產(chǎn)品展示
CD46使用,膜輔蛋白/內(nèi)源性輔助因子活性蛋白抗體制作
點擊次數(shù):147發(fā)布時間:2015/7/4 17:09:04

更新日期:2015/7/4 17:09:04
所 在 地:美洲
產(chǎn)品型號:
品牌名稱:Abcam
優(yōu)質(zhì)供應
詳細內(nèi)容
{規(guī)格}:0.1ml 0.2ml
{研究領(lǐng)域}腫瘤 細胞生物 神經(jīng)生物學 信號轉(zhuǎn)導 新陳代謝
{抗體來源}Rabbit mouse
{克隆類型}多克隆,單克隆
{交叉反應}Human, Mouse, Rat, Pig, Horse, chiken等
{產(chǎn)品應用}WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蠟切片需做抗原修復)
not yet tested in other applications.optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
{性 狀}Lyophilized or Liquid
{濃 度}1mg/1ml
{亞 型}IgG
{純化方法}affinity purified by Protein A
{儲 存 液}Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
{保存條件}Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
PubMedPubMed
膜輔蛋白/內(nèi)源性輔助因子活性蛋白抗體的實驗步驟
1. 直接免疫熒光法測抗原
⑴基本原理
將熒光素標記在相應的抗體上,直接與相應抗原反應。其優(yōu)點是方法簡便、特異性高,非特異性熒光染色少。缺點是敏感性偏低;而且每檢查一種抗原就需要制備一種熒光抗體。此法常用于細菌、病毒等微生物的快速檢查和腎炎活檢、皮膚活檢的免疫病理檢查。
⑵試劑與儀器
磷酸鹽緩沖鹽水(PBS):0.01mol/L,pH7.4
熒光標記的抗體溶液:以0.01mol/L,pH7.4的PBS進行稀釋
緩沖甘油:分析純無熒光的甘油9份+ pH9.2 0.2M碳酸鹽緩沖液1份配制
搪瓷桶三只(內(nèi)有0.01mol/L,pH7.4的PBS 1500ml)
有蓋搪瓷盒一只(內(nèi)鋪一層浸濕的紗布墊)
熒光顯微鏡
玻片架
濾紙
37℃溫箱等。
膜輔蛋白/內(nèi)源性輔助因子活性蛋白抗體注意事項
1)對熒光標記的抗體的稀釋,要保證抗體的蛋白有一定的濃度,一般稀釋度不應超過1:20,抗體濃度過低,會導致產(chǎn)生的熒光過弱,影響結(jié)果的觀察。
2)染色的溫度和時間需要根據(jù)各種不同的標本及抗原而變化,染色時間可以從10 min到數(shù)小時,一般30 min已足夠。染色溫度多采用室溫(25℃左右),高于37℃可加強染色效果,但對不耐熱的抗原(如流行性乙型腦炎病毒)可采用0-2℃的低溫,延長染色時間。低溫染色較37℃30 min效果好的多。
3)為了保證熒光染色的正確性,首次試驗時需設置下述對照,以排除某些非特異性熒光染色的干擾。
① 標本自發(fā)熒光對照:標本加1-2滴0.01mol/L,pH7.4的PBS。
② 特異性對照(抑制試驗):標本加未標記的特異性抗體,再加熒光標記的特異性抗體。
③ 陽性對照:已知的陽性標本加熒光標記的特異性抗體。
如果標本自發(fā)熒光對照和特異性對照呈無熒光或弱熒光,陽性對照和待檢標本呈強熒光,則為特異性陽性染色。
4)一般標本在高壓 燈下照射超過3min,就有熒光減弱現(xiàn)象,經(jīng)熒光染色的標本在當天觀察,隨著時間的延長,熒光強度會逐漸下降。
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