產(chǎn)品展示
ATP2c1/Ca++ ATPase成分,鈣離子ATP酶通道蛋白抗體作用
點擊次數(shù)：60發(fā)布時間：2015/7/3 15:55:12
更新日期：2015/7/3 15:55:12
所 在 地：美洲
產(chǎn)品型號：
品牌名稱：Abcam
優(yōu)質(zhì)供應(yīng)
詳細內(nèi)容
產(chǎn)品名稱 鈣離子ATP酶通道蛋白抗體
產(chǎn)品縮寫 ATP2C1
蛋 白 名 Calcium-transporting ATPase type 2C member 1
別 稱 HHD; BCPM; PMR1; SPCA1; hSPCA1; ATP2C1A
來 源 小鼠
特 異 性 抗人,猴
分 子 量 100kDa
克隆類型 單克隆抗體：IgG1；克隆號：4G12
應(yīng) 用 WB免疫印跡；ELISA
成 分 Ascitic fluid containing 0.03% sodium azide.
免 疫 原 Purified recombinant fragment of ATP2C1 expressed in E. Coli.
保存條件 連續(xù)使用時4°C存儲，保質(zhì)期六個月；長期存儲時建議分裝為10ul以上小包裝-20°C存儲，并避免反復(fù)凍融，保質(zhì)期一年。
背景資料 ATP2C1, also known as PMR1, it belongs to the family of P-type cation transport ATPases. This magnesium-dependent enzyme catalyzes the hydrolysis of ATP coupled with the transport of the calcium. The human homologue, ATP2C1 (also
designated SPLA in rat), also regulates the transport of calcium in the Golgi
complex ａnd is related to other P-type ATPases family members, such as the
sarco(endo)plasmic calcium ATPase (SERCA) ａnd the plasma membrane calcium
ATPase (PCMA). ATP2C1 is a transmembrane protein that exists as two
splice variants, which vary by 20 amino acids. Defects in ATP2C1 cause Hailey-Hailey disease, which is an autosomal dominant disorder that is characterized by blisters ａnd erosions of the skin. These findings provide further evidence that PMR1 plays a key role in maintaining the integrity of the epidermis by controlling intracellular calcium signaling.
鈣離子ATP酶通道蛋白抗體的鑒定
對制備的McAb進行系統(tǒng)的鑒定是十分必要的，應(yīng)做下述幾個方面的鑒定：
1．抗體特異性的鑒定
除用免疫原（抗原）進行抗體的檢測外，還應(yīng)該用與其抗原成分相關(guān)的其它抗原進行交叉試驗，方法可用ELISA、IFA法。例如：①制備抗黑色素瘤細胞的McAb，除用黑色素瘤細胞反應(yīng)外，還應(yīng)該用其它臟器的腫瘤細胞和正常細胞進行交叉反應(yīng)，以便挑選腫瘤特異性或腫瘤相關(guān)抗原的單克隆抗體。②制備抗重組的細胞因子的單克隆抗體，應(yīng)首先考慮是否與表達菌株的蛋白有交叉反應(yīng)，其次是與其它細胞因子間有無交叉。
2．McAb的Ig類與亞類的鑒定
一般在用酶標或熒光素標記的第二抗體進行篩選時已經(jīng)基本上確定了抗體的Ig類型。如果用的是酶標或熒光素標記的兔抗鼠IgG或IgM，則檢測出來的抗體一般是IgG類或IgM類。至于亞類則需要用標準抗亞類血清系統(tǒng)作雙擴或夾心ELISA來確定。在作雙擴試驗時，如加入適量的PEG（3%），更有利于沉淀線的形成。
3．McAb中和活性的鑒定
用動物或細胞的保護實驗來確定McAb的生物學(xué)活性。例如，如果確定抗病毒McAb的中和活性，則可用抗體和病毒同時接種于易感的動物或敏感的細胞，來觀察動物或細胞是否得到抗體的保護。
4．McAb識別抗原表位的鑒定
用競爭結(jié)合試驗，測相加指數(shù)的方法，測定McAb所識別抗原位點，來確定McAb的識別的表位是否相同。
5．McAb親合力的鑒定
用ELISA或RIA競爭結(jié)合試驗來確定McAb與相應(yīng)抗原結(jié)合的親合力。
鈣離子ATP酶通道蛋白抗體原理對制備的McAb進行系統(tǒng)的鑒定是十分必要的，應(yīng)做下述幾個方面的鑒定：
1．抗體特異性的鑒定
除用免疫原（抗原）進行抗體的檢測外，還應(yīng)該用與其抗原成分相關(guān)的其它抗原進行交叉試驗，方法可用ELISA、IFA法。例如：①制備抗黑色素瘤細胞的McAb，除用黑色素瘤細胞反應(yīng)外，還應(yīng)該用其它臟器的腫瘤細胞和正常細胞進行交叉反應(yīng)，以便挑選腫瘤特異性或腫瘤相關(guān)抗原的單克隆抗體。②制備抗重組的細胞因子的單克隆抗體，應(yīng)首先考慮是否與表達菌株的蛋白有交叉反應(yīng)，其次是與其它細胞因子間有無交叉。
2．McAb的Ig類與亞類的鑒定
一般在用酶標或熒光素標記的第二抗體進行篩選時已經(jīng)基本上確定了抗體的Ig類型。如果用的是酶標或熒光素標記的兔抗鼠IgG或IgM，則檢測出來的抗體一般是IgG類或IgM類。至于亞類則需要用標準抗亞類血清系統(tǒng)作雙擴或夾心ELISA來確定。在作雙擴試驗時，如加入適量的PEG（3%），更有利于沉淀線的形成。
3．McAb中和活性的鑒定
用動物或細胞的保護實驗來確定McAb的生物學(xué)活性。例如，如果確定抗病毒McAb的中和活性，則可用抗體和病毒同時接種于易感的動物或敏感的細胞，來觀察動物或細胞是否得到抗體的保護。
4．McAb識別抗原表位的鑒定
用競爭結(jié)合試驗，測相加指數(shù)的方法，測定McAb所識別抗原位點，來確定McAb的識別的表位是否相同。
5．McAb親合力的鑒定
用ELISA或RIA競爭結(jié)合試驗來確定McAb與相應(yīng)抗原結(jié)合的親合力。
(1)特異性結(jié)合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞，通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而，抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合，直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)激活補體：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細胞，參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺激機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上�？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
(7)通過與細胞Fc受體結(jié)合發(fā)揮多種生物效應(yīng)
①調(diào)理作用
IgG、IgM的Fc段與吞噬細胞表面的FcγR、FcμR結(jié)合，增強其吞噬能力，通常將抗體促進吞噬細胞吞噬功能的作用稱為抗體的調(diào)理作用 (opsonization)。
②發(fā)揮抗體依賴的細胞介導(dǎo)的細胞毒作用。
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