產(chǎn)品展示
BAX,豬Bcl-2相關(guān)X蛋白ELISA試劑盒
點擊次數(shù)：55發(fā)布時間：2015/7/2 14:35:49
更新日期：2015/7/2 14:35:49
所 在 地：美洲
產(chǎn)品型號：
品牌名稱：R&D
相關(guān)標簽：BAX 豬Bcl-2相關(guān)X蛋白ELISA試劑盒說明書
優(yōu)質(zhì)供應
詳細內(nèi)容
保存條件：2-8℃低溫保存
保質(zhì)期：6個月，所有試劑盒均提供*新批次。
試劑盒成分：酶標板，試劑，標準品等。
二、間接法是檢測抗體*常用的方法，其原理為利用酶標記的抗抗體以檢測已與固相結(jié)合的受檢抗體，故稱為間接法。操作步驟如下：
(1)將特異性抗原與固相載體連接，形成固相抗原：洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。
(2)加稀釋的受檢血清：其中的特異抗體與抗原結(jié)合，形成固相抗原抗體復合物。經(jīng)洗滌后，固相載體上只留下特異性抗體。其他免疫球蛋白及血清中的雜質(zhì)由于不能與固相抗原結(jié)合，在洗滌過程中被洗去。
(3)加酶標抗抗體：與固相復合物中的抗體結(jié)合，從而使該抗體問接地標記上酶。洗滌后，固相載體上的酶量就代表特異性抗體的量。例如欲測人對某種疾病的抗體，可用酶標羊抗人IgG抗體。
(4)加底物顯色：顏色深度代表標本中受檢抗體的量。
本法只要更換不同的固相抗原，可以用一種酶標抗抗體檢測各種與抗原相應的抗體。
三、標本要求
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
3．組織處理：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐３?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4)，用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
四、判定豬Bcl-2相關(guān)X蛋白ELISA試劑盒結(jié)果計算
對于新入行不久，對ELISA的結(jié)果分析這塊不太熟悉�？蛻舻膶嶒炇峭ㄟ^人源的蛋白作為抗原，兔源多克隆抗體作為一抗（我們就是為了通過做ELISA來檢測其效價），然后通過辣根過氧化物作為二抗及顯色組分。實驗做完了，但不知道怎么分析結(jié)果，例如標準曲線怎么做之類的。另外，還想問一下，有沒有實用的軟件可用來分析。對于客戶的問題回答：
間接ELISA要是試劑盒，會有標準品的，把標準品按一定濃度梯度稀釋一塊兒做（一般有三個重復），*后酶標儀或分光光度計比色，用軟件（oringe）繪制標準曲線，的出公式，按公式將樣品帶入公式，
用于ELISA結(jié)果計算*方便的是logit曲線。曲線的橫坐標用標樣各濃度（ng/ml 或其他單位）的自然對數(shù)表示，縱坐標用各濃度顯色值的logit值表示。Logit值的計算方法如下：
B/B0 B
Logit（B/B0）=ln———— =ln————
1-B/B0 B0-B
其中B0是0ng/ml孔的顯色值，B是其它濃度的顯色值。
五、豬Bcl-2相關(guān)X蛋白ELISA試劑盒所需要樣本處理及要求:
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。
2. 血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右 (2000-3000轉(zhuǎn)/分)去除顆粒。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清 。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆�。標本融化后仍然保�?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4)，用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
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