產(chǎn)品展示
ATP4B/H+K+ ATPase作用,氫鉀ATP酶通道蛋白抗體生產(chǎn)商
點擊次數(shù)：77發(fā)布時間：2015/7/3 15:58:09
更新日期：2015/7/3 15:58:09
所 在 地：美洲
產(chǎn)品型號：
品牌名稱：Abcam
優(yōu)質(zhì)供應(yīng)
詳細內(nèi)容
產(chǎn)品名稱 氫鉀ATP酶通道蛋白抗體
產(chǎn)品縮寫 ATP4B/H+K+ATPase
蛋 白 名 Potassium-transporting ATPase subunit beta
別 稱 ATP6B
免 疫 原 多肽
來 源 兔
特 異 性 抗人、大鼠、小鼠
克隆類型 多克隆
應(yīng) 用 IH(P)免疫組化(石蠟)；IH(F)免疫組化(冰凍)；IC細胞免疫化學(xué)；WB免疫印跡
成 分 200μg/ml親和純化抗體，0.01M PBS，30%甘油。
保存條件 連續(xù)使用時4°C存儲，保質(zhì)期六個月；長期存儲時建議分裝為10ul以上小包裝-20°C存儲，并避免反復(fù)凍融，保質(zhì)期一年。
背景資料 The protein encoded by this gene belongs to a family of P-type cation-transporting ATPases. The gastric H+, K+-ATPase is a heterodimer consisting of a high molecular weight catalytic alpha subunit ａnd a smaller but heavily glycosylated beta subunit. This enzyme is a proton pump that catalyzes the hydrolysis of ATP coupled with the exchange of H(+) ａnd K(+) ions across the plasma membrane. It is also responsible for gastric acid secretion. This gene encodes the beta subunit of the gastric H+, K+-ATPase.
氫鉀ATP酶通道蛋白抗體的鑒定
對制備的McAb進行系統(tǒng)的鑒定是十分必要的，應(yīng)做下述幾個方面的鑒定：
1．抗體特異性的鑒定
除用免疫原（抗原）進行抗體的檢測外，還應(yīng)該用與其抗原成分相關(guān)的其它抗原進行交叉試驗，方法可用ELISA、IFA法。例如：①制備抗黑色素瘤細胞的McAb，除用黑色素瘤細胞反應(yīng)外，還應(yīng)該用其它臟器的腫瘤細胞和正常細胞進行交叉反應(yīng)，以便挑選腫瘤特異性或腫瘤相關(guān)抗原的單克隆抗體。②制備抗重組的細胞因子的單克隆抗體，應(yīng)首先考慮是否與表達菌株的蛋白有交叉反應(yīng)，其次是與其它細胞因子間有無交叉。
2．McAb的Ig類與亞類的鑒定
一般在用酶標或熒光素標記的第二抗體進行篩選時已經(jīng)基本上確定了抗體的Ig類型。如果用的是酶標或熒光素標記的兔抗鼠IgG或IgM，則檢測出來的抗體一般是IgG類或IgM類。至于亞類則需要用標準抗亞類血清系統(tǒng)作雙擴或夾心ELISA來確定。在作雙擴試驗時，如加入適量的PEG（3%），更有利于沉淀線的形成。
3．McAb中和活性的鑒定
用動物或細胞的保護實驗來確定McAb的生物學(xué)活性。例如，如果確定抗病毒McAb的中和活性，則可用抗體和病毒同時接種于易感的動物或敏感的細胞，來觀察動物或細胞是否得到抗體的保護。
4．McAb識別抗原表位的鑒定
用競爭結(jié)合試驗，測相加指數(shù)的方法，測定McAb所識別抗原位點，來確定McAb的識別的表位是否相同。
5．McAb親合力的鑒定
用ELISA或RIA競爭結(jié)合試驗來確定McAb與相應(yīng)抗原結(jié)合的親合力。
氫鉀ATP酶通道蛋白抗體原理對制備的McAb進行系統(tǒng)的鑒定是十分必要的，應(yīng)做下述幾個方面的鑒定：
1．抗體特異性的鑒定
除用免疫原（抗原）進行抗體的檢測外，還應(yīng)該用與其抗原成分相關(guān)的其它抗原進行交叉試驗，方法可用ELISA、IFA法。例如：①制備抗黑色素瘤細胞的McAb，除用黑色素瘤細胞反應(yīng)外，還應(yīng)該用其它臟器的腫瘤細胞和正常細胞進行交叉反應(yīng)，以便挑選腫瘤特異性或腫瘤相關(guān)抗原的單克隆抗體。②制備抗重組的細胞因子的單克隆抗體，應(yīng)首先考慮是否與表達菌株的蛋白有交叉反應(yīng)，其次是與其它細胞因子間有無交叉。
2．McAb的Ig類與亞類的鑒定
一般在用酶標或熒光素標記的第二抗體進行篩選時已經(jīng)基本上確定了抗體的Ig類型。如果用的是酶標或熒光素標記的兔抗鼠IgG或IgM，則檢測出來的抗體一般是IgG類或IgM類。至于亞類則需要用標準抗亞類血清系統(tǒng)作雙擴或夾心ELISA來確定。在作雙擴試驗時，如加入適量的PEG（3%），更有利于沉淀線的形成。
3．McAb中和活性的鑒定
用動物或細胞的保護實驗來確定McAb的生物學(xué)活性。例如，如果確定抗病毒McAb的中和活性，則可用抗體和病毒同時接種于易感的動物或敏感的細胞，來觀察動物或細胞是否得到抗體的保護。
4．McAb識別抗原表位的鑒定
用競爭結(jié)合試驗，測相加指數(shù)的方法，測定McAb所識別抗原位點，來確定McAb的識別的表位是否相同。
5．McAb親合力的鑒定
用ELISA或RIA競爭結(jié)合試驗來確定McAb與相應(yīng)抗原結(jié)合的親合力。
(1)特異性結(jié)合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞，通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而，抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合，直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)激活補體：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細胞，參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺激機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用�？贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上�？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
(7)通過與細胞Fc受體結(jié)合發(fā)揮多種生物效應(yīng)
①調(diào)理作用
IgG、IgM的Fc段與吞噬細胞表面的FcγR、FcμR結(jié)合，增強其吞噬能力，通常將抗體促進吞噬細胞吞噬功能的作用稱為抗體的調(diào)理作用 (opsonization)。
②發(fā)揮抗體依賴的細胞介導(dǎo)的細胞毒作用。
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