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查找:牛烏頭酸酶2(ACO-2)ELISA試劑盒
查找:牛烏頭酸酶2(ACO-2)ELISA試劑盒

牛氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒布ELISA:(C-ELISA) C-ELISA(Cloth-ELISA)是加拿大學(xué)者Blais,B. W.等于1989年建立的一種新型檢測(cè)技術(shù)。該是以疏水性聚脂布(Hydrophobic Polyester Cloth)即滌綸布為固相載體,這種大孔徑的的疏水布具有吸附樣品量大,可為反應(yīng)提供較大的表面積,反應(yīng)的性,且容易洗滌,不需特殊儀器等優(yōu)點(diǎn)。其基本原理與Dot-ELISA類(lèi)似,只是載體不同。以對(duì)布氏桿菌抗原的檢測(cè)為例,C-ELISA的主要程序?yàn)椋孩?把抗布氏桿菌的包被(吸附)在聚脂布上,并經(jīng)洗滌及封閉;⑵ 加被檢樣品并于室溫下感作30分鐘,然后洗5次;⑶ 加酶標(biāo)記的抗布氏桿菌,于室溫下感作30分鐘,然后洗滌5次;⑷ 加入底物液顯色;⑸ 測(cè)定OD值。
操作注意事項(xiàng)
1. 試劑盒保存在 2-8℃,使用室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。
2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3. 濃度為 0 的品可視為陰性對(duì)照或者空白;按照說(shuō)明書(shū)操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋 5 倍,終結(jié)果乘以5才是樣本終濃度。
4. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
5. 所有組分使用充分搖勻。
6. 若中英文說(shuō)明書(shū)有誤,請(qǐng)以中文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。
7. 20×洗滌緩沖液的稀釋?zhuān)赫麴s水按 1:20 稀釋?zhuān)?1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水。
8. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
查找:牛烏頭酸酶2(ACO-2)ELISA試劑盒
操作步驟 1.從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回 4℃。 2. 設(shè)置品孔、樣本孔和空白孔,空白孔什么都不加;品孔各加不同濃度的品 50μL; 3. 待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本 10μL,再加樣本稀釋液 40μL; 4. 隨后品孔和樣本孔中(空白孔不加)加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè) 50μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。 5. 棄去,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置 1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗 板 5 次(也可用洗板機(jī)洗板)。 6. 所有孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。 7. 所有孔加入終止液 50μL,15min 內(nèi),在 450nm 波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的 OD 值。 結(jié)果判斷 繪制曲線(xiàn):在Excel工作表中,以品濃度作橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出品線(xiàn)性回歸曲線(xiàn),按曲線(xiàn)方程計(jì)算各樣本濃度值。
免責(zé)聲明
試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實(shí)驗(yàn)或生物體實(shí)驗(yàn),否則所產(chǎn)生的一切后果,由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān), 本公司概不負(fù)責(zé)。 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作,不同批號(hào)不可交換使用,實(shí)驗(yàn)者違反說(shuō)明書(shū)操作,后果由實(shí)驗(yàn)者承擔(dān)。
牛氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒洗板:手工洗板:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復(fù)此數(shù)次。 自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)中。
原創(chuàng)作者:上海篤瑪生物科技有限公司