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推薦：兔不均一核糖核蛋白U (HNRPU) ELISA 試劑盒@2023更新推薦
兔不均一核糖核蛋白U (HNRPU) ELISA 試劑盒
實驗原理
1. 抗體或抗原的吸附：將待測抗原或抗體吸附到固相載體上，常用的載體有微孔板、玻璃纖維、聚苯乙烯等。這些載體表面具有特殊的化學基團，能夠與待測抗原或抗體特異性結合。
2. 酶標記的抗體或抗原的結合：將酶標記的抗體或抗原與待測抗原或抗體結合，形成酶標記的抗原-抗體復合物。酶標記的抗體或抗原具有高度的特異性和親和力，能夠與待測抗原或抗體形成穩(wěn)定的復合物。
3. 底物顯色反應：當酶標記的抗原-抗體復合物與底物溶液接觸時，酶能夠催化底物分解，產(chǎn)生顏色變化。通過測量顏色的變化程度，可以判斷待測抗原或抗體的濃度。
實驗所需自備物品
1. 酶標儀（450nm）
2. 加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
試劑盒組成
| 名稱 | 96 孔配置 | 48 孔配置 | 備注 |
| 微孔酶標板 | 12 孔×8 條 | 12 孔×4 條 | 無 |
| 標準品 | 0.5mL | 0.5mL | 按說明書進行稀釋 |
| 標準品稀釋液 | 6mL | 3mL | 按說明書進行稀釋 |
| 樣本稀釋液 | 6mL | 3mL | 按說明書進行稀釋 |
| 檢測抗體-HRP | 6mL | 3mL | 無 |
| 20×洗滌緩沖液 | 20mL | 20mL | 按說明書進行稀釋 |
| 底物 A | 6mL | 3mL | 無 |
| 底物 B | 6mL | 3mL | 無 |
| 終止液 | 6mL | 3mL | 無 |
| 封板膜 | 2 張 | 2 張 | 無 |
| 說明書 | 1 份 | 1 份 | 無 |
| 自封袋 | 1 個 | 1 個 | 無 |
操作步驟
1. 準備工作：將試劑盒從冰箱中取出，室溫放置30分鐘，使試劑盒恢復至室溫。同時準備好實驗所需的材料和器具。
2. 加樣：在酶標板的弟1個孔中加入標準品50μL，然后在后續(xù)的孔中依次加入待測樣本50μL。
3. 溫育：將酶標板密封，在37℃下溫育30分鐘。
4. 洗滌：用洗滌液清洗酶標板，共洗滌5次。每次洗滌后，用吸水紙輕輕吸干孔內(nèi)液體。
5. 加酶：在每個孔中加入酶標物100μL。
6. 溫育：再次將酶標板密封，在37℃下溫育30分鐘。
7. 洗滌：用洗滌液清洗酶標板，共洗滌5次。每次洗滌后，用吸水紙輕輕吸干孔內(nèi)液體。
8. 加底物：在每個孔中加入底物A液50μL，再加入底物B液50μL。
9. 終止反應：在每個孔中加入終止液50μL。
10. 檢測：用酶標儀在450nm波長下讀取各孔的吸光度（OD值）。
結果分析
根據(jù)標準品和樣本的OD值，繪制標準曲線，從而計算出樣本中角蛋白1（KRT1）的濃度。具體分析方法可參考試劑盒說明書或相關文獻。
注意事項
注意事項：
A 仔細閱讀說明書。
B 檢查試劑盒標簽上的有效期。如果超過有效期，請勿使用。
C 按說明書確定所有試劑齊全（數(shù)量、體積）。
D 標本制備要規(guī)范，每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備（貯存），盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實驗者，注意低溫保存。
E 準備好所有實驗額外所需物品，（比如移液器，試管，清洗器，酶標儀）。
F 按說明書將所用試劑平衡至室溫，根據(jù)檢測標本數(shù)量確定所需試劑的量。
G 檢查試劑盒內(nèi)每種試劑的貯存條件，所有試劑均按照試劑盒內(nèi)說明書推薦的條件存儲。
H 檢查不穩(wěn)定或者變質(zhì)的試劑溶液（比如沉淀或變色）。有些試劑，比如標準品稀釋液或者檢測稀釋液，可能在設計時就含有沉淀物。所有試劑在滴入酶標板之，必需充分混勻。而由于沉淀物的特性，在加入酶標板之，必需不停攪拌。
I 充分的孵育時間和溫度。
J 切勿使用不同生產(chǎn)批號的試劑取代現(xiàn)有試劑或混合現(xiàn)有試劑。
K 在混合或溶解蛋白溶液時，避免泡沫產(chǎn)生。
L 在實驗開始之，安排好實驗流程。
M 在實驗開始之，清潔工作臺。
N 若有問題，應與我公司或代理商的技術支持聯(lián)系
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原創(chuàng)作者：上海篤瑪生物科技有限公司
