​

標(biāo)記：良好的酶結(jié)合物取決于兩個條件：即價的和高活性的酶。的活性和純度對制備標(biāo)記至關(guān)重要，因為特反應(yīng)隨活性和純度的而增強(qiáng)。在酶標(biāo)記中，的活性有所，故需要純度高、效及抗原親和力強(qiáng)的球蛋白使用親和層析提純的，可性，而且可稀釋使用，非特吸附。

競爭ELISA：此法主要用于測定小分子抗原及半抗原，其原理類似于放射測定。其基本程序為：① 包被 → 4℃過夜，洗滌三次、拋干② 加入待檢抗原及一定量的酶標(biāo)抗原（對照孔僅加酶標(biāo)抗原）→ 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干③ 加底物液 → 37℃ 20分鐘，加終止液④ 用ELISA檢測儀測定OD值。被結(jié)合的酶標(biāo)抗原的量由酶催化底物反應(yīng)產(chǎn)生有色產(chǎn)物的量來確定，如果待檢溶液中抗原越多，被結(jié)合的標(biāo)記抗原的量就越少，有色產(chǎn)物就，這樣根據(jù)有色產(chǎn)物的變化就可求出未知抗原的量。此法的優(yōu)點(diǎn)在于快速、特高、且可用于小分子抗原及半抗原的檢測；其主要不足在于每種抗原都要進(jìn)行酶標(biāo)記，而且因為抗原的結(jié)構(gòu)不同，還需應(yīng)用不同的結(jié)合。此外，試驗中應(yīng)用酶標(biāo)抗原的量較多。

ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)試劑盒、酶聯(lián)吸附測定試劑盒、酶聯(lián)分析試劑盒、酶劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢劑盒、酶聯(lián)吸附測定試劑盒等。ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來,全 科研工作者的認(rèn)可及推崇,在歐美及很大的推廣,尤其是國內(nèi)生化域的長足發(fā)展。Elisa生物試驗是一種性高,特強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗診斷。由于其試劑、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在學(xué)檢驗的各域中。ELISA檢劑盒適用于體外定性檢測人或中的抗人類(HEV) IgM ELISA檢測。

人泛素A52殘留核糖體蛋白融合產(chǎn)物1(UBA52)ELISA試劑盒
ELISA檢劑盒應(yīng)用定性夾心檢測技術(shù),用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是型HEV毒株核心酸序列中抗原性很強(qiáng)的肽段,分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM,這些就會與HEV 的多肽抗原結(jié)合,并固定在上面,洗板除去其它非特和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結(jié)合物,經(jīng) 次孵育后,酶結(jié)合物就會與 次孵育結(jié)合上的HEV IgM相結(jié)合,洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時會發(fā)生酶-底物反應(yīng),只有那些含有HEV IgM和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會發(fā)生顏色變化,加入溶液終止酶和底物間的反應(yīng),并在波長: 450nm處測量O.D.值,按照本HEV IgMelisa試劑盒的, O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認(rèn)為是初試陽性。

用途:

ELISA的基礎(chǔ)是抗原或的固相化及抗原或的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或仍保持其學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或既保留其學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標(biāo)本(測定其中的或抗原)與固相載體表面的抗原或起反應(yīng)。用洗滌的使固相載體上形成的抗原復(fù)合物與中的其他分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了反應(yīng)的結(jié)果,使測定達(dá)到很高的度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定。

然而,影響Elisa試驗結(jié)果的因素很多,故加強(qiáng)各個環(huán)節(jié)的才能充分發(fā)揮其學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。

產(chǎn)品特點(diǎn):

一、、靈敏、特異的;二、的重復(fù)性和可靠性;三、吸附性能好,空白值低,孔底度高的固相載體;四、適用、、組織勻漿液、細(xì)胞上清液、等等多種標(biāo)本類型;五、節(jié)省實(shí)驗經(jīng)費(fèi)。elisa試劑盒回收率是反應(yīng)待測物在樣品分析中的損失的程度,損失越少,回收率越高,如果作標(biāo)液1PPM,就是1毫克/升,而作出數(shù)據(jù)為0.99毫克/升,就是說你的回收率是99%,這個與真實(shí)成分有密切的關(guān)系,說明的準(zhǔn)確度。比如水中總無機(jī)氯含量測定,樣品水中含有無機(jī)氯20mg/L,取100mL被測水樣品,加入0.1mL濃度為10mg/mL的含無機(jī)氯樣品,測定時忽略體積變化,如果測定出樣品中無機(jī)氯為29.8mg/L,則認(rèn)為回收率為99%。

雙夾心：本法主要用于檢測大分子抗原�，F(xiàn)以檢測雞傳染性法氏囊�。↖BDV）的雙夾心ELISA為例介紹本法的操作程序。① 加包被 → 4℃過夜，洗滌三次、拋干② 加待檢抗原 → 37℃ 30分鐘，洗滌三次、拋干③ 加酶標(biāo) → 37℃ 30分鐘，洗滌三次、拋干④ 加底物液　→ 37℃ 15分鐘，加終止液⑤ 用ELISA檢測儀測定OD值。

競爭ELISA：此法主要用于測定小分子抗原及半抗原，其原理類似于放射測定。其基本程序為：① 包被 → 4℃過夜，洗滌三次、拋干② 加入待檢抗原及一定量的酶標(biāo)抗原（對照孔僅加酶標(biāo)抗原）→ 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干③ 加底物液 → 37℃ 20分鐘，加終止液④ 用ELISA檢測儀測定OD值。被結(jié)合的酶標(biāo)抗原的量由酶催化底物反應(yīng)產(chǎn)生有色產(chǎn)物的量來確定，如果待檢溶液中抗原越多，被結(jié)合的標(biāo)記抗原的量就越少，有色產(chǎn)物就，這樣根據(jù)有色產(chǎn)物的變化就可求出未知抗原的量。此法的優(yōu)點(diǎn)在于快速、特高、且可用于小分子抗原及半抗原的檢測；其主要不足在于每種抗原都要進(jìn)行酶標(biāo)記，而且因為抗原的結(jié)構(gòu)不同，還需應(yīng)用不同的結(jié)合。此外，試驗中應(yīng)用酶標(biāo)抗原的量較多。

原創(chuàng)作者：上海篤瑪生物科技有限公司