產(chǎn)品展示
ARIP2a制作,激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗體使用
點(diǎn)擊次數(shù)：36發(fā)布時(shí)間：2015/7/4 3:23:02
更新日期：2015/7/4 3:23:02
所 在 地：美洲
產(chǎn)品型號(hào)：
品牌名稱(chēng)：Abcam
相關(guān)標(biāo)簽：ARIP2a 激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗體
優(yōu)質(zhì)供應(yīng)
詳細(xì)內(nèi)容
品牌：國(guó)產(chǎn) abcam
靶點(diǎn)：Rabbit等其他種屬
濃度：1mg/1ml
規(guī)格：0.1ml 0.2ml
應(yīng)用范圍： 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
適應(yīng)物種： Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Sheep,
克 隆 性： 是
保存條件： 低溫
免 疫 原： KLH conjugated synthetic peptide derived from human ACE2 C-terminus
交叉反應(yīng)：Hu Mo Rat Dog Pig Sheep
產(chǎn)品應(yīng)用：WB ELISA IP IHC-P IHC-F Flow-Cyt ICC IF
激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗體常見(jiàn)方法分析：
單克隆抗體的免疫抗原，從純度上說(shuō)雖不要求很高，但高純度的抗原使得到所需單抗的機(jī)會(huì)增加，同時(shí)可以減輕篩選的工作量。因此，免疫抗原是越純?cè)胶茫瑧?yīng)根據(jù)所研究的抗原和實(shí)驗(yàn)室的條件來(lái)決定。
熒光素標(biāo)記
A、 異硫氰酸熒光素（FITC）標(biāo)記FITC標(biāo)記抗體的原理是在堿性條件下，F(xiàn)ITC 的異硫氰基能與IgG的自由氨基結(jié)合，形成IgG與熒光素的結(jié)合物。FITC是*常用的熒光素，其次選用TRITC（四甲基異硫氰酸羅丹明）。FITC和TRITC是常用的雙標(biāo)記組合。 血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抗體其標(biāo)記步驟如下：
a. 以碳酸鹽緩沖液（PH9.3，Na2CO3 8.6g，NaHCO3 17.3g，蒸餾水1000ml）調(diào)整抗體濃度至10mg/ml。
b. 取5ml抗體溶液置于10ml小燒杯中。
c. 稱(chēng)取1mg FITC溶于0.2ml DMSO中，待溶解后立即緩慢滴加于抗體液內(nèi)，邊加邊輕攪；其后室溫避光作用2小時(shí)。
d. 將交聯(lián)物經(jīng)Sephadex G25或G50柱層析除去游離的熒光素；分管收集峰為標(biāo)記的抗體。
e. FITC的結(jié)合物質(zhì)量鑒定IgG量（mg/ml）=（OD280-OD495×0.35）/1.4F/P=2.87×OD495/（OD280-OD495×0.35），一般說(shuō)，F(xiàn)ITC對(duì)抗體的摩爾比為3：1時(shí)適合于組織切片染色，為5-6：1時(shí)適合于細(xì)胞懸液染色。以標(biāo)記抗體染色各種抗原，測(cè)定其特異性染色滴度和非特異染色的程度。
f. 標(biāo)記抗體的保存：宜保存于4℃，加NaN3防腐。
B、 異硫氰酸羅丹明（TRITC）標(biāo)記: 基本與FITC標(biāo)記相同。
同位素標(biāo)記
必須強(qiáng)調(diào)的是在使用同位素標(biāo)記單抗或其他蛋白之前，應(yīng)掌握同位素操作和防護(hù)知識(shí)。正常情況下應(yīng)包括避免物理的接觸和對(duì)γ-射線照射的有效保護(hù)，操作和使用同位素標(biāo)記抗體時(shí)，應(yīng)利用防護(hù)裝置，并合理處置含放射性的廢料。
A、碘標(biāo)記用碘標(biāo)記抗體是一種有效的標(biāo)記方法。125I衰變產(chǎn)生低能的γ和Χ射線，很容易被檢測(cè)出來(lái)，而其60天的半衰期保證足夠的有效使用期，且能很方便地處理放射廢料。*常用的碘標(biāo)記方法是氯胺T法，即將氧化劑氯胺T加入到抗體和碘化物的溶液中，Na125I在氯胺T作用下I轉(zhuǎn)化成I2，游離I2可與抗體分子中酪氨酸和一些組氨酸發(fā)生鹵化反應(yīng)，用還原劑和游離酪氨酸終止反應(yīng)，經(jīng)凝膠過(guò)濾將標(biāo)記的抗體與碘化酪氨酸及還原劑分離開(kāi)。其主要操作步驟如下：
a. 在進(jìn)行標(biāo)記之前，先選用截流分子量為20000-50000的凝膠，制備1ml凝膠柱，然后分別用10倍體積的1%BSA/PBS/0.02%疊氮鈉和PBS洗滌柱體，封住柱下口，備用。
B、b. 加入10ug純化單抗至含有25ul 2.5mol/L磷酸鈉（PH7.5）的1.5ml指形管內(nèi)。隨后，加入500uCi Na125I混勻。
激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗體保存條件：
Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month ａnd for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
抗體作用原理
（1）特異性結(jié)合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞，通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁(yè)p傷。然而，抗體可通過(guò)與病毒或毒素的特異性結(jié)合，直接發(fā)揮中和病毒的作用。
（2）激活補(bǔ)體：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過(guò)經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過(guò)替代途徑激活補(bǔ)體。
（3）結(jié)合細(xì)胞：不同類(lèi)別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，參與免疫應(yīng)答。
（4）可通過(guò)胎盤(pán)及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動(dòng)免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
（5）具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
（6）抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用�？贵w可被中性鹽類(lèi)沉淀。在生產(chǎn)上�？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
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