試劑盒性能

1. 特高：由于是抗原的特結(jié)合，因此試驗的特很高，能夠排除其他的。

2. 靈敏度高：由于酶的放大作用，使得試驗的靈敏度大大，能夠檢測出微量的抗原或。

3. 操作簡便：ELISA試驗操作相對簡單，容易，適合于大規(guī)模樣本檢測。

4. 適用范圍廣：可以用于檢測各種抗原、和等生物分子。

樣品收集、處理及保存

1. ：使用不含熱原和內(nèi)的試管，操作中避免任何細胞，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將和紅細胞迅速小心地分離。

2. ：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上清。

3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解 凍并確保樣品均勻地充分解凍。

 雙夾心ELISA：此法與雙夾心ELISA的主要區(qū)別在于：它是采用酶標抗檢查多種大分子抗原，它不僅不必標記每一種，還可試驗的性。此法的基本程序為：① 加（Ab-1）包被 → 4℃過夜，洗滌三次、拋干② 加待檢抗原（Ag） → 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干③ 加用非同種動物生產(chǎn)的特（Ab-2)→ 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干④ 加入酶標抗Ab-2（AB-3）→ 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干⑤ 加底物液 → 37℃ 20分鐘，加終止液⑥ 用ELISA檢測儀測定OD值。

實驗原理

      試劑盒采用雙一步夾心法酶聯(lián)吸附試驗（ELISA）。往預先包被相關(guān)指標的的包被微孔中，依次加入標本、品、HRP標記的檢測，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的。顏色的深淺和樣品中的相關(guān)指標呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

 人單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒

操作步驟

1)涂層:微孔板的孔涂上捕獲或抗原。

2)封閉:孔內(nèi)加入封閉劑(如牛白蛋白或羧纖維素)，非特蛋

白質(zhì)結(jié)合。

3)樣本添加:加入含有未知濃度的目標抗原或的樣本。

4)洗滌:去除未結(jié)合的。

5)檢測添加:加入對特定抗原有特的酶標記檢測。

6) 再次洗滌:再次去除未結(jié)合的檢測。

7)底物添加:加入酶的底物，酶作用于底物產(chǎn)生顏色變化。

8)終止反應:加入終止溶液停止酶的反應(在某些類型的ELISA中需要)。

9) 讀數(shù):使用光譜光度計測定每個孔的吸光度(通常是在特定波長下)，吸光度

與樣本中抗原或的濃度成正比。

布ELISA：（C－ELISA）　C－ELISA（Cloth-ELISA）是加拿大學者Blais,B. W.等于1989年建立的一種新型檢測技術(shù)。該是以疏水性聚脂布（Hydrophobic Polyester Cloth）即滌綸布為固相載體，這種大孔徑的的疏水布具有吸附樣品量大，可為反應提供較大的表面積，反應的性，且容易洗滌，不需特殊儀器等優(yōu)點。其基本原理與Dot-ELISA類似，只是載體不同。以對布氏桿菌抗原的檢測為例，C－ELISA的主要程序為：⑴ 把抗布氏桿菌的包被（吸附）在聚脂布上，并經(jīng)洗滌及封閉；⑵ 加被檢樣品并于室溫下感作30分鐘，然后洗5次；⑶ 加酶標記的抗布氏桿菌，于室溫下感作30分鐘，然后洗滌5次；⑷ 加入底物液顯色；⑸ 測定OD值。

標本的采集及保存

1.：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過一晚后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 

2.：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 

3.細胞物上清或其它生物標本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)吮痉庞?20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。 (注：標本溶血會影響**檢測結(jié)果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。) 

結(jié)果分析

根據(jù)試劑盒提供的品濃度及對應的OD值，利用品繪制的曲線，計算待測樣品的濃度。一般采用擬合曲線法或直線回歸法進行數(shù)據(jù)處理，通過計算待測樣品的濃度。

免責聲明

試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或生物體實驗，否則所產(chǎn)生的一切后果，由實驗者承擔， 本公司概不負責。

嚴格按照說明書操作，不同批號不可交換使用，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。

上海篤瑪生物科技有限公司ELISA試劑盒采用原裝進口，一步孵育，一步洗板，操作時間僅需90分鐘，就能準確的實驗結(jié)果。剛開起的酶聯(lián)板孔會含有少許水樣，此為正常現(xiàn)象，不會對實驗結(jié)果造成任何影響，您盡可放心使用。本司研發(fā)各種種屬ELISA試劑盒：1、細胞因子檢劑盒，如白介素、選擇素、集落因子，壞死因子，素，轉(zhuǎn)化生長因子，趨化因子，細胞因子受體，粘附分子，生長因子，凋亡因子等等；2、肝纖維化檢測ELISA試劑盒，如纖維連接蛋白，質(zhì)酸，膠原，基質(zhì)金屬蛋白酶因子，基質(zhì)金屬蛋白酶，層粘蛋白等等；3、檢測ELISA試劑盒，如肌鈣蛋白，肌紅蛋白，C-反應蛋白等等；4、內(nèi)檢測ELISA試劑盒，如甲狀腺,,性,,,,生長抑素,內(nèi)皮素,皮質(zhì)醇,骨鈣素,催乳素,皮質(zhì),促素,，雌三醇，5-色胺，17-等等；5、自身檢測ELISA試劑盒，如甲狀腺,鹽水可提取核抗原(ENA),抗核,DNA,抗心磷脂,類因子,循環(huán)復合物,抗胰島細胞,胰蛋白酶原,Sm,大皰性類皰,蛋白酶,短膜蟲法,肝-,肝－－胃,肌內(nèi)膜,角蛋白,抗核,抗核糖體蛋白,抗聚角蛋白微絲蛋白,抗鏈O,抗,抗肌,抗線粒體,抗心肌,抗組蛋白,粒細胞彈性蛋白酶,皮膚,小球基底膜,小球基底膜,髓過氧化物酶,條紋肌,網(wǎng)硬蛋白,胃壁細胞,胃蛋白酶,,性滲透性增強因子等等；6、標志物檢測ELISA試劑盒，如標志物，組織多肽抗原，相關(guān)，細胞角蛋白片段，胃腸癌，鐵蛋白，糖鏈抗原，神經(jīng)特稀醇化酶，上皮膜抗原，，人抗小鼠，，甲胎蛋白，，，，大隱血檢測，癌胚抗原，β-2微球蛋白等等；7、優(yōu)生優(yōu)育檢測ELISA試劑盒，如早,新生兒TSH,檢測,抗心磷脂,抗帶,抗帶,抗,抗,巨細胞,弓形體,風疹,分娩,單核白細胞增多癥,單純皰疹,促素,促,便隱血,HCG等等；8、傳染病檢測ELISA試劑盒，如幽門螺桿菌,乙腦,,丙肝,丁肝,戊肝,庚肝,,,腺,微小B19,天皰,水-帶狀皰疹,生支原體,,沙眼,腮腺炎,人型支原體,,輪,,萊姆病,柯薩奇,抗解尿支原體,軍團菌,結(jié)核,膠原,,甲肝,,急性炎尿胰蛋白酶,,呼吸道合胞,肝吸蟲,副流感,肺炎,帶狀皰疹,傳染性單核細胞增多癥,層粘蛋白,布魯氏桿菌,,,艾柯,EB,A族鏈球菌等等；9、特種蛋白檢測ELISA試劑盒，如球蛋白,抗鏈O-aso,類因子RF,C反應蛋白,微量白蛋白,β-2微球蛋白human,鐵蛋白,轉(zhuǎn)鐵蛋白transferrin等等.

原創(chuàng)作者：上海篤瑪生物科技有限公司