

ELISA:本法主要用于檢測IgM。由于IgM出現(xiàn)于感染早期,所以檢測出IgM,則可作為某種的早期診斷。ELISA根據(jù)所用標(biāo)記不同可分為標(biāo)記抗原、標(biāo)記、標(biāo)記抗ELISA等幾種,其中以標(biāo)記抗原ELISA比較有代表性,該的主要程序為:① 用抗u鏈(抗IgM重鏈)包被→37℃ 60分鐘后置4℃過夜,洗滌三次、拋干② 加待檢 → 37℃ 2小時,洗滌三次、拋干③ 加酶標(biāo)抗原 → 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干④ 加底物液 → 37℃ 20分鐘,加終止液⑤ 用ELISA檢測儀測定OD值。

免責(zé)聲明:試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或生物體實驗,否則所產(chǎn)生的一切后果,由實驗者承擔(dān), 本公司概不負(fù)責(zé)。嚴(yán)格按照說明書操作,不同批號不可交換使用,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔(dān)。

間接ELISA:本法主要用于檢測。(DVH)的ELISA為例,間接ELISA的操作程序如下。⑴ 材料① 包被液、洗滌液、保溫液、底物液、終止液;② DVH包被抗原、酶標(biāo)抗、陰性及陽性DVH參考;待檢鴨;③ ELISA檢測儀、加樣器、聚微量板。⑵ 步驟① 加抗原包被 → 4℃過夜,洗滌三次、拋干② 加待檢 → 37℃ 2小時,洗滌三次、拋干③ 加酶標(biāo) → 37℃ 2小時,洗滌三次、拋干④ 加底物液 → 37℃ 30分鐘,加終止液⑤ 用ELISA檢測儀測定OD值,并計算出P/N比值。⑶ 結(jié)果判定 已知陽性與已知陰性的比值(P/N)≥2.1,而且已知陽性的OD值≥0.4;在上述條件成立的情況下,如果待檢與已知陰性的比值(P/N)≥2.1,而且待檢的OD值≥0.4,則判為陽性,否則判為陰性。

操作注意事項:1. 試劑盒保存在 2-8℃,使用室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。2. 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。3. 濃度為 0 的品可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋 5 倍,終結(jié)果乘以5才是樣本終濃度。4. 嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作.5. 所有組分使用充分搖勻。6. 若中英文說明書有誤,請以中文說明書為準(zhǔn)。7. 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按 1:20 稀釋,即 1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水。8. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

 

 

 

 

 

 

原創(chuàng)作者:上海篤瑪生物科技有限公司

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