產(chǎn)品展示
CD46制作,膜輔蛋白/內(nèi)源性輔助因子活性蛋白抗體(人)使用
點(diǎn)擊次數(shù):145發(fā)布時(shí)間:2015/7/4 17:07:38

更新日期:2015/7/4 17:07:38
所 在 地:美洲
產(chǎn)品型號(hào):
品牌名稱:Abcam
優(yōu)質(zhì)供應(yīng)
詳細(xì)內(nèi)容
{規(guī)格}:0.1ml 0.2ml
{研究領(lǐng)域}腫瘤 細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 新陳代謝
{抗體來(lái)源}Rabbit mouse
{克隆類型}多克隆,單克隆
{交叉反應(yīng)}Human, Mouse, Rat, Pig, Horse, chiken等
{產(chǎn)品應(yīng)用}WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蠟切片需做抗原修復(fù))
not yet tested in other applications.optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
{性 狀}Lyophilized or Liquid
{濃 度}1mg/1ml
{亞 型}IgG
{純化方法}affinity purified by Protein A
{儲(chǔ) 存 液}Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
{保存條件}Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
PubMedPubMed
膜輔蛋白/內(nèi)源性輔助因子活性蛋白抗體(人)的實(shí)驗(yàn)步驟
1. 直接免疫熒光法測(cè)抗原
⑴基本原理
將熒光素標(biāo)記在相應(yīng)的抗體上,直接與相應(yīng)抗原反應(yīng)。其優(yōu)點(diǎn)是方法簡(jiǎn)便、特異性高,非特異性熒光染色少。缺點(diǎn)是敏感性偏低;而且每檢查一種抗原就需要制備一種熒光抗體。此法常用于細(xì)菌、病毒等微生物的快速檢查和腎炎活檢、皮膚活檢的免疫病理檢查。
⑵試劑與儀器
磷酸鹽緩沖鹽水(PBS):0.01mol/L,pH7.4
熒光標(biāo)記的抗體溶液:以0.01mol/L,pH7.4的PBS進(jìn)行稀釋
緩沖甘油:分析純無(wú)熒光的甘油9份+ pH9.2 0.2M碳酸鹽緩沖液1份配制
搪瓷桶三只(內(nèi)有0.01mol/L,pH7.4的PBS 1500ml)
有蓋搪瓷盒一只(內(nèi)鋪一層浸濕的紗布?jí)|)
熒光顯微鏡
玻片架
濾紙
37℃溫箱等。
膜輔蛋白/內(nèi)源性輔助因子活性蛋白抗體(人)注意事項(xiàng)
1)對(duì)熒光標(biāo)記的抗體的稀釋,要保證抗體的蛋白有一定的濃度,一般稀釋度不應(yīng)超過(guò)1:20,抗體濃度過(guò)低,會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)生的熒光過(guò)弱,影響結(jié)果的觀察。
2)染色的溫度和時(shí)間需要根據(jù)各種不同的標(biāo)本及抗原而變化,染色時(shí)間可以從10 min到數(shù)小時(shí),一般30 min已足夠。染色溫度多采用室溫(25℃左右),高于37℃可加強(qiáng)染色效果,但對(duì)不耐熱的抗原(如流行性乙型腦炎病毒)可采用0-2℃的低溫,延長(zhǎng)染色時(shí)間。低溫染色較37℃30 min效果好的多。
3)為了保證熒光染色的正確性,首次試驗(yàn)時(shí)需設(shè)置下述對(duì)照,以排除某些非特異性熒光染色的干擾。
① 標(biāo)本自發(fā)熒光對(duì)照:標(biāo)本加1-2滴0.01mol/L,pH7.4的PBS。
② 特異性對(duì)照(抑制試驗(yàn)):標(biāo)本加未標(biāo)記的特異性抗體,再加熒光標(biāo)記的特異性抗體。
③ 陽(yáng)性對(duì)照:已知的陽(yáng)性標(biāo)本加熒光標(biāo)記的特異性抗體。
如果標(biāo)本自發(fā)熒光對(duì)照和特異性對(duì)照呈無(wú)熒光或弱熒光,陽(yáng)性對(duì)照和待檢標(biāo)本呈強(qiáng)熒光,則為特異性陽(yáng)性染色。
4)一般標(biāo)本在高壓 燈下照射超過(guò)3min,就有熒光減弱現(xiàn)象,經(jīng)熒光染色的標(biāo)本在當(dāng)天觀察,隨著時(shí)間的延長(zhǎng),熒光強(qiáng)度會(huì)逐漸下降。
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