試劑盒性能

1. 特高：由于是抗原的特結(jié)合，因此試驗的特很高，能夠排除其他的。

2. 靈敏度高：由于酶的放大作用，使得試驗的靈敏度大大，能夠檢測出微量的抗原或。

3. 操作簡便：ELISA試驗操作相對簡單，容易，適合于大規(guī)模樣本檢測。

4. 適用范圍廣：可以用于檢測各種抗原、和等生物分子。

樣品收集、處理及保存

1. ：使用不含熱原和內(nèi)的試管，操作中避免任何細胞，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將和紅細胞迅速小心地分離。

2. ：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上清。

3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解 凍并確保樣品均勻地充分解凍。

 操作注意事項：1. 試劑盒保存在 2-8℃，使用室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶，這屬于正�，F(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。3. 濃度為 0 的品可視為陰性對照或者空白；按照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋 5 倍，終結(jié)果乘以5才是樣本終濃度。4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作.5. 所有組分使用充分搖勻。6. 若中英文說明書有誤，請以中文說明書為準。7. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按 1：20 稀釋，即 1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水。8. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

實驗原理

      試劑盒采用雙一步夾心法酶聯(lián)吸附試驗（ELISA）。往預先包被相關指標的的包被微孔中，依次加入標本、品、HRP標記的檢測，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的。顏色的深淺和樣品中的相關指標呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

 人尿苷二葡萄糖神經(jīng)酰胺葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶(UGCG)ELISA試劑盒

操作步驟

1)涂層:微孔板的孔涂上捕獲或抗原。

2)封閉:孔內(nèi)加入封閉劑(如牛白蛋白或羧纖維素)，非特蛋

白質(zhì)結(jié)合。

3)樣本添加:加入含有未知濃度的目標抗原或的樣本。

4)洗滌:去除未結(jié)合的。

5)檢測添加:加入對特定抗原有特的酶標記檢測。

6) 再次洗滌:再次去除未結(jié)合的檢測。

7)底物添加:加入酶的底物，酶作用于底物產(chǎn)生顏色變化。

8)終止反應:加入終止溶液停止酶的反應(在某些類型的ELISA中需要)。

9) 讀數(shù):使用光譜光度計測定每個孔的吸光度(通常是在特定波長下)，吸光度

與樣本中抗原或的濃度成正比。

試劑盒組成：自備物品1. 酶標儀（450nm）2. 加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3. 37℃恒溫箱

標本的采集及保存

1.：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 

2.：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 

3.細胞物上清或其它生物標本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 (注：標本溶血會影響**檢測結(jié)果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。) 

結(jié)果分析

根據(jù)試劑盒提供的品濃度及對應的OD值，利用品繪制的曲線，計算待測樣品的濃度。一般采用擬合曲線法或直線回歸法進行數(shù)據(jù)處理，通過計算待測樣品的濃度。

免責聲明

試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或生物體實驗，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實驗者承擔， 本公司概不負責。

嚴格按照說明書操作，不同批號不可交換使用，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。

標記：良好的酶結(jié)合物取決于兩個條件：即價的和高活性的酶。的活性和純度對制備標記至關重要，因為特反應隨活性和純度的而增強。在酶標記中，的活性有所，故需要純度高、效及抗原親和力強的球蛋白使用親和層析提純的，可性，而且可稀釋使用，非特吸附。

原創(chuàng)作者：上海篤瑪生物科技有限公司