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聯(lián)系人:楊燕燕
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技術(shù)文章
資料:兔生長抑素(SST) ELISA 試劑盒@2023產(chǎn)品動態(tài)已更新
兔生長抑素(SST) ELISA 試劑盒
實驗原理
1. 抗體或抗原的吸附:將待測抗原或抗體吸附到固相載體上,常用的載體有微孔板、玻璃纖維、聚苯乙烯等。這些載體表面具有特殊的化學(xué)基團(tuán),能夠與待測抗原或抗體特異性結(jié)合。
2. 酶標(biāo)記的抗體或抗原的結(jié)合:將酶標(biāo)記的抗體或抗原與待測抗原或抗體結(jié)合,形成酶標(biāo)記的抗原-抗體復(fù)合物。酶標(biāo)記的抗體或抗原具有高度的特異性和親和力,能夠與待測抗原或抗體形成穩(wěn)定的復(fù)合物。
3. 底物顯色反應(yīng):當(dāng)酶標(biāo)記的抗原-抗體復(fù)合物與底物溶液接觸時,酶能夠催化底物分解,產(chǎn)生顏色變化。通過測量顏色的變化程度,可以判斷待測抗原或抗體的濃度。
試劑盒性能
1. 檢測范圍:1.95 nmol/L –100 nmol/L。
2. 靈敏度:檢測濃度小于0.78 nmol/L。
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 。
實驗所需自備物品
1. 酶標(biāo)儀(450nm)
2. 加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
試劑盒組成

操作步驟
1. 對應(yīng)板孔中加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品工作液或樣本,37℃孵育90分鐘
2. 棄掉板內(nèi)液體后,立即加入100μL生物素化抗體工作液,37℃孵育60分鐘
3. 棄掉板內(nèi)液體,洗板3次
4. 每孔加入100μL HRP酶結(jié)合物工作液,37℃孵育30分鐘,棄掉板內(nèi)液體,洗板5次
5. 每孔加入90μL底物溶液,37℃孵育15分鐘左右
6. 每孔加入50μL終止液
7. 立即在450nm波長下讀數(shù),處理數(shù)據(jù)
結(jié)果分析
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。
注意事項
1. 試劑盒的質(zhì)量:選擇正規(guī)廠家生產(chǎn)的試劑盒,確保試劑盒的質(zhì)量和穩(wěn)定性。
2. 嚴(yán)格控制實驗條件:實驗過程中要嚴(yán)格控制溫度、pH值、離子強度等條件,以實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。
3. 避免交叉污染:實驗過程中要避免交叉污染,確保每個步驟使用的試劑和材料都是清潔無污染的。
4. 標(biāo)準(zhǔn)化操作:實驗操作要標(biāo)準(zhǔn)化,嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作,避免人為誤差對實驗結(jié)果的影響。
5. 定期校準(zhǔn):定期對實驗儀器進(jìn)行校準(zhǔn),確保儀器的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。
6. 保存好實驗數(shù)據(jù):實驗過程中要保存好實驗數(shù)據(jù),以便后續(xù)分析和處理。
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原創(chuàng)作者:上海篤瑪生物科技有限公司