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聯(lián)系人:楊燕燕
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人絲裂原激活蛋白激酶激酶6(MAP2K6/MKK6)ELISA試劑盒
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ELISA:本法主要用于檢測IgM。由于IgM出現(xiàn)于感染早期,所以檢測出IgM,則可作為某種的早期診斷。ELISA根據(jù)所用標記不同可分為標記抗原、標記、標記抗ELISA等幾種,其中以標記抗原ELISA比較有代表性,該的主要程序為:① 用抗u鏈(抗IgM重鏈)包被→37℃ 60分鐘后置4℃過夜,洗滌三次、拋干② 加待檢 → 37℃ 2小時,洗滌三次、拋干③ 加酶標抗原 → 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干④ 加底物液 → 37℃ 20分鐘,加終止液⑤ 用ELISA檢測儀測定OD值。
標記:良好的酶結(jié)合物取決于兩個條件:即價的和高活性的酶。的活性和純度對制備標記至關(guān)重要,因為特反應隨活性和純度的而增強。在酶標記中,的活性有所,故需要純度高、效及抗原親和力強的球蛋白使用親和層析提純的,可性,而且可稀釋使用,非特吸附。
人絲裂原蛋白激酶激酶6(MAP2K6/MKK6)ELISA試劑盒
洗板:手工洗板:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復此數(shù)次。 自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗中。
ELISA:本法主要用于檢測型特。該現(xiàn)已成為豬傳染性胃腸炎(TGE)、豬偽(PR)及豬胸膜肺炎(AP)的主要檢測。下面以AP2型的ELISA檢測法為例介紹其操作程序:① 100μl AP2型工作量抗原包被 → 4℃過夜,洗滌三次、拋干② 用200μl緩沖液進行封閉 → 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干③ 加工作量1:4稀釋被檢豬100μl → 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干④ 加100μl工作量兔抗AP2型 → 37℃ 30分鐘,洗滌三次、拋干⑤ 加100μl工作量豬抗兔IgG-HRP → 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干⑥ 加100μl OPD底物液 → 37℃ 20分鐘,加終止液⑦ 用ELISA檢測儀測定OD值。本試驗同時設陰、陽性對照、兔抗AP2型陽性對照、空白對照。
自從Engvall和Perlman(1971)報道建立酶聯(lián)吸附試驗(Enzyme-Linked ImmunosorbentAssays,ELISA)以來,由于ELISA具有快速、、簡便、易于化等優(yōu)點,使其迅速的發(fā)展和廣泛應用。盡管早期的ELISA由于特不夠高而妨礙了其在實際中應用的步伐,但隨著的不斷改進、材料的不斷更新,尤其是采用基因工程制備包被抗原,采用針對某一抗原表位的單克隆進行ELISA試驗,都大大了ELISA的特,加之電腦化程度的ELISA檢測儀的使用,使ELISA更為簡便實用和化,從而使其成為廣泛應用的檢測。如ELISA已被廣泛應用于多種和等的診斷。在動物檢疫方面,ELISA在豬傳染性胃腸炎、牛副結(jié)核病、牛傳染性鼻氣管炎、豬偽、藍舌病等的診斷中已為廣泛采用的。
試劑盒組成:自備物品1. 酶標儀(450nm)2. 加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒溫箱
雙夾心:本法主要用于檢測大分子抗原,F(xiàn)以檢測雞傳染性法氏囊病(IBDV)的雙夾心ELISA為例介紹本法的操作程序。① 加包被 → 4℃過夜,洗滌三次、拋干② 加待檢抗原 → 37℃ 30分鐘,洗滌三次、拋干③ 加酶標 → 37℃ 30分鐘,洗滌三次、拋干④ 加底物液 → 37℃ 15分鐘,加終止液⑤ 用ELISA檢測儀測定OD值。
原創(chuàng)作者:上海篤瑪生物科技有限公司